Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
лабы бх.doc
Скачиваний:
315
Добавлен:
13.02.2015
Размер:
4.61 Mб
Скачать

2. Основные методы разделения и выделения веществ при биохимиеских иследованиях

Гомогенаты представляют собой сложную смесь частиц, отличающихся по размеру, форме и химическому составу. Для разделения и выделения этих частиц, а также молекул, содержащихся в биологическом материале, используются различные методы, которые суммированы в табл.1.

Таблица 1. Основные методы разделения и выделения веществ, применяемые при биохимических исследованиях

(по В.В.Меньшикову, с дополнениями)

Свойство, используемое

для разделения

Методы разделения и выделения

Различие температур перехода

1.Перегонка (дистилляция)

веществ из одного состояния в другое

2.Микродиффузия (изотермическая дистилляция)

3.Озоление

4.Выпаривание (высушивание)

5.Лиофилизация

Различие растворимости веществ

6.Экстракция

7.Противоточное распределение

8.Фракционное осаждение (по видам осаждающих агентов и средств):

8.1.Нейтральными солями (высаливание)

8.2.Кислотами

8.3.Гидрофильными органическими растворителями

8.4.Водорастворимыми недиссоциирующими высокомолекулярными полимерами

8.5.Тяжелыми металлами и их гидроксидами

8.6.Органическими катионами

8.7.Анионами и полианионами

8.8.Иммунопреципитацией

Различие скорости седиментации

9.Седиментационный анализ:

(осаждения)

9.1.Центрифугирование

9.2.Ультрацентрифугирование

Различие в размерах молекул

10.Диализ:

10.1.При равном давлении

10.2.При повышенном давлении

10.3.При пониженном давлении (ультрафильтрация)

10.4.Электродиализ

Различие распределения между подвижной и неподвижной фазами, основанное на неодинаковой растворимости, сорбируемости,

11.Хроматография (по технике осуществления подразделяется на колоночную, тонкослойную и бумажную):

на разнице в значениях электрического заряда, в размерах молекул

11.1.Адсорбционная (жидкостно-адсорбционная, ионообменная, газо-адсорбционная)

11.2.Распределительная (жидкостно-жидкостная, газо-жидкостная)

11.3.Гель-хроматография и гель-фильтрация

11.4.Аффинная (биоспецифическая) хроматография

Различие в электрическом заряде молекул

12.Электрофорез:

12.1.Свободный

12.2.На носителях:

а) на бумаге (простой и высоковольтный)

б) на гелях (агар, агароза, крахмал, полиакриламид)

в) на пленке (ацетилцеллюлоза)

13.Комбинированный электрофорез:

13.1.Электрофорез+иммунодиффузия (иммуноэлектрофорез)

13.2.Электрофорез+хроматография (техника «отпечатков пальцев»)

Различие в электрическом заряде молекул при определенном рН

14.Изоэлектрическое фокусирование в градиенте рН:

14.1.Свободное

14.2.Зональное

14.3.В геле

14.4.Иммуноэлектрофокусирование