Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
МИКРОБИОЛОГИЯ 2014 год ОТВЕТЫ 1-83.doc
Скачиваний:
757
Добавлен:
02.05.2015
Размер:
466.43 Кб
Скачать

37) Бактериологический метод диагностики, сущность и назначение метода.

Включает: Бактериоскопический – изучение морфологических особенностей м/о (форма, размер, наличие спор/капсул, расположение в мазках, подвижность, особенности внутренней структуры), их спосбность воспринимать окраску, отношение к спиртам, щелочам, кислотам. Собственно бактериологический – из пат.мат. выделяют чистую культуру возбудителя и изучают ее культурально-биохимические свойства. Биологический (биопроба) определение патогенных свойств заражением лабораторных животных

38) Методы получения чистых культур аэробов и анаэробов.

Чистая культ – рост на питательной среде микробов одного вида. Для изучения свойств, по их совокупности установить видововую принадлежность.

Аэробов: Метод механического разъединения: 1) Дробный посев по Дригальскому – а) на МПА в чашках Петри вносят каплю исследуемого мат., в центр. Стерил. шпателем рапред-ют по всей чашке, затем не прожиг, перенести на 2ю и 3ю чашки = изолир. колонии в посл. чашке. б) бак.петлей штрихами, можно в одной чашке разд-ой на три сектора. 2)Дроб. посев на распл. МПА по методу Коха в пробирки по 10 мл МПА, расплав. вод. бане, охлажд. до 45-50. В проб +каплю. Вращают между ладоней. Пастер.пипет. перенести во вторую, аналог. в третью. Разлив. по чашкам, в термостат. Метод использования биол. особен.(уничтож. сопутствующей микрофлоры): 1)Физический (для споровых бацилл и клостридий) перед посевом нагрев. до 80С 20 мин 2)Химический (устойч. микобактерий к кислотам и щелочам, туберкулез) 6-18% серной кислоты на 30 мин, отмывают физ.рас, осадок высев. на среду с бактериостат. краской. 3)Биологический-когда пат. мат. очень загрязнен то зараж. животн, вскрывают, и посев из крови сердца и органов. По подвижности: Метод Шукевича –в конденсационную жидкость скошенного агара, микробы с ползучим ростом переходят на поверхность агара; Выдел-ие на элективных средах – (м/о устойч. к а/б, красителям, желч. кислотам..) Берут электив. среды с ростовым фактором для опред. м/о и ингибиторами для других.

Анаэробов: 1) на поверх-ти среды –высеваю на поверхность сахарно-кровян. агара Цейсслера дробно, шпателем. Помещ. в анаэростат, эксикаторы. 2) в глубине: 1. посев в трубки Вейона и под стекло по Перетцу 3-4 проб. с сахарн. агаром, расплавл-ют, охлажд до 45 , далее дробно как у Коха, но выливают в трубки Вейона или в чашки Петри со стекл. пласт. по Перетцу. Когда застынут – в термостат, 37С, 24-28ч. Вырез-ют скальпелем изол-ую колонию и перен. в среду Китта-Тароцци. 2. глубин. посев в плотные среды в чашку/пробирку +исследуемый. мат. с физ.рас-ом хлор.натрия, заливают расплавлен. и охлажд. средой (сахарный агар, среда Вильсона-Блэра), перемешивают, после застыв-я подсуш-ют и залив. той же средой на 4 мм.

39) Простые, специальные и дифференциально-диагностические среды, элективные среды.

Простые (универсальные среды) –ПВ, МПБ, МПА, МПЖ, молоко. Эти среды для многих неприхотлив. м/о. Также служат основой для специальных сред.

Спец-ые для избирательного культивирования опред-х видов, изуч. св-в и хранения: 1) Спец. обогащенные – для не размножающихся на простых. Содер. необх-ые пит. в-ва и ростов-е доб-ки. Для микобактерий – яичные среды Петраньяни, для анаэробов – Китта-Тароцци, сахарно-кровян. агар Ц., для стрептококк – глюкозо-сывор-й бульон и агар. 2)Элективные – избирательного роста. Хорошо растут одни, и плохо др. Оптим. для вида состав пит. в-в и бактериостат-е доб-ки (анилин. краски, а/б, желчные соли.) Среда Петраньяни для тубер-ых содер-ит малахит-й зеленый, среда Кесслера для кишечн. пал. – бычью желчь и генцианвиолет, Среда Эндо для энтеробак – основ. фуксин и сульфит натрия. Низко- и высоко-селективные. 3) Дифференциально-диагност. – для дифферен-ии м/о по культур-ым и биохим-им св-ам. В состав включают субстрат (по котор. дифф-ют) и индикатор. М/о ферментируют субстрат, накапл-ют продукты расщепления, окрашивая среду и колонии в цвет индикатора. Жидкие (среда Гисса, молоко с метиленовым синим), полужидкие (полужид. агар с индик. ВР), плотные (Эндо, Левина, ВСА) 4)Комбинированные несколько субстратов и индикаторов (трехсахар-й агар Олькеницкого) – одновр-я диффер-я по ряду признаков.