1.1.3.2. Общие методы окраски

I. Окраска гематоксилин-эозином

1.а) Самый распространённый метод окраски. б) Сочетает основной и кислый красители. в) Поэтому позволяет выявить почти все клетки и многие неклеточные структуры. 2. При этом ядра прокрашиваются гематоксилином, т.е. приобретают сине-фиолетовый цвет, а цитоплазма красится эозином в желтовато-розовый цвет. 3. Замечание: используемый гематоксилин готовится по методу Эрлиха: окисляется до гематеина калийными квасцами.

1. Препарат - срез тонкой кишки. Окраска гематоксилин-эозином. (*)   а) На снимке видны кишечные ворсинки (1): они находятся на внутренней поверхности тонкой кишки.   б) Ворсинки покрыты одним слоем эпителиальных клеток.   в) Ядра (2) этих клеток – фиолетового, а цитоплазма (3) – розового цвета.

Полный размер

(*) Препараты, отмеченные в теме 1 звёздочкой и имеющие порядковый номер, изучаются на практическом занятии, а также входят в тесты по этой теме.

II. Окраска мазков по Романовскому

1. Применяется для окраски мазков крови и красного костного мозга. Здесь тоже используются 2 красителя: основной – азур II, окрашивающий базофильные структуры в тёмно-синий цвет, и кислый – эозин, красящий оксифильные структуры в ярко-розовый цвет. 2. Отличия от приготовления срезов таковы: фиксацию мазков проводят чистым метанолом; окрашивание продолжают всего 30-45 мин, а не несколько часов;для заключения под покровное стекло используют кедровое масло, а не канадский бальзам. 3. В результате эритроциты приобретают розовый цвет,цитоплазма большинства лейкоцитов – голубой или синий цвет,цитоплазматическиегранулы окрашиваются в зависимости от их природы.

Препарат – мазок крови. Среди многочисленных эритроцитов видны: лейкоцит (1) с очень мелкой нейтрофильной (фиолетово-розовой) зернистостью в цитоплазме,а также гораздо более мелкиетромбоциты.

III. Окраска железным гематоксилином (по методу Генденгайна)

1. Препарат предварительно обрабатывают (протравляют) железноаммиачными квасцами, а потом обрабатывают гематоксилином. 2. Структуры приобретают коричневато-серый цвет. 3. Хорошо выявляются
структуры ядра, границы клеток,мышечные волокна. Препарат - срез языка. В мышечных волокнах видны ядра (1) и отчётливая поперечная исчерченность.

1.1.3.3. Выявление неклеточных структур соединительной ткани

I. Выявление коллагеновых волокон

А. Окраска по методу Маллори. 1. Краситель – смесь кислого фуксина, анилинового синего и оранжевого G. 2. Коллагеновые волокна окрашиваются в синий цвет.
Препарат - срез мышцы. Мышечные волокна (1) – розовые, а прослойки соединительной ткани (2 и 3) между ними – синие.
2. Препарат - срез яичника кролика. Окраска по Маллори. (*) а) На снимке - женская половая клетка (ооцит), находящаяся в фолликуле яичника. Цитоплазма (1) клетки окрашена в слабо-розовый, окружающая её блестящая оболочка (2) - в сине-голубой, а ядра фолликулярных клеток (3) - в фиолетовый цвет.	Полный размер
б) Синий цвет блестящей оболочки свидетельствует о том, что в ней, помимо прочих компонентов, содержатся коллагеновые волокна. 3. Окраска по Маллори используется не только для выявления компонентов соединительной ткани, но и в иных целях – например, для дифференциации эндокринных клеток гипофиза.
Б. Окраска по методу Ван Гизона. Красители – пикриновая кислота и кислый фуксин: коллагеновые волокна окрашиваются в ярко-красный цвет, а элементы других тканей (напр., мышечные волокна) – вжёлтый цвет.

II. Выявление ретикулярных волокон – импрегнация серебром.

1. Препарат обрабатывают аммиачным раствором серебра, а затем – восстановителями. 2. Выделяющееся серебро осаждается на ретикулярных (аргирофильных) волокнах (богатых SH-группами), и волокна приобретают чёрный цвет.
Препарат - срез лимфоузла. Видны многочисленные ретикулярные волокна (1), образующие густую сеть.

III. Выявление эластических элементов

А. Окраска орсеином: эластические волокна и мембраны (если таковые имеются) приобретают вишнёвый цвет; остальные структуры –слабо-розовый.
Препарат - срез аорты. В её средней оболочке (II) обнаруживаются многочисленные эластические мембраны (1) – в виде толстых извилистых линий, расположенных концентрически.
Б. Окраска пикрофуксином и гематоксилином: эластические волокна окрашиваются в жёлтый цвет, коллагеновые волокна – вкрасный цвет, ядра клеток – вфиолетовый цвет.
Препарат - срез эластической связки. Видны пучки эластических волокон (1) и между ними – клетки (фиброциты) (2).

IV. Выявление элементов костной ткани – окраска по методу Шморля

1. Вначале кусочек кости для размягчения подвергают декальцинации (с помощью кислоты). 2. Краситель – раствор тионина. 3. Стенки костных полостей и канальцев (выстланные сетью коллагеновых волокон) окрашиваются в тёмно-коричневый цвет; остальной фон – светло-коричневый.
3. Препарат - срез трубчатой кости. Окраска по Шморлю. (*) В костном веществе видны костные полости (1), содержащие тела костных клеток (остеоцитов), и костные канальцы (2), содержащие отростки остеоцитов.	Полный размер