4. Газо-адсорбционная хроматография и газо-жидкостная хроматография: определение, сущность, применение в медико-биологических исследованиях.

ГАЗО-АДСОРБЦИОННАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ - метод анализа смесей газов и легколетучих веществ. Разделение основано на различии в адсорбции на поверхности твердого носителя (адсорбента). Адсорбция может быть обусловлена неспецифическими (ориентационными, индукционными и дисперсионными) и специфическими взаимодействиями (комплексообразованием, либо образованием водородной связи) и зависит от природы адсорбента и сорбата. В качестве адсорбентов используют пористые носители, которые обладают химической, физической и термической стабильностью. Адсорбционная активность зависит от удельной поверхности (определяется геометрической структурой носителя) и удельной поверхностной энергии (определяется химической структурой поверхности). ГАЗО-ЖИДКОСТНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ -вид хроматографии, в которой подвижной фазой служит газ, а неподвижной - жидкость, нанесенная тонким слоем на твердый носитель; вариант газовой хроматографии. Неподвижная жидкая фаза должна быть термически стабильной, химически устойчивой, иметь небольшую вязкость. ГЖХ применяют для разделения и анализа соединений, которые могут быть переведены в парообразное состояние без разложения, а также для определения таких физико-химических характеристик вещества, как константа распределения, константа комплексообразования, теплота растворения.

5. Методы количественной обработки хроматограмм: абсолютная калибровка, метод простой и внутренней нормировки, метод внутреннего стандарта.

КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ основан на измерении различных параметров пика, зависящих от концентрации хроматографируемых веществ. ОСНОВНЫМИ МЕТОДАМИ КОЛИЧЕСТВЕННОГО АНАЛИЗА являются следующие: метод абсолютной калибровки, метод внутреннего стандарта, метод простой нормировки и нормировки с калибровочными коэффициентами. В МЕТОДЕ АБСОЛЮТНОЙ КАЛИБРОВКИ экспериментально определяют зависимость высоты или площади пика от концентрации вещества и строят градуировочные графики. Далее определяют те же параметры пиков в анализируемой смеси и по градуировочному графику находят концентрацию анализируемого вещества.  МЕТОД ВНУТРЕННЕГО СТАНДАРТА основан на введении в анализируемую смесь точно известного количества стандартного вещества. В качестве стандартного выбирают вещество, близкое по физико-химическим свойствам к компонентам смеси. Это вещество должно отсутствовать в исследуемой смеси и давать на хроматограмме пик, отдельный от других компонентов. После хроматографирования измеряют площади пиков анализируемого компонента и стандартного вещества.  МЕТОД ПРОСТОЙ НОРМИРОВКИ основан на том предположении, что вещества, взятые в одинаковом количестве, дают одну и ту же площадь пика, независимо от их строения. Это приближенно выполняется, если вещества химически сходны. МЕТОД ВНУТРЕННЕЙ НОРМИРОВКИ с калибровочными коэффициентами основан на учете различия чувствительности детектора по отношению к компонентам анализируемой смеси.