Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Протоколы Мед Мод 1 13-14.docx
Скачиваний:
27
Добавлен:
09.05.2015
Размер:
1.88 Mб
Скачать

7. В процессе трансдукции принимает участие трансдуцирующий агент – бактериофаг. Что он собой представляет? Ознакомьтесь со схемой строения бактериофага.

________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

8. Ознакомьтесь с классификацией бактериофагов. Заполните таблицу.

Название группы

Характеристика

По характеру взаимодействия с бактериальной клеткой

Вирулентные (литические)

Умеренные

По признаку специфичности

Поливалентные

Моновалентные

Типовые

9. Назовите роль цитоплазматических генетических элементов в изменчивости бактерий. Заполните таблицу.

___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Классификация плазмид в зависимости от фенотипического эффекта.

Название плазмиды

Сокращенное обозначение

Функции

Фертильтости

F-плазмиды

Бактериоциногении

Col-плазмиды

Резистентности

R-плазмиды

10. Дайте определение терминам:

Биотехнология ‑ ___________________________________________________________________________

__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Генная инженерия ‑ ________________________________________________________________________

__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

9. Назовите методы генетических исследований.

___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

10. Дайте определение термину «полимеразная цепная реакция» и дать характеристику основным этапам ПЦР-исследования.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) ‑ _____________________________________________________

_________________________________________________________________________________________

_________________________________________________________________________________________

Основные этапы ПЦР-исследования

Название этапа

Цель и характеристика

I

Предобработка клинического материала

II

Обратная транскрипция

Амплификация – это

1

Денатурация ДНК

2

Отжиг праймеров

3

Элонгация

III

Детекция продуктов амплификации

11. Назовите основные компоненты ПЦР-смеси.

_________________________________________________________________________________________

_________________________________________________________________________________________

_________________________________________________________________________________________

12. Ознакомиться с разновидностями постановки ПЦР.

Название

Характеристика особенностей метода

ПЦР с обратной транскрипцией

Используют для изучения РНК содержащих вирусов. При помощи обратной транскриптазы на РНК синтезируется копия ДНК – кДНК, которую амплифицируют в стандартной ПЦР.

Мультипраймерная ПЦР

Одновременное использование нескольких пар праймеров позволяет приводить амплификацию нескольких генетических детерминант, что сокращает время и расход реактивов.

ПЦР в реальном времени

Используют для определения точечных мутаций в ДНК и количественного содержания ДНК в пробе, а также определения экспрессии генов. Существует два подхода:

- Taq-man методология. Основана на регистрации в процессе проведения ПЦР усиливающегося флуоресцентного сигнала, вследствие высвобождения флюоресцирующего вещества. Особенностью этой реакции является использование олигонуклеотидной пробы с присоединенными к разным концам молекулами сигнализатора и стабилизатора сигнала. Такая проба, связавшись с комплементарным участком ДНК, разрушается ДНК-полимеразой (проявляет экзонуклеазную активность), что приводит к высвобождению сигнализатора из-под действия стабилизатора сигнала, что сопровождается флюоресценцией.

- SYBR green методология. Регистрирует увеличение флюоресценции в результате присоединения флюорофора SYBR green к образуемым дуплексам ДНК с последующей его эмиссией.