Gosudarstvennaya_farmakopeya_RB

(10 ррm) или 0,002% (20 ррm), но иногда и 0,0005% (5 ррm), что находится вблизи

предела обнаружения.

Для валидации испытания на тяжелые металлы анализируют испытуемый

образец и образец, специально загрязненный свинцом в соответствующей концентрации. Окраска испытуемого образца должна быть меньше, а загрязненного

образца - равной или большей, чем окраска эталона.

Для ряда методик, требующих сжигания образца, существует опасность потерь некоторых тяжелых металлов (таких как, например, ртуть и свинец в присут-

ствии хлоридов). В таких случаях, когда это в возможно, контролируют содержание тяжелых металлов методом атомно-абсорбционной спектрометрии или другим инструментальным методом.

Если известно, что при синтезе субстанции используется катализатор, например, палладий, никель или родий, то их содержание целесообразно контролировать колориметрическими или инструментальными методами (например,

атомно-абсорбционная спектрометрия и др.).

Цветные реакции или реакции осаждения. Для отдельных катионов и анионов описаны предельные испытания, основанные на визуальном сравнении окраски

или опалесценции. При этом необходимо доказать, что:

—окраска или опалесценция для нормируемых концентраций отчетливо видны;

—найденная концентрация добавленного иона одинакова как для испытуемого раствора, так и для раствора сравнения (как визуально, так и с помощью мето-

дов, основанных на измерении поглощения);

—значения оптической плотности растворов, содержащих 50%, 100% и 150% анализируемой примеси от нормируемой концентрации, должны значимо разли-

чаться;

—определение примеси на уровне нормируемой концентрации проводят не менее шести раз и вычисляют стандартное отклонение. Найденная концентрация должна составлять не менее 80% от введенной, а относительное стандартное отклонение - не более 20%.

Целесообразно провести сравнение результатов предельного испытания с

результатами количественного определения с использованием независимого метода, например, атомно-абсорбционной спектрофотометрии для катионов или

ионной хроматографии для анионов. Результаты, полученные двумя методами,

должны быть близки.

4. Атомно-абсорбционная спектрометрия (2.2.23)

Метод атомно-абсорбционной спектрометрии (ААС) применяют для испы-

таний по определению содержания отдельных элементов, присутствующих в образце.

4.1. Специфичность. Специфичность данного метода определяется тем, что атомы анализируемого элемента поглощают характеристическое излучение от источника со строго дискретными длинами волн, соответствующими данному

элементу. Однако возможны помехи вследствие как оптических, так и химических

эффектов. Перед началом валидации необходимо выявить помехи такого рода и,

если возможно, снизить их влияние путем использования соответствующих приемов.

Эти помехи могут привести к систематической погрешности при использовании метода прямой калибровки или к изменению чувствительности метода. Основ-

ным источником погрешности в методе ААС являются погрешности, связанные с

процессом калибровки и мешающим влиянием матрицы.

4.2. Градуировка. Использование линейной модели градуировки описано в об-

щей статье 2.2.23 «Атомно-абсорбционная спектрометрия». Для доказательства применимости линейной регрессионной модели рекомендуется использовать не

менее пяти градуировочных растворов. В некоторых случаях возможно использование параболической модели градуировки. При этом также используют не менее пяти градуировочных растворов. Рекомендуется использовать концентрации градуировочных растворов с равномерным распределением внутри диапазона при-

менения.

Для каждой концентрации рекомендуется выполнять не менее пяти измере-

ний.

Проблемы с калибровкой часто могут быть выявлены визуально. Однако

градуировочные графики сами по себе нельзя использовать как доказательство пригодности метода калибровки. Калибровочный график представляют в следую-

щем виде:

а) на графике откладывают измеренные оптические плотности как функции концентраций и строят кривую, описывающую эту градуировочную функцию, вместе с ее доверительными интервалами. Экспериментальные точки должны находиться в пределах доверительного интервала построенного графика.

б) на графике откладывают остаточные отклонения (разности между измеренными и вычисленными по градуировочному графику оптическими плотностями) как

функции концентрации. Эти разности должны распределяться вокруг оси абсцисс

случайным образом.

