Физ. карта низкого разрешен ия

Генетическа я карта сцепления

Физические карты хромосомы 19 человека

p – короткое плечо, q – длинное плечо

Упорядоченные

маркеры

Расстояние в сантиморганидах

Перекрывающиеся

клоны

Рестриктазная карта контига

Последователь

ность

нуклеотидов

Флуоресцентная гибридизация in situ FISH – Fluorescent In Situ Hybridization

	Подготов	Подготов
		ка
	ка зонда
		клеток
		или
		хромосо
		м

Физическое картирование YAC-ДНК с

помощью FISH

FISH – флуоресцентная гибридизация in situ

Голубой цвет -индивидуальны е цепи YAC-ДНК

Красный и зеленый – меченые полинуклеотидн ые зонды

Разрешение метода – от 3 до 5 т.п.н.

Флуоресцентная

Идентификация всех хромосом человека методом FISH

(Chromosome Painting)

Хромосомные территории в интерфазных ядрах (многоцветная FISH)

Хромосомы в	Хромосомы 12, 14 и
интерфазном ядре	15 в интерфазном
фибробластов человека	ядре лимфоцитов
	мыши

Секвенирование ДНК по методу Сэнгера

Frederick Sanger

		Стратегия
	Геномн	секвенирования
		больших геномов
	ая ДНК
		методом
	BAC-	«дробовика»
		(Shotgun method)
	библиот
	ека

Упорядоченные клоны, объединенные в протяженные

контиги: выбирается наиболее короткий путь секвенирования

BAC-клон, выбранный для секвенирования

Фрагменты BAC, секвенируемые методом дробовика

Объединение клонов по перекрыванию Собранная последовательность

Заполнение пробела между двумя контигами хромосомной ДНК: Прогулка по хромосоме

нуклеотидные зонды к известным концевым последователь видуальных клонов ход к неизвестной соседней последовательности

Исследование экспрессии генов на уровне транскрипции

«Северный» блоттинг (Northern blotting)

Авторадиогра

Окраска фия бромистым этидием

1977 г.