15. Факторы патогенности n. Gonorrhoeae. Патогенез гонококковой инфекции, особенности течения у мужчин и женщин, исходы. Бленнорея новорожденных (эпидемиология, профилактика).

Основные факторы патогенности: капсуула, пили 4 типа, эндотоксин, белки наружной мембраны, секретируемые факторы персистенции, бактериоцины, ферменты. Капусла (микрокапсула) - сиаловая кислота, блокирует активацию комплемента, защищает от фагоцитоза, способствует внутриклеточной локализации гонококка Ворсинки (пили, фимбрии) 4 типа – факторы адгезии гонококка к поверхности клеток слизистой оболочки мочеполового тракта. Также способствуют внутриэпителиальной инвазии и повышают устойчивость гонококка к фагоцитозу + атрактивная активность ( привлечение бактерий к клеточной поверхности)

Белки наружной мембраны (Opa, Opc, pI, pII и др.) – факторы колонизации. Усиливают адгезию, внутриклеточную инвазию, антифагоцитарную активность и устойчивость к бактерицидности сыворотки. Бактериоцины – факторы колонизации Эндотоксин – комплекс белка и липоолигосахарида – участвует в деструктивном действии патогена на эпителий слизистых оболочек. Гиалуронидаза – фактор распространения в межклеточном пространстве, что приводит к поражению органов малого таза (восходящая гонорея) Протеазы – разрывают клеточные связи, нарушают целостность мембран и разжижают слизь IgA-протеаза – разрушает секреторные антитела Лизоцим, каталаза, супероксиддисмутаза, B-лактамаза – факторы микробного антагонизма Определенный процент штаммов устойчив к антибиотикам за счет наличия R-плазмид, продукции B-лакамазы и других факторов антибиотикорезистентности.

Патогенез гонококковой инфекции, особенности течения у мужчин и женщин, исходы: На слизистой оболочке гонококки с помощью пилей закрепляются на поверхности эпителиальных клеток. В месте входных ворот посредством IgA-протеазы и поверхностных белков возбудитель подавляет защитные факторы организма и размножается, колонизируя эпителий. Под действием ЛОС происходит синтез цитокинов, вызывающих развитие воспалительной реакции. В результате этого наступает гибель и слущивание эпителиальных клеток, нарушается процесс самоочищения слизистых оболочек. Затем Por-белок гонококка встраивается в мембрану эпителиальных клеток, и с помощью Ора-белка наружной мембраны возбудитель проникает путем эндоцитоза (“непрофессионального” фагоцитоза) внутрь эпителиальной клетки с образованием фагосомы. Внутри клетки фагосомы сливаются, формируя вакуоли, в которых гонококки размножаются. В дальнейшем вакуоли сливаются с базальной мембраной эпителиальных клеток, а гонококки проникают в субэпителиальную ткань или в кровоток. Таким образом, в развитии гонококковой инфекции возможны локальные или системные проявления Генерализованная гонококковая инфекция возникает редко. При этом поражаются суставы, кожа, сердце, мозговые оболочки. У мужчин заболевание протекает преимущественно остро, в виде уретрита с дизурией и обильными гнойными выделениями. У женщин более чем в 50% случаев болезнь протекает стерто, может принимать первично-хроническую форму, отсюда увеличивается риск передачи инфекции при половом контакте.

При распространении инфекции у мужчин возникают эпидидимит, орхит, у женщин – вульвовагинит, эндометрит, сальпингит, процесс может переходить на брюшину. В отсутствие лечения распространяющийся фиброз и спайки ведут к стриктурам уретры, обтурации семявыносящего протока, фаллопиевых труб, что приводит к бесплодию.

Бленнорея новорожденных (эпидемиология, профилактика):

До 50% новорожденных заражается гонореей от больной матери при прохождении через родовые пути. В этом случае развивается офтальмия новорожденных (бленнорея). Офтальмия (бленнорея) новорожденных обнаруживается у ребенка на 2-3 день после родов. Вначале она проявляется водянистыми желтоватыми выделениями из глаз. Через сутки отмечается сильная отечность и покраснение век, а выделения становятся мутными. Еще через 4-5 дней краснота век уменьшается, выделения приобретают гнойный характер. Должна быть обязательная первичная обработка новорожденного (закапывание в конъюнктивальную полость обоих глаз по одной капле 2% раствора азотнокислого серебра или сульфацила натрия) для профилактики бленнореи.

16. Общая характеристика P. aeruginosa (таксономия, морфология, тинкториальные свойства). Экология. Культуральные свойства синегнойной палочки. Эпидемиология, спектр заболеваний. Принципы лабораторной диагностики.

