Gos_farmokopeya_RB_2_tom_2007

Липы цветки

371

шелистиков с внутренней стороны расположены длинные прямые волоски, состоящие из двух параллельных клеток, сросшихся основаниями, на лепестках — вильчатые волоски из двух извилистых клеток, сросшихся основанием. В лепестках хорошо видны крупные вместилища со слизью.

С. Тонкослойная хроматография

(2.2.27).

Испытуемый раствор. К 1,0 г измельченно-

го сырья (355) прибавляют 10 мл метанола Р и нагревают в водяной бане при температуре 65°С в течение 5 мин. Охлаждают и фильтруют.

Раствор сравнения. 2,0 мг кислоты кофейной Р, 5 мг гиперозида Р и 5 мг рутина Р раст-

воряют в 10 мл метанола Р.

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем подходящего силикагеля.

Подвижная фаза: кислота муравьиная безводная Р — вода Р — метилэтилкетон Р — этилацетат Р (10:10:30:50, об/об/об).

Наносимый объем пробы: по 10 мкл в виде полос.

Фронт подвижной фазы: не менее 15 см от линии старта.

Высушивание: при температуре от 100°С до

105°С.

Проявление: горячую пластинку опрыскива-

ют раствором­ 10 г/л дифенилборной кислоты аминоэтилового эфира Р в метаноле Р и затем раствором­ 50 г/л макрогола 400 Р в метаноле Р.

Пластинку высушивают на воздухе в течение 30 мин и просматривают в ультрафиолетовом свете при длине волны 365 нм.

Результаты: на хроматограмме раствора сравнения обнаруживаются флуоресцирующие зоны (в порядке увеличения значения Rf): от желтовато-оранжевого до коричневатооранжевого цвета (рутин и гиперозид), зеленовато-синего цвета (кофейная кислота). На хроматограмме испытуемого раствора обнаруживается основная флуоресцирующая зона от коричневато-желтого до оранжевого цвета, расположенная над зоной гиперозида на хроматограмме раствора сравнения (при просматривании при дневном свете она также обнаруживается как основная зона); флуоресцирующая зона коричневато-желтого цвета на уровне зоны рутина на хроматограмме раствора сравнения; ниже этой зоны могут обнаруживаться две флуоресцирующие зоны желтого цвета; обнаруживаются флуоресцирующие зоны оранжевого и желтого цвета между зонами рутина и гиперозида на хроматограмме раствора сравнения; до пяти флуоресцирующих зон от желтого до оранжевого цвета между зонами гиперозида и кофейной кислоты на хроматограмме раствора сравнения; обнаруживается флуоресцирующая зона синего цвета непосредственно под зоной кофейной кислоты на хроматограмме раствора сравнения.

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Допустимые примеси (#2.8.2). Несырье-

вые части растения: соцветия с прицветниками и отдельные прицветники, поврежденные вредителями и пораженные ржавчиной, — не более 2 %; побуревшие и потемневшие части соцветия — не более 4 %; другие части растения (листья и побеги) — не более 1 %; соцветия, полностью отцветшие, с плодами — не более 2 %; измельченные частицы, проходящие сквозь сито (2400), — не более 3 %; осыпь отдельных цветков или соцветий без прицветников — не более 15 %. Органические примеси: не более 0,3 %. Минеральные примеси: не более 0,1 %.

Потерявмассепривысушивании(2.2.32).

Не более 13,0 %. 2,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до

105°С.

