Выполнение задания.

1. Вначале следует соста­вить схему и определить теоретически ожидаемое на­следование признаков в F₁ и F₂.

2. В соответствии с подобранной комбинацией скрещивания 2—3 виргинные самки поместить вместе с 3—5 самцами в стаканчик со свежей средой.

3. Через 10—12 дней после постановки опыта, ко­гда в стаканчике будет массовое вылупление мух F₁, их, следует усыпить и проанализировать. Все они как в прямом, так и в обратном скрещивании будут оди­наковыми по признаку формы глаз —глаза у них бу­дут лопастными, как и у доминантного родителя.

4. В каждой комбинации для получения F₂ сле­дует провести скрещивание внутри себя. С этой целью среди анализируемых мух F₁ отобрать 2—3 самки и 3—5 самцов и поместить в пробирки со свежей средой. В каждой комбинации для получения F₂ поставить по 2—3 и более пробирки.

5. Через 10—12 дней в стаканчиках начнется мас­совое вылупление мух F_2. Их следует усыпить в эфиризаторе и проанализировать на матово-белом стекле. При внимательном просмотре отделить и подсчитать мух с лопастными глазами (Lоbе). Затем отделить и подсчитать мух с нор­мальными глазами. Их будет примерно ¹ /₂ от общего числа.

6. Одновременно можно провести опыт по воз­вратному скрещиванию. Для этого в F₁ отобрать виргинные самки и поместить их по одной в пробирки вместе с самцами одной из родительских форм (до­минантной или рецессивной).

7. При постановке этого опыта предварительно разработать его схему.

8. Через 10—12 дней в стаканчиках начнется мас­совое вылупление мух. Их поместить в эфиризатор, усыпить и проанализировать по признаку строения глаз.

Анализ мух от возвратного скрещивания F₁ с до­минантной родительской формой показывает, что все они имеют лопастные глаза, как и мутанты Lоbе. В скрещивании F₁ с рецессивной родительской фор­мой (анализирующее скрещивание) ¹ /₂ часть мух имеет лопастные глаза, а ¹ /₂ — нормальные. Такой результат скрещивания свидетельствует о том, что мухи F₁ гетерозиготны.

Таким же образом могут быть проведены скрещи­вания и проанализированы гибриды Normal с любым мутантом, у которого соответствующий ген локализо­ван во II, III или IV хромосомах.

№6-практическая работа. Анализ результатов ди- и полигибридных скрещиваний. Решение генетических задач.

Задание. 1. Ознакомиться с основными закономерностями на­следования признаков при дигибридном скрещивании, открытыми Г. Менделем. 2. Изучить исходные (родительские) растения по анализируемым признакам. 3. Проанализировать растения гибри­дов первого поколения и установить характер наследования двух рассматриваемых признаков, выявить доминантные и рецессивные признаки. 4. Проанализировать растения гибридов второго поколения и установить характер наследования изучаемых признаков. 5. Определить с помощью решетки Пеннета. теорети­чески ожидаемое расщепление в F_1. 6. Рассчитать фактически по­лученное расщепление в F₁

Материал. 1. Пять растений материнского и пять растений отцовского сортов. 2. Семена F₁. 3. Семена F_2.

Пояснения к заданию. Дигибридным называют та­кое скрещивание, при котором родители отличаются друг от друга по двум парам альтернативных призна­ков, или в случае, если у гибридов учитываются толь­ко 2 пары признаков.

Г. Мендель использовал для дигибридного скрещи­вания гомозиготные растения гороха, различавшиеся по двум парам признаков: например, окраске и форме семян. Было обнаружено, что при таком скрещивании расщепление по каждой паре признаков в отдельности происходит так же, как и при моногибридном скрещи­вании— в отношении 3:1, т. е. независимо от другой пары альтернативных контрастирующих признаков. В опыте Г. Менделя, в котором родители отличались по окраске семян и по форме, в F₂ соотношение жел­тых и зеленых семян составило 3:1; отношение числа гладких семян к морщинистым тоже 3:1,

Для гибридологического анализа при дигибридном скрещивании можно использовать те же 2 сорта горо­ха, которые рекомендованы для анализа гибридов при моногибридном срещивании, т. е. Московский 559, имеющий гладкие зеленые семена, и Неистощи­мый 195 с морщинистыми желтыми семенами. Можно использовать и другие виды растений: например, мно­горядные и гладкоостые сорта ячменя Гейтуэй или Паркленд (Канада) и двурядный с зазубренными остями сорт Винер. Как и в случае анализа при моно­гибридном скрещивании, работа может быть выпол­нена летом в поле или в лаборатории зимой.

Теоретически ожидаемое расщепление в F₂ при ди­гибридном скрещивании рассчитывают при помощи ре­шетки Пеннета. Для этого следует предварительно выяснить генотип семян F₁, от которых мы получаем потомство, а также генотипы родительских форм, ис­пользованных для получения семян F₁. Если фактор гладкой формы семян обозначим буквой В, морщини­стой—буквой b, фактор желтой окраски буквой А и зеленой — буквой а, то генотипы родительских сортов и гибрида будут обозначены следующим образом: Неистощимый 195 — ААbb, Московский 559 — ааВВ, F₁ — АаВЬ. Далее необходимо выписать все типы га­мет, какие могут образоваться в F₁:АВ, Аb, аВ и аb.

Предположим, что у гороха в F₁ с равной вероят­ностью образуются перечисленные выше типы гамет как в мужских, так и в женских генеративных органах.

При построении решетки Пеннета слева по верти­кали записывают типы женских гамет, сверху по го­ризонтали— типы мужских гамет (рис. 5). Все возможные комбинации, которые могут быть при слиянии гамет (оплодотворении), записывают на соответствую­щих пересечениях. На решетке Пеннета удобно под­считать число желтых гладких, желтых морщини­стых, зеленых гладких и зеленых морщинистых семян. Результат подсчета дает теоретически ожидаемое рас­щепление по фенотипу семян F₂ (отношение 9:3:3:1).