сем. Pseudomonadaceae род Pseudomonas вид Pseudomonas aeruginosa

Морфология и тинкториальные свойства: Грамотрицательные подвижные прямые палочки, расположенные одиночно, попарно или в виде цепочек. Подвижны, 1-2 полярно расположенных жгутика (монотрихи/амфитрихи). Спор не образуют. Пили 4 типа. При определенных условиях продуцируют капсулоподобную внеклеточную слизь полисахаридной природы. Необлигатные паразиты. Антигенная структура: сложная. О-антиген (ЛПС, АГ клеточной стенки) используется для серотипирования штаммов. H-антиген (белок жгутика) является протективным, на его основе получают вакцины. Также антигены пилей обнаружены, + синегнойная палочка продуцирует токсины обладающие антигенными свойствами: экзотоксин А, протеаза, эластаза, внеклеточная слизь.

Экология: Бактерии локализуются на коже в местах богатых потовыми и сальными железами, на слизистой носоглотки, в желудочно-кишечном тракте и т.д. Источники инфекции – люди (больные/бактерионосители) и природные резервуары (почва, пресные и соленые водоемы). У 5-10% людей в норме колонизируют кишечник.. Может возникнуть при иммунодефиците (диабет, лейкоз, ожоги, муковисцидоз) и на фоне нормальной иммунологической реактивности организма. Адгезивная активность увеличивается при повышении температуры окр.среды ( ванны, бани) Культуральные свойства: Облигатный аэроб, ферментирует Глюкозу, АЛЬФА и БЕТА гемолиз на кровяном агаре , запах Жасмина ( из-за синтеа триметиламина), культивируются на простых пит средах . Пигмент – пиоцианин ( голубовато-зеленый), образуют слизистые колонии (у капсульных штаммов). Способна расти при температуре 42 С(37), что отличает ее от других псевдомонад. Окрашивают повязки больных в пигмент. Эпидемиология, спектр заболеваний: Оппуртонистический патоген. Синегнойная инфекция относится к сапронозам (т.е. возбудитель накапливается на объектах внешней среды, где создается резервуар инфекции, обусловливающий эпидемиологическую опасность). Заражение может быть как эндогенным (аутоинфицирование) так и экзогенным. Механизм и путь передачи: контактный, респираторный, кровяной, фекально-оральный Встречаются повсеместно: водопроводы, вентиляции, фрукты/овощи, полотенца, дых.аппараты и т.д. Возникновению внутрибольничной инфекции способствует несоблюдение режимов стерилизации и дезинфекции инструментов и аппаратуры, применение инфицированных лекарственных средств (глазные капли, мази), использование неэффективных дезинфектантов и антисептиков. В стационарах циркулируют штаммы синегнойной палочки с повышенной вирулентностью и множественной лекарственной устойчивостью к антибиотикам и антисептикам. Источники госпитальной инфекции – пациенты и носители возбудителей, включая медперсонал.

Синегнойная палочка вызывает гнойно-воспалительные заболевания различной локализации: раневые инфекции, ожоговую болезнь, менингиты, инфекции мочевыводящих путей, кожи, заболевания глаз, некротическую пневмонию, сепсис и др. Летальность от синегнойного сепсиса достигает 50%. Локальные инфекции: абсцессы, флегмоны, пневмони, раневые инфекции, хронические интоксикации и пр. Системные инфекции: сепсис, септикопиемия Принципы лабораторной диагностики: Бактериологический метод: Материалами для исследования служат кровь (при септицемии), спинномозговая жидкость (при менингите), гной и раневое отделяемое (при инфицированных ранах и ожоговых поражениях), моча (при инфекциях мочевыводяших путей), мокрота (при инфекциях респираторного тракта) и др. Материал засевают на мясо-пептонный агар (МПА), кровяной агар, селективные среды.

Бактериоскопия не эффективна! Серологический метод: направлен на обнаружение специфических антител к антигенам палочки ( экзотоксин А и ЛПС) – РСК, РПГА. Окончательная идентификация проводится на основании изучения биохимической

активности. Для внутривидовой идентификации бактерий проводят серотипирование, пиоцинотипирование , фаготипировние.

17. Основные факторы патогенности P. aeruginosa. Синегнойная инфекция, особенности, клинические проявления. P.aeruginosa как возбудитель госпитальных и катетер-ассоциированных инфекций. Особенности иммунитета, принципы лабораторной диагностики, проблемы антибиотикотерапии.