Общая зола (2.4.16). Не более 8,0 %.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ 1,000гизмельченногосырья(355)помещают

вкруглодонную колбу со шлифом, прибавляют

20 мл ацетона Р, 2 мл кислоты хлористоводородной Р1, 1 мл раствора 5 г/л гексаметиленте-

трамина Р и нагревают с обратным холодильникомвводянойбаневтечение30мин.Охлаждают, процеживаютчерезватныйтампонвмернуюколбу вместимостью 100 мл. Ватный тампон вместе

счастицами сырья помещают в ту же круглодонную колбу, прибавляют 20 мл ацетона Р и нагревают с обратным холодильником в водяной бане

втечение 10 мин. Охлаждают, процеживают в ту же мерную колбу вместимостью 100 мл. Ватный тампон вместе с частицами сырья помещают в ту же круглодонную колбу и повторяют экстракцию. Доводят объем извлечения до 100,0 мл ацетоном Р. 20,0 мл полученного раствора помещают в делительную воронку, прибавляют 20 мл

воды Р, встряхивают с 15 мл этилацетата­ Р и

трижды с этим же растворителем порциями по 10 мл. Этилацетатные слои объединяют и дважды промывают водой Р порциями по 40 мл. Этилацетатное извлечение фильтруют через бумаж-

ный фильтр с натрия сульфатом безводным Р

вмерную колбу вместимостью 50 мл. Доводят объем полученного раствора до 50,0 мл этила-

цетатом Р (раствор А).

Испытуемый раствор. К 10,0 мл раствора А прибавляют 2 мл реактива алюминия хлори-

да Р и доводят 5 % (об/об) раствором­ кислоты уксусной ледяной Р в метаноле Р до объема

25,0 мл.

Компенсационный раствор. 10,0 мл раст-

вора А разводят 5 % (об/об) раствором­ кислоты уксусной ледяной Р в метаноле Р до объема

25,0 мл.

Через 45 мин измеряют оптическую плотность (2.2.25) испытуемого раствора при

425 нм.

372	Государственная фармакопея Республики Беларусь

Содержание флавоноидов в пересчете на кверцетин в процентах рассчитывают по формуле:

А×625 , m×714

где:

714 — удельный показатель поглощения кверцетина;

А — оптическая плотность испытуемого раствора;

m — масса навески испытуемого сырья, г.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Льна семена

Lini semen

LINSEED

Определение

Зрелые и высушенные семена травянистого растения Linum usitatissimum L.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

А. Внешние признаки (#2.8.3). Семена сплюснутые, удлиненной яйцевидной формы, длиной от 4 мм до 6 мм, шириной от 2 мм до 3 мм и толщиной от 1,5 мм до 2 мм; округлые с одного конца и заостренные с другого, с ясно заметным семенным рубчиком. Семенная кожура от темно-красновато-коричневого до желтого цвета, гладкая и блестящая, при увеличении — мелковыемчатая. Под кожурой располагается узкий беловатый эндосперм и зародыш, состоящий из двух больших плоских желтоватых и маслянистых семядолей.

В. Микроскопия (#2.8.3). Исследуют из-

мельченное сырье (355). Измельченное сырье маслянистое на ощупь. Видны: фрагменты наружных эпидермальных клеток семенной кожуры, наполненные слизью; слой колленхимных клеток, представленный одним рядом продольных удлиненных склереид с утолщенными мелкоячеистыми стенками; тонкостенные ячеистые клетки гиалинового слоя, часто остающиеся прикрепленными к удлиненным склереидам и пересекающие их приблизительно под прямым углом; относительно утолщенные многоугольные пигментные клетки внутреннего эпидермиса семенной кожуры с оранжево-коричневым содержимым; паренхима эндосперма и семядолей, содержащая алейроновые зерна и капли жирного масла.

ИСПЫТАНИЯ (Числовые показатели)

Допустимые примеси (#2.8.2). Несырье-

вые части растения: части коробочек, плодоно-

жек, битых семян — не более 1 %. Органические примеси: не более 2 %. Минеральные примеси: не более 0,5 %.

Потерявмассепривысушивании(2.2.32).

Не более 13,0 %. 1,000 г измельченного сырья (355) сушат при температуре от 100°С до 105°С в течение 2 ч.

Общая зола (2.4.16). Не более 6,0 %. Коэффициент набухания (2.8.4). Не

менее 4.

Хранение

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Любистка корни

Levistici radices

LOVAGE ROOT

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Цельные или измельченные высушенные корневища и корни Levisticum officinale Koch.

