методички для заочников / Люминесценция

Положение рукоятки под символом «B» (BLUE-голубой) соответствует выделению возбуждающего излучения 410÷480 нм голубого цвета, а наблюде-

ние – в области 515÷700 нм, что соответствует зелено-желто-красным цветам.

5. Включение ртутной лампы

Внимание! НЕЛЬЗЯ касаться руками стеклянной колбы ртутной

лампы!

Вдвинуть шторку 5 (рис. 9) в корпус насадки до упора. Включить ртут-

ную лампу. После включения ртутная лампа входит в рабочий режим не менее

10 минут.

Отключение лампы можно производить не ранее чем через 15 мин после её включения. Повторное включение лампы производится не ранее чем через 20

мин после её отключения. Центрирование ртутной лампы осуществляется с по-

мощью винтов на люминесцентной насадке.

6. Фокусировка на объект и подготовка визуальной насадки

Фокусировку микроскопа на объект производить следующим образом:

Поместить объект на предметный столик микроскопа;

Включить в ход лучей объектив увеличением 4 (малое увеличение);

Вращением рукоятки 10 (рис. 8) грубой фокусировки поднять пред-

метный столик почти до соприкосновения объекта с фронтальной линзой объ-

ектива;

Наблюдая в окуляр, установленный в правую окулярную трубку (при этом левый глаз закрыт), и медленно опуская предметный столик, сфокусиро-

вать микроскоп на резкое изображение объекта с помощью рукояток грубой и точной фокусировки;

Наблюдая в окуляр, установленный в левую окулярную трубку (при этом правый глаз закрыт), и не трогая рукояток фокусировочного механизма,

при необходимости, так же добиться резкого изображения объекта в левой оку-

19

лярной трубке вращением кольца диоптрийного механизма левого окулярного тубуса;

Установить расстояние между осями окулярных трубок насадки в соответствии с глазной базой наблюдателя поворотом окулярных трубок отно-

сительно оси шарнира таким образом, чтобы изображение объекта в каждой окулярной трубке насадки при наблюдении двумя глазами воспринимались на-

блюдателем как одно.

7.Настройка микроскопа с насадкой для наблюдения объектов

всвете люминесценции

На небольшом листе белой бумаги размером с предметное стекло на-

рисовать «крест» (далее-перекрестие). Поместить бумагу с перекрестием на предметный столик микроскопа. Вставить окуляр увеличением 10 в окулярный тубус тринокулярной насадки, не имеющий диоптрийной подвижки.

Вернуть в револьвер микроскопа объектив 10х/0,25 из комплекта мик-

роскопа.

Выдвинуть шторку 5 (рис. 8, а) из корпуса насадки и ввести в ход лу-

чей нейтральный светофильтр 6 для ослабления яркости при наблюдении раз-

рядной дуги лампы.

Установить рукоятку перемещения каретки в положение «G» (рис. 7).

Наблюдая в окуляр, сфокусировать микроскоп на резкое изображение перекрестия в соответствии с п. 6.

Перемещая предметный столик, установить центр перекрестия при-

мерно в центре поля зрения окуляра.

Ввести в ход лучей свободное гнездо револьвера (отверстие без объ-

ектива). Наблюдая со стороны (не в окуляры), перемещением коллектора до-

биться наиболее резкого изображения светового пятна (разрядной дуги) и элек-

тродов ртутной лампы на поверхности бумаги.

20

С помощью рукояток центрирования ртутной лампы привести изо-

бражение светового пятна в центр перекрестия, нарисованного на бумаге. Вве-

сти в ход лучей объектив 10х/0,25.

8.Настройка микроскопа для наблюдения в проходящем свете

Убедиться, что ртутная лампа выключена. Переместить рукоятку в положение «N» (рис. 8, а).

Установить фильтр в откидную рамку конденсора Аббе.

Ввести в ход лучей объектив 10 и меньше, ввести в ход лучей кон-

денсор.

Поднять рукояткой перемещения кронштейна конденсора, находя-

щийся под предметным столиком слева от наблюдателя, кронштейн с конден-

сором до упора и полностью раскрыть апертурную диафрагму конденсора.

Включить лампу осветителя. Установить необходимую яркость горе-

ния при помощи рукоятки 8 (рис. 8).

Сфокусировать микроскоп на резкое изображение препарата, распо-

ложенного на предметном столике.

9.Порядок работы с люминесцентным микроскопом

1.Зажечь лампу в осветителе.

2.Ввести поворотом револьвера в ход лучей отверстие, не занятое объек-

тивом.

3.Установить предметный столик микроскопа в крайнее верхнее положе-

ние.

4.Положить на предметный столик лист белой бумаги.

5.Выдвинуть шторку.

6.Ввести поворотом револьвера в ход лучей объектив малого увеличения.

7.Установить на предметный столик исследуемый объект.

21

8.Сфокусировать микроскоп на изображение объекта.

9.Ввести в ход лучей необходимый для работы объектив.

10.Выбрать участок объекта для исследования. Установить выбранный участок в центр поля окуляра, после чего включить объектив большего увеличения и линзу насадки с необходимым увеличением.