Внекоторых случаях разброс значений сигнала возрастает с ростом концентрации, что может быть выявлено из графика остаточных отклонений или ста-

тистическими методами. При этом наибольшая точность может быть достигнута

при использовании градуировки с весовыми множителями. Может быть применена как линейная, так и квадратичная весовая функция.

Вслучае использования весовой модели строится график взвешенных раз-

ностей (т.е. разностей, умноженных на веса) как функции концентрации следующим

образом:

а) на графике откладывают измеренные оптические плотности как взвешенные функции концентраций и строят кривую, описывающую эту градуировочную функцию вместе с ее доверительными интервалами.

б) на графике откладывают взвешенные остаточные отклонения (т.е. взвешенные разности между измеренными и вычисленными по градуировочному графику оптическими плотностями) как функции концентрации.

Необходимо показать, что модель достаточно точно описывает экспери-

ментальные данные.

4.3. Эффекты матрицы. Если для получения градуировочной функции используют метод градуировочного графика, то необходимо показать, что чувствительность для раствора анализируемого образца и градуировочных растворов

одинакова.

Если применяется градуировка в виде прямой линии, различия в чувстви-

тельности могут быть обнаружены путем сравнения наклонов градуировочного

графика, полученного с использованием эталонных растворов, и растворов, полученных внесением стандартной добавки к испытуемому раствору. Точность оценки наклонов обеих прямых зависит от числа и распределения точек измерения. По-

этому для построения обоих регрессионных линий рекомендуется использовать

достаточное число точек (не менее пяти) и выбирать концентрации преимущественно на границах диапазона градуировки.

Обоснованием для возможности использования метода градуировочного графика является незначимость различий наклонов полученных прямых по крите-

рию Стьюдента. Если различия значимы, то используют метод стандартных добавок.

4.4.Предел обнаружения и предел количественного определения (метод, основанный на стандартном отклонении контрольного опыта - см. 7.3.1 и 8.3.1,

раздел В). Выполняют контрольные опыты, для которых предпочтительно ис-

пользовать растворы «плацебо», содержащие все компоненты образца, за исключением определяемого. Если такие контрольные опыты выполнить невозможно, то допустимо использовать холостые растворы, содержащие все реагенты и приго-

товленные так же, как и испытуемый раствор.

5.Разделительные методы

5.1.Хроматографические методы. Различные хроматографические методы

могут использоваться для идентификации, контроля примесей и количественного определения. Ниже описаны особенности валидации данных методов.

5.1.1. Тонкослойная хроматография (2.2.27)

Специфичность. Для тестов идентификации обычно нельзя добиться специфичности, используя только тонкослойную хроматографию (ТСХ) саму по себе, однако достаточная избирательность может быть достигнута при сочетании ТСХ с другими методами. Если для испытания на допустимые пределы примесей избирательность недостаточна, то используют дополнительное испытание (испытания) для контроля примеси (примесей), зона которой не была отделена от других

зон. Необходимо доказать избирательность совокупности используемых методик.

Для испытаний идентификации улучшение избирательности может быть достигнуто при использовании опрыскивания реактивом, который позволяет разли-

чать близкие соединения по цвету.

Стационарная фаза. Необходимо показать, что данное испытание пригодно для проведения анализа на пластинках одного типа, но различного происхождения.

Тест «Проверка пригодности хроматографической системы». Такой тест обычно проводится для подтверждения разделения двух близко элюирующихся соединений, одним из которых является анализируемое вещество. Необходимо

доказать, что разделение выбранных соединений гарантирует пригодность сис-

темы для достижения поставленных целей.

Для испытаний на предельное содержание примесей необходимо учитывать

следующее:

Обнаружение. Необходимо избегать использования особых опрыскивающих реагентов, если в методике не используется стандарт нормируемой примеси.

Предел обнаружения. Если используют количественную инструментальную

методику, для определения предела обнаружения используют подходы, описанные в пункте 7 раздела В. Если используют визуальную методику, то необходимо

показать, что обнаруживается количество, соответствующее указываемому пределу

обнаружения.