Содержат:

––цельное сырье: не менее 4,0 мл/кг эфирного масла в пересчете на сухое сырье;

––измельченное сырье: не менее 3,0 мл/кг эфирного масла в пересчете на сухое сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

A.Внешние признаки (#2.8.3). Корневища и крупные корни часто продольно разрезаны. Корневища короткие, диаметром до 5 см, сероватокоричневого или желтовато-коричневого цвета, простые или с несколькими выпуклостями; корни с небольшими разветвлениями такого же цвета, что корневища; обычно толщиной до 1,5 см и длиной до 25 см; излом обычно гладкий

сочень широкой желтовато-белой корой и узкой коричневато-желтой древесиной.

B.Микроскопия (#2.8.3). При просматривании измельченного сырья (355) (коричневатожелтого цвета) с использованием раствора хлоралгидрата Р видны: клетки пробки, многоугольные или округлые, с содержимым коричневого цвета; обильная паренхима, главным образом тонкостеная и округлая, некоторые клетки с утолщенными стенками; группы мелких, сетчатоутолщенных сосудов, окруженные мелкоклеточной, нелигнифицированной паренхимой; фрагменты крупных сетчатых сосудов диаметром до 125 мкм; фрагменты секреторных каналов шириной до 180 мкм.

При использовании 50 % (об/об) раствора глицерина Р в измельченном сырье (355) видны зерна крахмала, простые, округлые до яйцевидных, размером около 12 мкм и многочисленные крупные сложные зерна, многие с несколькими компонентами.

Маклейи листья

373

C. Просматривают хроматограммы, полученные в испытании «Корни Angelica archange­ lica L.».

Результаты: ниже приведена последовательность зон хроматограмм раствора сравнения и испытуемого раствора.

Верх хроматографической пластинки

————	————
Эвгенол: (отмечают
при 254 нм)
	Интенсивная флуо-
	ресцирующая зона
	от бледно-синего до
	белого цвета
	Интенсивная флуо-
	ресцирующая зона
	от бледно-синего до
	белого цвета
Кумарин: (отмечают
при 254 нм)
————	————
	Одна или две ин-
	тенсивные флуорес-
	цирующие зоны от
	бледно-синего до бе-
	лого цвета
Раствор сравнения	Испытуемый раствор

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Корни Angelica archangelica L. Тонкослой-

ная хроматография (2.2.27).

Испытуемый раствор. К 1,0 г свежеизмель-

ченного сырья (355) прибавляют 5 мл метанола Р и кипятят в течение 30 с. Охлаждают и фильтруют.

Растворсравнения.25мклэвгенолаРи5мг кумарина Р растворяют в 10 мл метанола Р.

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем сили-

кагеля F254 Р.

Подвижная фаза: метиленхлорид Р — толуол Р (50:50, об/об).

Наносимый объем пробы: по 20 мкл в виде полос.

Фронт подвижной фазы: дважды по 10 см. Высушивание: на воздухе.

Проявление:просматриваютвультрафиолетовом свете при длине волны 254 нм. Отмечают зоны поглощения, соответствующие кумарину и эвгенолу на хроматограмме раствора сравнения. Просматривают в ультрафиолетовом свете при длине волны 365 нм.

Результаты: на хроматограмме испытуемого раствора в нижней трети не должны обнаруживаться флуоресцирующие зоны синего или желтого цвета.

Допустимые примеси (#2.8.2). Не более

3 %. Определение проводят из 50 г испытуемого сырья.

Потерявмассепривысушивании(2.2.32).

Не более 12,0 %. 1,000 г измельченного сырья (355) сушат при температуре от 100°С до 105°С в течение 2 ч.

