Литература для усвоения знаний – умений по данной теме:

1. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология / Под ред. Борисова,

А. Г. Смирновой.-М.: Медицина, 1994.С.

2. Коротяев А. И., Бабичев С. А. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология – СПБ: Специальная литература, 1998

3. Пяткин К. Д, Кривошеин Ю. С. Микробиология. – К.: Высшая школа, 1992

4. Руководство к лабораторным работам по микробиологии / Под ред. Борисова. – М.: Медицина, 1984

5. Лекция на тему “Гноеродные кокки”

Содержание обучения должно обеспечить достижение целей обучением, чему способствует граф-логическая структура темы (приложение № 1, 1а).

Материалы и оборудование: Посевы с культурами S. aureus на ЖСА, кровяном агаре, в сахарном бульоне, S.pyogenus, предметные стекла, реактивы для окраски по Граму, пестрый ряд Гисса, микроскоп, реакция нейтрализации для определения титра антител к О – стрептолизину, диагностические и лечебно-профилактические препараты, таблицы по теме.

Ориентировочная основа действий при выполнении практической работы:

1. Провести бактериологическое исследование при подозрении на сепсис. Для этого сделать посев крови больного на МПБ с 1% глюкозой. Описать в протоколе признаки роста гемокультуры. С целью проверки чистоты культуры промикроскопировать ее мазок, рисунок занести в протокол. Пересеять гемокультуру на ЖСА и 5%-ый кровяной агар.

2. Приготовить мазок - смыва с тампона, насыщенного гноем из ротовой полости. Мазок покрасить по Граму, промикроскопировать, рисунок занести в протокол.

3. Взять из раны больного гной, посеять на ЖСА и кровяной агар. Описать в протоколе культуральные свойства возбудителя при росте на этих средах. Отобрать колонии с золотистым или белым пигментом, приготовить из них мазки, покрасить по Граму, промикроскопировать, рисунок занести в протокол. Если в мазке выявлены Гр+ кокки, образующие скопления, напоминающие гроздь винограда, колонию пересеять на скошенный агар для накопления чистой культуры бактерий и последующей идентификации.

4. Исследовать патогенность выделенного штамма стафилококка по следующим тестами:

гемолитическая активность – при посеве на кровяной агар;

расщепление маннита – при посеве в столбик полужидкого МПА с маннитом;

возможность коагулировать плазму – при добавлении суспензии микроба к кроличьей плазме;

продукция лецитиназы – при посеве на среду с желтком;

ДКН-азная активность – при посеве на среду с ДНК.

Описать в протоколе особенности роста микроорганизма на этих средах.

5. Определить чувствительность выделенного штамма к антибиотикам методом стандартных дисков. Определить зоны задержки роста для каждого антибиотика, дать рекомендацию, исходя из использования тех или других антибиотиков для лечения больного.

6. Посредством стандартного набора стафилококковых диагностических фагов определить фаготип культуры, которая исследуется.

7. Провести серологическое исследование при подозрении на ревматизм: - учесть результаты предварительно поставленной реакции титрования анти-О – стрептолизина. Эта реакция базируется на иммунологическом ответе, что возникает в организме человека при проникновении стрептококковых антигенов и выражается в выработке антител против стрептолизина О. Способность стрептолизина О растворять эритроциты нейтрализуется, если в крови больного имеются антитела против стрептококка. Реакция ставится по схеме:

Номера пробирок	1	2	3	4	5 контроль
Разведение сыворотки	1:250	1:500	:1000	1:2000	-
Объем сыворотки (мл)	0,4	0,4	0,4	0,4	-
Раствор О-стрептолизина	0,3	0,3	0,3	0,3	0,3
Фосфатный буфер (мл)	-	-	-	-	0,4
Термостат, 37 С, 60 минут
5%-ая суспензия эритроцитов (мл)	0,2	0,2	0,2	0,2	0,2
Термостат, 37 С, 60 минут

8. Рассмотреть диагностические, профилактические и лечебные препараты по теме, ознакомиться с принципом их использования. Отметить в протоколе названия 2-3 препаратов каждой группы.