Коэффициент пересчета. Если примеси определяемы, то необходимо пока-

зать, что чувствительности определения примеси и основного вещества близки. Для испытаний на допустимые пределы примесей различия в чувствительностях могут быть показаны путем сравнения пределов обнаружения.

Предел количественного определения, линейность, диапазон и сходимость.

Эти данные необходимо представлять при использовании инструментальной количественной ТСХ.

5.1.2. Жидкостная хроматография (2.2.29)

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Специфичность. Для тестов идентификации обычно нельзя добиться специ-

фичности, используя только жидкостную хроматографию саму по себе, однако

достаточная избирательность может быть достигнута при сочетании жидкостной хроматографии с другими методами. Необходимо представлять данные о времени удерживания, относительном времени удерживания или коэффициенте емко-

сти для основного вещества и близких по строению веществ. Эти данные необходимо представлять для нескольких стационарных фаз одного типа.

ИСПЫТАНИЯ НА ПРЕДЕЛЬНОЕ СОДЕРЖАНИЕ ПРИМЕСЕЙ

Специфичность. Избирательность разделения. Должно быть показано

разделение известных и возможных примесей с основным веществом и, если

возможно, между собой. Специфичность может быть подтверждена при использовании для детектирования масс-спектрометра. Примеси, которые не отделяются от основного вещества, должны контролироваться другим методом. Необходимо представлять данные о времени удерживания, относительном времени удерживания или коэффициенте емкости для основного вещества и примесей. Эти данные должны предоставляться для нескольких стационарных фаз одного

типа.

Избирательность детектирующей системы. Выбор детектора и условий де-

тектирования должен быть обоснован. Специфичность может быть подтвержде-

на, например, при использовании для детектирования масс-спектрометра.

Коэффициент пересчета. Если примеси определяемы, то необходимо показать, что чувствительности определения примеси и основного вещества близ-

ки (при использовании УФ-детектирования - при выбранной длине волны детектирования; это необходимо показать и для других типов детекторов - например,

рефрактометрического или кондуктометрического). Если отношение чувстви-

тельностей известной примеси и основного вещества выходит за пределы 0,8 - 1,2 и если допустимый предел содержания этой примеси больше 0,1%, то необ-

ходимо использовать коэффициент пересчета либо стандарт нормируемой примеси в варианте внешнего стандарта.

Предел обнаружения или количественного определения. Эти пределы долж-

ны определяться для метода внешнего стандарта при использовании разведений

испытуемой субстанции или при использовании стандарта примеси. Если пик примеси выходит в непосредственной близости от пика субстанции (особенно если

непосредственно за ним), то предел обнаружения или количественного определе-

ния должен устанавливаться по этой примеси. Метод, описанный в пункте 7 раздела В, пригоден для вычисления обоих указанных пределов.

Стабильность. Необходимо представлять данные, подтверждающие срок

годности испытуемого раствора и раствора сравнения. Также должны представляться данные о стабильности подвижной фазы.

Степень извлечения. При использовании экстракции необходимо изучить степень извлечения известных и доступных примесей при оптимальных условиях. Необходимо представить данные, подтверждающие, что экстракция обеспечивает

достаточную точность.

Получение производных. Если используют пред-или послеколоночное полу-

чение производных, необходимо установить оптимальные условия реакции (время, температура и др.) и исследовать стабильность полученных производных.

Тест «Проверка пригодности хроматографической системы». Как описано для ТСХ. Использование соотношения сигнал/шум требуется только тогда, когда

предел определения и нормируемый предел содержания примеси близки.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Специфичность. Это желательное, но не основное требование. Если метод не специфичен, то возможность его использования обеспечивается низким уровнем содержания примесей, которые контролируются другим испытанием.

Тест «Проверка пригодности хроматографической системы». Как описано для ТСХ.

5.3.1. Газовая хроматография (2.2.28)

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Специфичность. Как описано для жидкостной хроматографии.

ИСПЫТАНИЯ НА ПРЕДЕЛЬНОЕ СОДЕРЖАНИЕ ПРИМЕСЕЙ

Специфичность. Как описано для жидкостной хроматографии.

