Работа 21. Гидролиз нуклеоиротеидов дрожжей (2часа)

Цель занятия - изучить химический состав нуклеопротеидов.

Содержапие работы. Провести кислотный гидролиз дрожжей и открыть продукты гидролиза - полипептиды, гетероциклические ос­нования, углеводы и фосфорную кислоту.

Подготовка к занятиям. Знать строение сложных белков - про­теидов нуклеиновых кислот, их роль в биосинтезе белков, передаче

наследственной.

Литература [2, С.164; 4, С. 91-94; 6, С. 99-108; 7, С.127-129: 8, С. 102-106].

Вопросы для самоконтроля

1. Какие белки относятся к нуклеопротендам?

2. Какие простые белки входят в состав нуклеопротендов?

3. Какие вещества образуются при полном гидролизе нуклеопро-теитов? Приведите схему гидролиза.

Аппаратура и реактивы: штатив с пробирками, пипетки, колба с обратным холодильником, воронка, спиртовка, фильтр, стакан хими­ческий на 100 мл, дрожжи прессованные, 5% -ный раствор серной ки­слоты, 10 %-ный раствор NaОН, 1% -ный раствор сульфата меди, молибденовокислый аммоний.

Ход работы

Проведение гидролиза. В колбу для гидролиза поместить 5 г дрожжей, добавить 15 мл 5%-ного раствора серной кислоты. Кол­бочку закрыть пробкой с обратным холодильником и осторожно ки­пятить в течение часа. После охлаждения гидролизат отфильтровать в химический стакан и использовать для анализа продуктов гидролиза.

Обнаружение простых белков. В пробирку налить 5 капель гид­ролизата. добавить 10 капель 10% -ною раствора NаОH и одну кап­лю 1%-ного раствора сульфата меди. Пробирку встряхнуть и наблю­дать положительную биуретовую реакцию (розовая или фиолетовая окраска).

Открытие пентоз (рибозы и дезоксирибозы). В пробирку налить 5 капель гидролизата, добавить 5 капель раствора NаОН и 5 капель раствора сульфата меди до появления неисчезающего осадка гидро­окиси меди Сu(ОН)₂ Жидкость встряхнуть и нагреть до кипения. На­блюдать появление желтого или красного осадка.

Открытие фосфорной кислоты. В пробирку налить 10 капель мо­либденового реактива, добавить 5 капель гидролизата и кипятить на пламени горелки. В присутствии фосфорной кислоты жидкость ок­рашивается в лимонно-желтый цвет. Пробирку охладить под струей холодной воды и наблюдать выпадение желтого кристалического осадка комплексного соединения фосфорно-молибденового аммония:

12(NH₄)₂МgO₄ + Н₃РO₄+ 21НNO₃ → 21NН₄NO₃ + (NН₄)₃PO ∙ 12H₂O + 12Н₂O

Контрольные вопросы.

1 .В чем суть биуретовой реакции?

2.Какие азотистые основания образуются при гидролизе нуклео-протеидов?

3.Какие ткани богаты дезоксирибокуклеопротеидами?

Работа № 22. Получение мочевой кислоты из помета голубей и изучение ее свойств (3 часа)

Цель занятия - получить мочевую кислоту из голубиного поме­та, изучить ее свойства.

Содержание работы. Выделить мочевую кислоту из помета го­лубей, рассмотреть кристаллы мочевой кислоты под микроскопом, проделать качественную реакцию на мочевую кислоту и изучить ее свойства.

Подготовка к занятию. Изучить конечные продукты белкового обмена у птиц, рептилий, млекопитающих, химическое строение и свойства мочевой кислоты.

Литература [2, с. 134-138; 4, с. 282].

Вопросы для самоконтроля

1. Напишите структурную формулу мочевой кислоты.

2. Почему у птиц и рептилий конечным продуктом белкового об­мена является мочевая кислота, а не мочевина?

3. Что такое подагра?

Аппаратура и реактивы: штатив с пробирками, ступка с пести­ком, воронка, ватный и бумажный фильтры, плитка, кипящая водяная баня, микроскоп, предметные стекла, углекислый калий, соляная ки­слота (1 : 15). 0,1 н. раствор щелочи, серный эфир, сульфат меди, концентрированная азотная кислота, концентрированный раствор аммиака.

Ход работы

Отвесьте 2 г сухого голубиного помета и тщательно разотрите его в порошок в фарфоровой ступке. Перенесите порошок в колбу на 250 мл, добавьте 2 г углекислого калия (К₂СO₃) и 60 мл дистиллиро­ванной воды. Прокипятите смесь, горячую жидкость с помощью во­ронки и ватного фильтра профильтруйте в другую колбу, в которую предварительно влейте 50 мл раствора соляной кислоты (1 часть ки­слоты в 15 частях воды). Дайте жидкости отстояться в течение 30 мин. Отфильтруйте осадок с помощью бумажного фильтра. Осто­рожно промойте осадок холодной водой. Осторожно возьмите стек­лянной палочкой часть осадка с фильтра, поместите его в кайлю дис­тиллированной воды на предметное стекло и рассмотрите в микро­скоп. Зарисуйте увиденное.под микроскопом. Оставшийся осадок пе­ренесите и фарфоровую чашечку и высушите на кипящей бане. С чистой мочевой кислотой заводского приготовления проделайте сле­дующие реакции: на растворимость ее в различных растворителях, на восстановление и мурексидную пробу.

Контрольные вопросы

1. Почему для выделения мочевой кислоты Вам был предложен помет голубей, а не моча крупного рогатого скота?

2. Что можно сказать о растворимости мочевой кислоты в раз­личных растворителях?

3. Для чего нужен К₂СО₃ при выделении мочевой кислоты из по­мета голубей'.'

4. На основании чего Вы можете заключить, что полученное Ва­ми вещество является мочевой кислотой?

5. Почему у вегетарианцев меньше шансов заболеть подагрой?