Общая зола (2.4.16). Не более 8,0 %.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 2,0 %.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определяют содержание эфирного масла (2.8.12, метод А). 40,0 г испытуемого сырья, измельченного непосредственно перед испытанием (500), помещают в круглодонную колбу вместимостью 2000 мл, прибавляют 10 капель

вазелинового масла Р и 500 мл воды Р. В граду-

ированную трубку помещают 0,5 мл ксилола Р. Перегонку проводят со скоростью 2—3 мл/мин в течение 4 ч.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Маклейи листья

Macleayae folia

MACLEAYA LEAF*

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные в период от бутонизации до цветения и высушенные листья многолетних травя-

нистых растений Macleaya cordata (Willd.) R. Br. и Macleaya microcarpa (Maxim.) Fedde. Содержат не менее 0,5 % суммы бисульфатов сангвинарина и хелеритрина в пересчете на сангвиритрин в сухом сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

A. Внешние признаки (#2.8.3). Смесь цель-

ных или частично измельченных листьев. Листья сердцевидной формы, 5—7-раздельные, длиной до 25 см, сверху голые, от коричневатозеленого до коричневато-желтого или сероватозеленого цвета, снизу густоопушенные, серого или желтовато-серого цвета. Кусочки черешков листьев длиной до 12 см и шириной до 1 см, неправильно цилиндрической, у основания — подковообразной формы, иногда сплюснутые, от желтовато-серого до коричневато-серого цвета, иногда с восковым налетом.

В. Микроскопия (#2.8.3). При просматривании листа или фрагментов листовой пластинки с поверхности видно, что клетки верхнего эпидермиса имеют многоугольную форму и почти прямые стенки; клетки нижнего эпидермиса со слабо извилистыми стенками. Устьица многочисленные, овальной формы, погруженные, с 5—6 околоустьичными клетками (аномоцитный тип),

374	Государственная фармакопея Республики Беларусь

расположены только на нижней стороне листа. Волоски простые, многоклеточные, гладкие, прямые или слабоизогнутые, встречаются на нижней стороне листа, чаще по жилкам. Изредка встречаются многоклеточные волоски с основанием из двух рядов клеток. В мезофилле листа вдоль проводящих пучков видны млечники с зернистым содержанием оранжево-коричневого цвета.

C. Тонкослойная хроматография (2.2.27).

Испытуемый раствор. 1 г измельченного сырья (500) помещают в коническую колбу вместимостью 50 мл, смачивают 1 мл раствора аммиака разведенного Р1, тщательно переме-

шивают, прибавляют 15 мл хлороформа Р, настаивают при периодическом взбалтывании в закрытой колбе в течение 10 мин и фильтруют.

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем подхо-

дящего силикагеля Р.

Подвижная фаза: толуол Р — 96 % спирт Р — раствор аммиака концентрированный Р

(10:2:0,05, об/об).

Наносимый объем пробы: 20 мкл в виде по-

лосы.

Фронт подвижной фазы: не менее 15 см от линии старта.

Высушивание: на воздухе.

Проявление: просматривают в ультрафиолетовом свете при длине волны 365 нм.

Результаты: на хроматограмме испытуемого раствора обнаруживаются зоны оранжевого цвета с Rf около 0,8 (сангвинарин) и желтого цвета c Rf около 0,7 (хелеритрин); могут обнаруживаться и другие слабые зоны.

D. 5 мл испытуемого раствора, приготовленного как указано выше, помещают в пробирку со шлифом, прибавляют 1 мл 10 % (об/об) раствора кислоты серной Р, закрывают пробкой и взбалтывают в течение 3 мин. При стоянии в водном слое выпадает осадок оранжевого цвета (бисульфаты сангвинарина и хелеритрина).

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Допустимыепримеси(#2.8.2).Несырьевые части растения: другие части растения (стебли, цветки, плоды) — не более 5 %. Органические примеси: не более 1 %. Минеральные примеси: не более 1 %.

Потерявмассепривысушивании(2.2.32).

Не более 13,0 %. 1,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до

105°С.