Коэффициент пересчета. Как описано для жидкостной хроматографии. Должны представляться коэффициенты пересчета нормируемой примеси относительно основного вещества. Это особенно важно при использовании селективных детек-

торов, таких как детектор по электронному захвату и т. п.

Пределы обнаружения и количественного определения. Как описано для жид-

костной хроматографии.

Стабильность. Как описано для жидкостной хроматографии.

Получение производных. Как описано для жидкостной хроматографии.

Внутренний стандарт. Необходимо показать, что при выбранных условиях пик

внутреннего стандарта не перекрывается с пиками возможных примесей или основного вещества.

Степень извлечения. Как описано для жидкостной хроматографии.

ТЕСТ «ПРОВЕРКА ПРИГОДНОСТИ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОЙ СИСТЕМЫ»

Ниже приводятся некоторые особенности, которые необходимо учитывать

для данного теста.

Отношение Сигнал/Шум. Обычно определяют для сигналов, равных или не-

сколько больших, чем предел обнаружения и предел количественного определе-

ния.

Степень разделения. Определяют для пика анализируемого вещества и бли-

жайшего пика примеси или для пика анализируемого вещества и пика внутреннего стандарта. Если коэффициент асимметрии отличается от принятого диапазона (0,8-

1,2), целесообразно нормировать его пределы (2.2.28). Это особенно важно для тех случаев, когда используются набивные колонки или пик нормируемой примеси элюи-

руется непосредственно за пиком основного вещества. Там, где возможно, подтверждают выполнение испытания с использованием колонок подобного типа.

Метод анализа равновесной паровой фазы. Этот метод применяют для ана-

лиза легколетучих веществ. Необходимо показать, что выбранные температура и

время предварительного нагрева сосудов с анализируемым образцом обеспечивают установление равновесия. Валидация метода заключается в проведении повторных анализов образца. При этом после каждого введения пробы газовая фаза

в сосуде замещается и сосуды снова уравновешиваются перед новым вводом газо-

вой фазы. По полученным данным строят график зависимости логарифмов площадей пиков анализируемого вещества от числа экстракций и рассчитывают его характеристики. Близость коэффициента корреляции полученной зависимости к 1,0 свидетельствует о правильности выбора условий испытаний. Эффекты влияния

матрицы можно устранить при использовании метода стандартных добавок.

КОЛИЧЕСТЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Специфичность. Как описано для жидкостной хроматографии.

Тест «Проверка пригодности системы». Как описано для жидкостной хрома-

тографии.

6. Определение воды полумикрометодом (2.5.12)

Для подтверждения корректности использования йодсернистых реактивов, ко-

торые отличаются по составу от йодсернистого реактива Р (например, реактив Кар-

ла Фишера), следует провести валидацию одним из приведенных ниже методов.

6.1. Метод добавок

Определяют содержание воды (mH2O, мг) в субстанции в соответствии с мето-

дикой, указанной в частной статье. Определение проводят не менее пяти разов. За-

тем к испытуемому образцу прибавляют, избегая попадания атмосферной влаги, подходящий объем стандартизированного раствора воды в метаноле Р и определяют

содержание воды (mi, мг). Определение проводят не менее пяти раз для разных объемов стандартизированного раствора в принятом диапазоне употребления методики.

Методом наименьших квадратов рассчитывают параметры линейной зависимости найденного содержания воды от количества прибавленной воды: тангенс угла наклона (b), точку пересечения с осью ординат (а) и точку пересечения экстраполированной калибровочной прямой с осью абсцисс (d).

Значение тангенса угла наклона b должен находиться в пределах от 0,975 до 1,025 (±2,5%). Относительные отклонения е1 и е2, в процентах, рассчитывают по формулам:

e =	a − mH 2O	×100%	e =	d − mH 2O	×100%
1	mH2O		1	mH2O

е1 и е2 не могут превышать +2.5%.

Для каждого из определений рассчитывают найденное количество в процентах

от прибавленного количества. Среднее значение пяти определений должно быть от

97,5% до 102,5%.