Пили 4 типа и внеклеточная (экстрацеллюлярная) слизь ЛПС наружной мембраны – свойства эндотоксина, участие в развитии лихорадки, олигурии, лейкопении Экзотоксин А – цитотоскин, нарушает клеточный метаболизм в результате подавления синтеза белка в клетках и тканях. Вместе с протеазой подавляет синтез иммуноглобулинов и вызывает нейтропению (угнетает способность В-лимфоцитов плазматических клеток вырабатывать антитела. = инвазия). Продуцируется в виде протоксина. Обладает протективными свойствами (антитела к нему защищают клетки хозяина от его повреждающего действия и препятсвуют бактериемии и сепсису). Экзотоксин S (экзокоэнзим) – есть только у высоковирулентных штаммов. Механизм неясен. Такие штаммы вызывают летальный исход. Оба экзотоксина нарушают активность фагоцитов. Лейкоцидин – цитотоскин с токсическим действием на гранулоциты крови человека Энтеротоксин и факторы проницаемости – роль в развитии местных поражений при кишечных формах. Вызывает нарушения водно-солевого обмена Гемолизины (фосфолипаза C и липаза) – разрушают фосфолипиды в составе сурфактанта на альвеолярной поверхности легких, вызывая ателектаз при патологии респираторного тракта (некротическием изменения, так как разрушает сурфактант + высвобождение медиаторов воспаления из тромбоцитов, нейтрофилов, базофилов

Нейраминидаза – колонизация муцина респираторного тракта Эластаза + коллагеназа + протеаза + экзотоксин А – вызывают кровоизлияния (геморрагии), деструкцию тканей и некроз в очагах поражения при инфекциях глаз, пневмонии, септициемии синегнойной этиологии. Гидролизуют компоненты соединительной ткани (коллаген, эластин, ламинин), белки плотных межклеточных соединений, иммуноглобулины, способствуя микробной адгезии и инвазии. Особенности: 1. Создание биопленок (скопления клеток и связывающий их внеклеточный матрикс) – защита от иммунных атак 2. Ограниченная потребность в питательных веществах, обеспечивающая сохранение жизнеспособности в условиях почти полного отсутствия источников питания (может даже размножаться в дез.растворах) 3. Высокая резистентность (нечувствительность к АБ благодаря R-плазмидам (на уровне хромосомных генов-конститутивная) + плохая проницаемость мембраны из-за дефекта поринов + синтез пенициллиназы)

Клинические проявления: Синегнойная палочка вызывает гнойно-воспалительные заболевания различной локализации: раневые инфекции, уши, ожоговую болезнь, менингиты, инфекции мочевыводящих путей, кожи, заболевания глаз, некротическую пневмонию, сепсис и др. Летальность от синегнойного сепсиса достигает 50%.

P.aeruginosa как возбудитель госпитальных и катетер-ассоциированных инфекций:

P. aeruginosa обладает способностью к неспецифической адгезии на имлантируемых устройствах (катетерах). Микроколонии бактерий объединяются в сплошную биопленку, которая представляет из себя несколько слоев микробных клеток, покрытых общим гликокаликсом (полимер полисахаридной природы). Распространение по внеклеточным пространствам обеспечивают секретируемые белки, обладающие ферментативной активностью: протеазы, эластаза, липаза + могут размножаться в дез.расторах предназначенных для обработки и хранения катетров. Внутрибольничная инфекция может быть связана с катетеризацией мочевого пузыря, эндоскопическим исследованием, промыванием ран, перевязкой, обработкой антисептиком ожоговой поверхности и др. Инфицирование происходит через грязные руки персонала, инструменты, на поверхности которых микроб образует биопленку, или с использованием контаминированных растворов.

Особенности иммунитета: Исходя из патогенеза иммунитет должен включать два механизма: антитоксический иммунитет (антитела нейтрализующие токсины) и антиинвазивный иммунитет (базируется на нейтрофилзависимом воспалении, которое определяет патогенетическую сущность гнойного процесса,т.е. нейтрофилы взаимодействуют с опсонинами создавая кооперацию). В сыворотке крови обнаруживают антитоксические и антибактериальные антитела, однако их роль в защите заболеваний мало изучена. Например, при муковисцидозе в крови больных много антител, но они не обеспечивают должного усиления фагоцитоза. Также антитела неполноценны при хронической синегнойной инфекции. Но иммунитет все же есть, иначе не было бы иммунокомпетентных людей, получается что защита выстраивается по нескольким направлениям: 1) барьерные функции кожи и слизистых; 2) киллинг бактерий: фагоциты(нейтрофилы); 3) антиадгезивные механизмы; 4) антиинвазивные реакции; 5) антитоксический иммунитет; 6) антивирулентные воздействия на P. aeruginosa

Принципы лабораторной диагностики:

Материал – зависит от локализации инфекции: отделяемое из ран, кровь, спинно-мозговая жидкость, моча, мокрота и др 1)Бактериологический (основной) -на питательном агаре ( круглые, плоские , слизистые колонии), а среда окрашивается в сине-зеленый пигмент 2)Серологический - ИФА и серологические реакции

Бактериоскопия не эффективна! Серологический метод: направлен на обнаружение специфических антител к антигенам палочки ( экзотоксин А и ЛПС) – РСК, РПГА. Окончательная идентификация проводится на основании изучения биохимической

активности. Для внутривидовой идентификации бактерий проводят серотипирование, пиоцинотипирование , фаготипировние.