Общая зола (2.4.16). Не более 13,0 %.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 0,5 %.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

0,500 г измельченного сырья (500) помещают в коническую плоскодонную колбу со шлифом вместимостью 50 мл, прибавляют 0,5 мл

раствора аммиака концентрированного Р,

тщательно перемешивают стеклянной палочкой до получения однородной увлажненной массы. Закрывают колбу пробкой и выдерживают при комнатной температуре в течение 30 мин. Затем

вколбу прибавляют 25 мл хлороформа Р, закрывают пробкой и выдерживают при комнатной температуре в течение 15 ч. По истечении указанного промежутка времени содержимое колбы перемешивают в течение 15 мин и фильтруют через стеклянный фильтр (ПОР 100) в вакууме

вкруглодонную колбу вместимостью 50 мл. Коническую колбу и осадок на фильтре промывают хлороформом Р дважды порциями по 10 мл, объединяя с фильтратом в круглодонной колбе. Растворитель отгоняют досуха в вакууме на водяной бане при температуре 50°С. Остаток растворяют в 1 мл хлороформа Р, прибавляют

25 мл раствора 50 г/л кислоты уксусной ледя-

ной Р, закрывают колбу пробкой и интенсивно встряхивают в течение 1—2 мин. Полученную эмульсию переносят в пластиковые центрифужные пробирки с пробками и центрифугируют при

5000—7000 об/мин в течение 10—15 мин. 5,0 мл

надосадочной жидкости доводят раствором­

50 г/л кислоты уксусной ледяной Р до объема

25,0 мл.

Измеряют оптическую плотность (2.2.25) полученного раствора при 452 нм, используя раст-

вор 50 г/л кислоты уксусной ледяной Р в каче-

стве компенсационного раствора.

Содержание суммы бисульфатов сангвинарина и хелеритрина в пересчете на сангвиритрин в процентах рассчитывают по формуле:

А×125 , m×106

где:

106 — удельный показатель поглощения сангвиритрина;

А — оптическая плотность раствора;

m — масса навески испытуемого сырья, г.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Малины плоды

Rubi idaei fructus

RASPBERRY FRUIT*

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные в период созревания, освобожденные от цветоножек и конусовидного цветоложа, высушенные плоды Rubus idaeus L.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

А. Внешние признаки (#2.8.3). Плоды сбор-

ные — сложные костянки округлой или конусо-

Марены корневища и корни	375

видной формы, состоящие из большого числа (30—60) отдельно сросшихся между собой костянок. Они образуют полый конус с округлой верхушкой диаметром от 7,5 мм до 12 мм. Отдельные костянки мелкие, сморщенные, шаровидные или эллипсовидные, опушенные, внутри с косточкой, имеющей ямчатую поверхность. Цвет плодов с поверхности от серовато-красного до коричневато-красного, мякоти — розоватый, косточек — темно-желтый. Запах специфический, приятный.

В. Микроскопия (#2.8.3). При просматривании плода-костянки с поверхности видны многоугольные клетки эпидермиса, имеющие очень тонкие стенки. Железистые волоски встречаются по всей поверхности. Они имеют короткую одноклеточнуюножкуиовальнуюдвуклеточную,реже шаровидную одноклеточную головку, содержимое которой окрашивается раствором­ cудана III Р в оранжевый цвет. Многочисленные простые волоски одноклеточные, очень тонкостенные, прикреплены к маленькой круглой клетке кожицы. Встречаются цельные, чаще обломанные пестики с рыльцем. Клетки паренхимы мякоти крупные, тонкостенные, содержат мелкие друзы оксалата кальция. Механическая ткань околоплодника костянки состоит из каменистых клеток, располагающихся пластами.

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Допустимыепримеси(#2.8.2).Несырьевые части растения: почерневшие плоды — не более 8 %; плоды, слипшиеся в комки, — не более 4 %; плоды с неотделенными цветоножками и цветоложами — не более 2 %; другие части растения (листья и стебли) — не более 0,5 %; измельченные частицы плодов, проходящие сквозь сито (1400), — не более 4 %. Органические примеси: не более 0,5 %. Минеральные примеси: не более

0,5 %.

Потерявмассепривысушивании(2.2.32).

Не более 15,0 %. 1,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до

105°С.