6.2. Сравнение с арбитражным методом

Определяют содержание воды полумикрометодом и другим подходящим вали-

дированным методом, например, методом газовой хроматографии (2.2.28), методом термогравиметрического анализа (2.2.34) и др.

Средния значения, полученные полумикрометодом и арбитражным методом, не

должны отличаться статистически значительно.

5.4. ОСТАТОЧНЫЕ КОЛИЧЕСТВА ОРГАНИЧЕСКИХ РАСТВОРИТЕЛЕЙ

Регламентация содержания остаточных растворителей в субстанциях, вспомогательных веществах и готовых

лекарственных средствах

Данная общая фармакопейная статья устанавливает предельное содержание растворителей, которое может присутствовать в субстанциях,

вспомогательных веществах и готовых лекарственных средствах в результате производственного процесса. Данная статья не

распространяется на зарегистрированные лекарственные средства. Фармакопея применяет одни и те же принципы, описанные в ней к

существующим субстанциям, вспомогательным веществам и готовым лекарственным средствам, независимо от того, являются они или нет

объектом Фармакопеи. Все субстанции, вспомогательные материалы и

готовые лекарственные средства должны проверяться на содержание тех растворителей, которые могут в них присутствовать.

Если при производстве разрешено использование растворителя класса 1,

то его предельное содержание должно устанавливаться в частной фармакопейной статье.

Обычно частные статьи не включают тесты по контролю остаточных растворителей, относящихся к классу 2, так как применяемые растворители могут меняться в зависимости от производителя. Компетентные уполномоченные органы должны быть информированы о растворителях,

используемых в производстве. Эта информация должна приводиться в

досье, которое подается для регистрации.

Если используются растворители класса 3, то для контроля их

содержания можно применять тест «Потеря в массе при высушивании» или тест, указанный в частной статье. Если для растворителей класса 3 обосновано и разрешено предельное содержание более 0,5%, то тест, указанный в частной статье, является обязательным. В этом случае

расчеты ведутся с перерасчетом на безводное и свободное от остаточных

растворителей вещество. Во всех случаях компетентные органы должны

быть проинформированы об используемых растворителях класса 3.

Для контроля остаточных растворителей класса 1 или 2 (или класса 3 с

содержанием более 0,5%) следует использовать, по возможности,

методику, приведенную в частной статье 2.4.24. В ином случае следует применять подходящую валидированную методику.

5.4.1. ВВЕДЕНИЕ

Целью данной статьи является рекомендация приемлемых для

безопасности больного количеств остаточных растворителей в лекарственных средствах. В статье рекомендуется использование менее токсичных растворителей, и описываются токсикологически обоснованные

предельные содержания некоторых из них.

Остаточные растворители в лекарственных средствах определяются

согласно данному руководству как летучие органические вещества, используемые или образующиеся при производстве субстанций,

вспомогательных веществ или готовых лекарственных средств. Эти

растворители полностью не удаляются в применяемом технологическом

процессе. Выбор подходящего растворителя для синтеза субстанции может увеличить ее выход или обусловить такие характеристики, как кристаллическая форма, чистота и растворимость. Таким образом,

растворитель иногда может быть критическим параметром в процессе

синтеза. Данное руководство не распространяется на растворители,

используемые в качестве вспомогательных веществ или относящиеся по

составу к сольватам. Напротив, содержание растворителей в таких препаратах должно обосновываться и определяться.

Поскольку остаточные растворители не имеют терапевтического действия, адекватного действию лекарственного вещества, они должны

удаляться до такой степени, чтобы удовлетворять требованиям спецификации, надлежащей производственной практики (GMP) или другим

требованиям к качеству. Лекарственные средства не должны содержать

остаточные растворители выше нормы, установленной данными по безопасности. Следует избегать использования при производстве субстанций, вспомогательных веществ и готовых лекарственных средств растворителей, имеющих высокую токсичность (класс 1, Табл. 1), если их

применение не может быть достаточно обоснованным с точки зрения

оценки «риск-польза». Содержание некоторых растворителей, имеющих

меньшую токсичность (класс 2, Табл. 2), должно быть ограничено, чтобы исключить потенциальный побочный эффект. Идеально на практике должны

использоваться менее токсичные растворители (класс 3, Табл. 3). Полный

список растворителей, включенных в данное руководство, представлен в Приложении 1. Данный перечень не является исчерпывающим, он может дополняться другими используемыми растворителями. Рекомендуемые предельные содержания остаточных растворителей классов 1 и 2, а также

классификация растворителей может изменяться по мере появления новых данных относительно их безопасности. Обоснование безопасности

применения на рынке нового лекарственного средства, содержащего новый

растворитель, отсутствующий в перечне растворителей (Приложение 1), может строиться на концепции данного руководства.