Проблемы антибиотикотерапии:

Повышенная устойчивость к антибиотикам: нечувствительность (блокада внутриклеточной диффузии-конститутивная, на хромосом.генах) + набор R-плазмид (детеминируют (ген.направление клетки) невосприимчивость к бета-лактамным и многим другим антибиотикам, адапативная устойчивость) + построение биопленок.

Главным рычагом воздействия на инфекцию являются цефалоспорины, которые обладают антипсевдомонадной активность ( у них большая резистентность к бета-лактамазам). Спец.профилактики – нет. Бактериофаги не доказаны, противоречивые результаты.

18. Общая характеристика семейства Enterobacteriaceae (примеры родовых таксонов, морфология, тинкториальные свойства). Принципы культивирования энтеробактерий. Экология энтеробактерий. Роль энтеробактерий в патологии человека (варианты заболеваний). Семейство: Enterobacteriaceae. Роды: более 20, наибольшее значение в патологии человека играют:

а) патогенные:

• Шигеллы

• Сальмонеллы

• Эшерихии (патогенные, или диареегенные, варианты);

• Ерсинии

б) условно-патогенные (более 37 видов):

• Эшерихии (условно-патогенные варианты),

• Клебсиела,

• Протеус,

Морфология и тинкториальные свойства: Граммотрицательные ( розовые), полиморфные палочки, мелкие и средние, не образуют эндоспор (исключ. Шигеллы и Клебсиелы), у Клебсиелы есть капсула, у остальных нет, у Клебсиелы и Шигеллы – есть жгутики с одной стороны (атрихи), остальные – перитрихи . Антигены энтеробактерий состоят из: 1) О-антигена, который локализуется в клеточной стенке; 2) К-антигена (это поверхностный, капсульный антиген); 3) Н-антигена (термолабильного, жгутикового); 4) пилифимбриального антигена; он есть у бактерий, имеющих ворсинки, пили, фимбрии (Иерсинии) Принципы культивирования энтеробактерий: На простых пит средах(кроме Иерсиний), на МПА, температура 37 градусов, факультативные анаэробы, образуют гладкие колонии, Селективная среда есть только у Эшерихии Коли – среда ЭНДО (Эшерихии образуют красно-малиновые колонии, металлический блеск). Все представители ферментируют глюкозы брожжением. Энтеробактерии обладают широким спектром биохимической активности, которая служит основой для подразделения внутри семейства на роды, а внутри некоторых родов на виды. Экология энтеробактерий: Условно-патогенные микроорганимзы, входят в состав микрофлоры человека и животных. Экологическая ниша – ЖКТ (комменсалы – биоценоз толстой кишки) Роль энтеробактерий в патологии человека (варианты заболеваний): Все патогенные энтеробактерии могут вызывать у человека острые кишечные инфекции, условно-патогенные – гнойно-воспалительные заболевания и пищевые токсикоинфекции Представители родов Esherichia, Salmonella, Shigella являются возбудителями острых кишечных инфекций Энтеропатогенные иерсинии Y.pseudotuberculosis/Y.enterocolitica вызывают псевдотуберкулез и кишечный иерсиниоз, а Y.petis – чуму Представители родов Klebsiella, Proteus, Providencia, Serratia являются возбудителями внутрибольничных инфекций, а некоторые из них вызывают пищевые токсикоинфекции, заболевания органов респираторного и мочевыделительного трактов Факторы патогенности: -ЛПС эндотоксин -Факторы инвазивности (жгутики) -Факторы адгезии (пили, поверхностные белки клеточной стенки, агглютинины различной природы и т.д.), -Факторы агрессивности (обеспечивающие выживание бактерий в цитоплазме фагоцитов и в сыворотке крови), -Белковые токсины (вырабатываются некоторыми вариантами различных видов).

Резистентность во внешней среде: Сравнительно высокая, особенно устойчив протей, а иерсинии при низких температурах сохраняют активность метаболических процессов (что обуславливает увеличение обсемененности ими пищевых продуктов при хранении последних в холодильнике).