Общая зола (2.4.16). Не более 3,5 %.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Марены корневища и корни

Rubiae rhizomata et radices

MADDER ROOT*

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные весной в начале вегетации или осенью в период плодоношения, тщательно очищенные от земли и высушенные корневища

и корни многолетних травянистых растений Rubia tinctorum L. или Rubia iberica (Fish. ex DC). C. Koch.Содержатнеменее3,0 %связанныхпроизводных антрацена в пересчете на сухое сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

A.Внешние признаки (#2.8.3). Корневища

икорни продольно-морщинистые, цилиндрические, различной длины, толщиной от 2 мм до 18 мм, обычно с отслаивающейся шелушащейся пробкой. У корневищ в центре обычно имеется полость. Цвет корневищ и корней снаружи красновато-коричневый, на изломе видна красновато-коричневаякораиоранжево-красная древесина. Запах слабый, специфический.

B.Микроскопия (#2.8.3). На поперечном срезе корня (или корневища) видно, что пробка состоит из клеток с очень тонкими оболочками. В некоторых клетках корковой паренхимы содержатся рафиды оксалата кальция. Линия камбия узкая. Древесина нелучистая. Сосуды древесины расположены группами, клетки древесной паренхимы — радиальными рядами. Все элементы древесины одревесневшие. В корневище центральная часть занята крупными клетками сердцевины с утолщенными пористыми стенками; встречаются рафиды оксалата кальция.

D.К 50 мг измельченного сырья (180) при-

бавляют 25 мл кислоты хлористоводородной разведенной Р и нагревают смесь на водяной бане в течение 15 мин. Охлаждают, встряхивают с 20 мл эфира Р и отбрасывают водный слой. Эфирный слой встряхивают с 10 мл раствора аммиака разведенного Р1. Водный слой приоб-

ретает цвет от красного до фиолетового.

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Допустимыепримеси(#2.8.2).Несырьевые части растения: другие части растения (стебли, листья и другие) — не более 1,5 %. Органические примеси: не более 1 %. Минеральные примеси: не более 1 %.

Потерявмассепривысушивании(2.2.32).

Не более 13,0 %. 2,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до

105°С.

Общая зола (2.4.16). Не более 10,0 %.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Построение градуировочного графика. 50,0 г кобальта хлорида Р, высушенного в

эксикаторе до постоянной массы, растворяют в 250 мл воды Р, прибавляют 1 мл хлористо-

водородной кислоты Р и доводят водой Р до объема 500,0 мл. Полученный раствор является исходным (№  10). Из полученного раствора готовят серию разведенных растворов (№  1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 и 9), содержащих кобальта хлорида

(СоСl2·6H2O) соответственно 0,010; 0,020; 0,030; 0,040; 0,050; 0,060; 0,070; 0,080 и 0,090 г в 1 мл,

376	Государственная фармакопея Республики Беларусь

измеряют оптические плотности (2.2.25) полученных растворов при 530 нм, используя воду Р в качестве компенсационного раствора. Для построения градуировочного графика на оси абсцисс откладывают концентрацию раствора, а на оси ординат — их оптическую плотность. При этом концентрации растворов кобальта хлорида выражают в соответствующих концентрациях производных антрацена, пользуясь таб­ лицей 1.

		Таблица 1
№	Концентрация	Концентрация
п/п	кобальта хлорида	производных
	(CoCl2·6H2O), г/мл	антрацена, мг/мл
1	0,010	0,0027
2	0,020	0,0060
3	0,030	0,0088
4	0,040	0,0117
5	0,050	0,0146
6	0,060	0,0176
7	0,070	0,0204
8	0,080	0,0233
9	0,090	0,0260
10	0,100	0,0281

Определение суммы производных антрацена. 0,100 г измельченного сырья (250) помещают в колбу вместимостью 200 мл, прибавля-