5.4.2. ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Область применения статьи – остаточные растворители в лекарственных

субстанциях, вспомогательных веществах и лекарственных средствах. Определение остаточных растворителей необходимо проводить, если известно, что процесс

производства или очистки приводит к их появлению. Следует определять те растворители, которые используются или производятся в процессе изготовления или очистки лекарственных субстанций, вспомогательных веществ или лекарственных средств. Для определения содержания остаточных растворителей возможно как

проведение испытания лекарственного средства, так и использование совокупного

метода расчета, исходя из информации об их содержании во входящих ингредиентах, использованных в процессе производства лекарственного средства.

Если на основании результатов вычисления, концентрация остаточных растворителей не превышает предела, рекомендуемого в настоящей статье, нет

необходимости проводить испытания готового лекарственного средства на

содержание остаточных растворителей. Однако, если расчетная концентрация выше рекомендуемого предела, лекарственное средство должно быть проверено, чтобы

установить, способствует ли процесс изготовления уменьшению уровня данного растворителя до приемлемого количества. Испытание готового лекарственного

средства также необходимо проводить, если растворитель используется в процессе его производства.

Данная статья не относится ни к потенциально новым лекарственным субстанциям, вспомогательным веществам и лекарственным средствам,

находящимся на стадии клинических испытаний, ни к зарегистрированным лекарственным средствам.

Статья применима ко всем дозированным формам и способам применения. В некоторых случаях, таких как: краткосрочное (30 дней или меньше) или местное

применение, могут быть приемлемы более высокие уровни остаточных растворителей. Оценка таких уровней должна проводиться в каждом конкретном

случае.

Дополнительную информацию по остаточным растворителям см. в Приложении 2.

5.4.3. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ

5.4.3.1. КЛАССИФИКАЦИЯ ОСТАТОЧНЫХ РАСТВОРИТЕЛЕЙ ПО СТЕПЕНИ РИСКА

Международная программа по химической безопасности для описания

пределов воздействия токсических химических реагентов использует термин

«максимально допустимое ежедневное потребление» (TDI или ДЕП), а Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) и другие национальные и международные

организации здравоохранения и институты используют термин «приемлемое

ежедневное потребление» (ADI или ПЕП). С целью избежания путаницы, в данной статье определен новый термин «допустимая (разрешенная) суточная доза» (PDE или ДСД) - это максимально приемлемое суточное потребление остаточного растворителя в лекарственном средстве.

Остаточные растворители, которым дает оценку данная статья, перечислены в Приложении 1 общими названиями и структурными формулами. Они оценивались

по степени возможного риска для здоровья человека и разделены на 3 класса:

Класс 1: Растворители, использование которых нужно избегать. Известные канцерогены для человека; предполагаемые канцерогены для человека;

растворители, опасные для окружающей среды.

Класс 2: Растворители, использование которых нужно ограничивать. Не генотоксичные канцерогены для животных или растворители, которые могут вызвать

другие необратимые эффекты, такие как нейротоксичность или тератогенность. Растворители, подозреваемые в другой существенной, но обратимой токсичности.

Класс 3: Малотоксичные растворители. Растворители с низким потенциалом токсичности для человека; для них не требуется установливать предельное

содержание, обусловленное информацией о риске для здоровья человека. Растворители Класса 3 имеют ДСД от 50 мг/день и выше.

5.4.3.2.МЕТОДЫ УСТАНОВЛЕНИЯ ПРЕДЕЛЬНОГО СОДЕРЖАНИЯ

ВПриложении 3 представлен метод для установления предельной суточной дозы остаточных растворителей.