Лекции / MBD_i_streptokokki

Этапы секвенирования

1. С помощью ПЦР накапливают достаточное количество копий исследуемого участка ДНК

2. Молекулы ДНК с помощью щелочного гидролиза разрезают на фрагменты различной длины

3. Добавляют дидезоксинуклеотиды, каждый из которых помечен определенным красителем и присоединяется к комплементарным нуклеотидам на 3-конце каждого фрагмента

Этапы секвенирования

4. Смесь полученных меченных фрагментов

ДНК подвергается электрофорезу в геле. Первыми будут двигаться фрагменты,

имеющие наименьшую молекулярную массу

(1 нуклеотид), вторыми мимо оптического датчика пройдут ДНК в 2 нуклеотида. Результаты обрабатываются автоматически

СТРЕПТОКОККИ

Обнаружены: Билротом (1874г.), Пастером (1879г.), Огстоном

(1881г.)

Выделены в чистом виде:

Феляйзеном (1883г.), Розенбахом (1884г.)

Стрептококки: таксономическое положение

 Домен	Bacteria
 Тип	Firmicutes
 Класс	Bacilli
 Порядок	Lactobacillales

Семейство Streptococcaceae

Род Streptococcus

Стрептококки: свойства

Морфологические

овальные грамположительные кокки, располагающиеся в мазке цепочками, спор и макрокапсул не образуют, неподвижны

Культуральные

растут на сложных средах (содержащих глюкозу, сыворотку или кровь) при 370С, образуют через сутки мелкие S-формы колоний

Биохимические

= стафилококки, но менее выражена протеолитическая активность

Серологические

1.полисахаридные (групповые) антигены – полисахарид КС

2.белковые типоспецифические антигены (чаще всего для серологической идентификации используется М-белок, по нему различают около 100 сероваров)

Резистентность во внешней среде – высокая

Стрептококки

Классификации

По полисахаридному антигену (в РП) (R. Lancefield) подразделяют на 20 серогрупп (A

– V), а также группу зеленящих

стрептококков. Серогруппы состоят из

сероваров, различающихся белковыми антигенами (М-белок, Т-белок, F-белок).

Стрептококки: классификации

По способности вызывать гемолиз на МПА с кровью барана:

-гемолитические – разлагают гемоглобин до метгемоглобина, вызывая появление вокруг колонии узкой зеленой каемки (из-за чего называются еще зеленящими стрептококками).

-гемолитические – вызывают полный гемолиз (широкая зона просветления вокруг колоний). В большинстве своем относятся к серогруппе А играют основную роль (среди других стрептококков) в патологии человека, серогруппам В, С, F, G.

-гемолитические стрептококки не образуют на агаре с кровью барана визуально видимых зон гемолиза.

Стрептококки: классификации

по экологическому критерию:

▪антропонозы – S. agalactiae, S. anginosus, S. pneumoniae, S. pyogenes, S. mutans, S. salivarius, S. sangvis (около 30 видов)

▪зоонозы – S. bovis, S. canis, S. suis, S. rattus

(около 9 видов)

▪сапронозы - S. shiloi

Не имеют медицинского значения для человека

около 35 видов стрептококков.

Стрептококки: классификации

 на основании патогенности

▪истинные патогены – S. agalactiae, S. pneumoniae,

S.pyogenes, (III группа патогенности)

▪условные патогены - S. sangvius, S. milleri, S. dysgalactiae, S. mitis, S. gallinaceus, S. massiliensis,

S.iniae (IV группа патогенности)

▪оппортунистические патогены - S. mutans, S. salivarius, S. slivarius, S. oralis, S. vestibularis, S. bovis, S. suis и др. (IV группа патогенности)

Стрептококки: свойства

Факторы патогенности

Пили





М-белок (адгезия, угнетение фагоцитоза, суперантиген)

F-белок (прикрепление к эпителиальным клеткам)

Ферменты









стрептокиназа (гидролиз фибрина)

аминопептидаза (угнетает хемотаксис фагоцитов)

гиалуронидаза (обуславливает инвазию)

ДНК-аза (стрептодорназа)

Белковые токсины





стрептолизины О и S

цитотоксин (у нефритогенных стрептококков)

эритрогенин (у скарлатинозного стрептококка – пироген и аллерген)