ют 7,5 мл кислоты уксусной ледяной Р, 1 мл кислоты хлористоводородной Р и нагревают с обратным холодильником в водяной бане в течение 15 мин при периодическом встряхивании вращательным движением, смывая появляющийся на стенках колбы осадок. Охлаждают, прибавляют 30 мл эфира Р и кипятят с обратным холодильником на водяной бане при температуре 35°С в течение 15 мин. Охлаждают, процеживают через ватный тампон в делительную воронку вместимостью 250 мл. Ватный тампон переносят в колбу и повторяют экстракцию дважды с эфиром Р, порциями по 30 мл. Охлаждают, процеживают в ту же делительную воронку вместимостью 250 мл. Эфирное извлечение промывают дважды водой Р порциями по 20 мл. Водный слой отбрасывают. Осторожно, по стенкам, прибавляют 15 мл раствора 300 г/л натрия гидроксида Р, 25 мл щелочно-аммиачного раствора Р и осторожно взбалтывают в течение 5 мин, охлаждая воронку под струей холодной воды. После полного расслоения прозрачный красный нижний слой не фильтруя сливают в мерную колбу вместимостью 500 мл, а эфирный слой обрабатывают порциями по 25 мл щелочно-аммиачного раст-

вора Р до прекращения окрашивания жидкости и сливают в ту же мерную колбу. Прибавляют

3 капли раствора водорода пероксида концен-

трированного Р и доводят до объема 500,0 мл

щелочно-аммиачным раствором­ Р.

Через 10 мин измеряют оптическую плотность (2.2.25) при 530 нм в кювете с толщиной слоя 5 мм, используя щелочно-аммиачный раст-

вор Р в качестве компенсационного раствора. Концентрацию производных антрацена в

растворе (мг/мл) определяют по градуировочному графику.

Содержание суммы производных антрацена (Х) в процентах рассчитывают по формуле:

Х =Сm×50 ,

где:

С — концентрация производных антрацена, определенная по градуировочному графику, мг/мл;

m — масса навески испытуемого сырья, г.

Определение свободных производных антра-

цена. 0,100 г измельченного сырья (250) помещают в колбу вместимостью 300 мл, прибавляют 50 мл эфира Р и кипятят с обратным холодильником на водяной бане при температуре 35°С в течение 10 мин. Охлаждают, процеживают через ватныйтампонвделительнуюворонкувместимостью 300 мл. Ватный тампон переносят обратно в колбу и повторяют экстракцию дважды с эфиром Р, порциями по 50 мл. Охлаждают, процеживают в ту же делительную воронку вместимостью

300 мл. Прибавляют 20 мл щелочно-аммиачного раствора Р и осторожно взбалтывают в течение 5 мин, охлаждая воронку под струей холодной воды. После полного расслоения нижний слой не фильтруясливаютвмернуюколбувместимостью 100 мл, а эфирный слой трижды обрабатывают

щелочно-аммиачным раст­вором Р порциями по 20 мл и сливают в ту же мерную колбу. При-

бавляют 1 каплю раствора водорода пероксида концентрированного Р и доводят до объема 100,0 мл щелочно-аммиачным раст­вором Р.

Через 10 мин измеряют оптическую плотность (2.2.25) при 530 нм в кювете с толщиной слоя 5 мм, используя щелочно-аммиачный раст-

вор Р в качестве компенсационного раствора. Концентрацию производных антрацена в

растворе (мг/мл) определяют по градуировочному графику.

Содержание свободных производных антрацена (Х1) в процентах рассчитывают по формуле:

С×10

Х1 = m ,

где:

С — концентрация производных антрацена, определенная по градуировочному графику, мг/мл;

m — масса навески испытуемого сырья, г.