11.При коротких перерывах в работе необходимо перекрывать свет, па-

дающий на объект, шторкой, передвигая ее рукояткой. Это предохранит объекты от выцветания под воздействием возбуждающего света.

III. Лабораторная работа

Люминесцентный анализ

Цель работы: Познакомиться с устройством и работой люминесцентного микроскопа, научиться вести наблюдения в ультрафиолетовом свете.

Приборы и принадлежности: микроскоп люминесцентный, микропрепа-

раты, предметные стекла, образцы фармпрепаратов и пищевых продуктов.

Задание к работе и порядок ее выполнения:

1.Изучить техническое описание микроскопа.

2.Включить ртутную лампу.

3.Исследовать выданные объекты на наличие в них люминесцирующих объектов.

4.Зарисовать схему распределения в случае обнаружения люминесци-

рующих веществ.

5.Описать наблюдения, используя данные табл. 1 (см. Приложение).

6.Полученные данные занести в таблицу, сделать схематические рисунки наблюдений.

22

№		Изучаемый объект	Цвет люминесценции
1
2
3
7.	Сделать вывод о наблюдаемых явлениях.

Вопросы для контроля:

1.Назначение люминесцентного микроскопа

2.Оптическая схема люминесцентного микроскопа.

3.Что называется люминесценцией. Виды люминесценции. Люминофоры.

4.Закон Стокса.

5.Назначение запирающего и возбуждающего светофильтров в схеме лю-

минесцентного микроскопа.

6.Квантовый и энергетический выходы люминесценции.

7.Применение явления люминесценции.

8.Люминесцентная микроскопия.

9.Применение люминесцентного анализа в фармации.

23

IV. ПРИЛОЖЕНИЕ

Таблица 1 Люминесценция некоторых фармацевтических биопрепаратов

№	Препарат	Внешний вид, цвет	Цвет люминесценции в
			УФ свете
1	Анаферон	Белые таблетки	Смесь нелюм. серых хлопьев
			с мелкими люм.
			(желто-зел.цв.) кристаллами
2	Анестезин	Белые таблетки	Крупн. серые кр-лы, мелкие
			св.-зел., почти бел. люм.
2	Аспирин	Белые таблетки	н е т
3	Глюкоза	Белый порошок	н е т
4	Ибуклин	Розовые таблетки	Розово-желто-зеленая
5	Ибупрофен	Белые таблетки	Зеленая
6	Индометацин	Таблетки покрытые	Красно-зеленая
		оболочкой
7	Мезим		Св.-зеленый, оболочка
			ярко-красная
8	Мультитабс	Крупные св.-коричн.	Желтый, зеленый
		Таблетки
9	Найз	Табл. с надписью NK
10	Нистатин	Желтые таблетки
11	Парацетамол	Белые таблетки	Крупные бесцв. кр-лы,
			мелкие зеленые очаги
12	Тетрациклин	Таблетки, покрытые	Зеленовато-желтая
		оболочкой
13	Трихопол		Хлопьевидные частицы без
			люминесценции
14	Тироксин	Мелкие белые таблетки	н е т
15	Цитрамон	Светло-коричневые табл.	Желто-зел. на
			бежево-розовом фоне
16	Натрия	Белые кубические	н е т
	хлорид	кристаллы
22	Mucor	Микропрепарат	Зеленая, желтая, серая

24

Таблица 2 Люминесценция некоторых пищевых продуктов

№	Продукт	Цвет люминесценции
1	Говядина	Темно-красный
2	Свинина	Розовый с коричневым оттенком
3	Кости, хрящи, сухожилия	Светло-голубой
4	Картофель	Желтый
5	Пшеничная мука	Синеватая, зеленоватая
6	Гороховая мука	Розовая
7	Соевая мука	Желто-зеленая
8	Блинная мука	Голубовато-зеленая
9	Лук	Сине-фиолетовая
10	Молоко	Желтая
11	Молоко испорченное	Синяя
12	Яйца, зараженные бактерией	Яркая желто-зеленая
	рода Pseudomonas
	Список литературы

1.Ремизов, А.Н. Медицинская и биологическая физика/ А.Н. Ремизов и др.,

М.: Дрофа. 2010. -558 с.

2.Грабовский, Р. И. Курс физики/ Р.И. Грабовский. – С-Пб.: Лань.– 2009. – 608 стр.

3.Кощеев А.К., Лившиц О.Д., Добросердова И.И. Люминесцентный анализ пищевых продуктов. Пермь: Пермское кн. изд-во, 1990.

25

Учебное издание

В.Т. Казуб, Н.Н. Семёнова

ЛЮМИНЕСЦЕНТНЫЙ АНАЛИЗ

Методические указания для студентов 2 курса по дисциплинам С2.Б.2 - «Физика» (очная и заочная форма обучения) и

С3.В.ОД.3- «Физические основы технологических процессов и методов фармацевтического анализа» (очная и заочная форма обучения)

Технический редактор: Браташова Т.М.

Подписано в печать «___ » __________2011 г.

Формат 60х84 /16. Бумага кн.-журнальная

Печать ротапринтная.. Усл печ. л. 1

Уч.-изд. л. 1 Тираж

. Заказ № _____

.

Пятигорская государственная фармацевтическая академия

357332, г. Пятигорск, проспект Калинина, 11

26