Определение связанных производных ан-

трацена. Содержание связанных производных

Мать-и-мачехи листья

377

антрацена (Х2) в процентах рассчитывают по формуле:

Х2 = Х-Х1

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Мать-и-мачехи листья

Tussilaginis farfarae folia

COLTSFOOT LEAF*

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные в первой половине лета и высушенные листья дикорастущего многолетнего травянистого растения Tussilago farfara L. Содержат не менее 4,0 % полисахаридов в пересчете на сухое сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

А. Внешние признаки (#2.8.3). Смесь цель-

ных или частично измельченных листьев. Листья округлосердцевидные, по кругу выемчатые и неравномерно редко- и мелкозубчатые, сверху голые, снизу беловойлочные от обилия спутанных длинных волосков. Черешки тонкие, сверху желобоватые, часто с сохранившимся войлочным опушением. Длина листовой пластинки обычно 8—15 см, ширина около 10 см, длина черешка около 5 см. Листья не должны быть слишком молодыми, то есть не должны иметь густого опушения на верхней стороне. Цвет листьев с верхней стороны зеленый, с нижней — беловато-серый. Запах отсутствует. Вкус слабо-горьковатый с ощущением слизистости.

В. Микроскопия (#2.8.3). При просма-

тривании верхней стороны листа с поверхности видно, что эпидермис состоит из крупных многоугольных клеток с прямыми, нередко четковидно-утолщенными боковыми стенками. Над жилками эпидермальные клетки вытянуты, остальные — изодиаметрические. Кутикула толстая, морщинисто-складчатая, над жилками продольно-складчатая. Клетки нижнего эпидермиса мелкие с сильно извилистыми стенками. Кутикула тонкая, морщинисто-складчатая, над жилками продольно-складчатая. Над воздухоносными полостями эпидермис приподнят, здесь расположены 1—2 устьица. Устьица крупные, овальные, аномоцитного типа. На верхней стороне листа устьица встречаются редко, имеют 4—5 околоустьичных клеток; на нижней — многочисленные с 7—9 околоустьичными клетками, расположенными радиально. На обеих сторонах листа кутикула образует вокруг устьиц радиальную складчатость. Верхняя сторона листа почти голая, нижняя — покрыта многочисленными про-

стыми волосками. Волоски состоят из короткого основания, образованного 3—6 небольшими клетками и длинной конечной, шнуровидной, сильно извилистой клетки. Волоски переплетаются между собой. Губчатая ткань имеет характер аэренхимы: ее клетки расположены однорядными цепочками, образующими крупные воздухоносные полости.

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Допустимые примеси (#2.8.2). Несырье-

вые части растения: побуревшие листья и листья с бурыми пятнами ржавчины — не более 8 %. Органические примеси: не более 2 %. Минеральные примеси: не более 2 %.

Потерявмассепривысушивании(2.2.32).

Не более 13,0 %. 3,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до

105°С.

Общая зола (2.4.16). Не более 20,0 %.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 10,0 %.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

10,00 г измельченного сырья (1400) помещают в колбу вместимостью 500 мл, прибавляют 100 мл воды Р и кипятят с обратным холодильником при периодическом перемешивании в течение 30 мин. Оставляют до оседания частиц и собирают надосадочную жидкость. Экстракцию повторяют еще четыре раза с использованием воды Р порциями по 100 мл. Водные извлечения объединяют и центрифугируют при 5000 об/ мин в течение 10 мин. Всю надосадочную жидкость процеживают через ватный тампон и доводят водой Р до объема 500,0 мл. 25,0 мл полученного раствора помещают в центрифужную пробирку, прибавляют 75 мл 96 % спирта Р, перемешивают, подогревают в водяной бане при 60°С в течение 5 мин. Через 30 мин содержимое центрифугируют при 5000 об/мин в течение 30 мин. Надосадочную жидкость фильтруют под вакуумом через высушенный при температуре от 100°С до 105°С до постоянной массы стеклянный фильтр (ПОР 16) диаметром 40 мм. Осадок количественно переносят на фильтр и последовательно промывают 15 мл смеси из

96 % спирта Р и воды Р (3:1, об/об), 10 мл ацетона Р и 10 мл этилацетата Р. Фильтр с осад-

ком высушивают сначала на воздухе, затем при температуре от 100°С до 105°С до постоянной массы.

Содержание полисахаридов в процентах рассчитывают по формуле:

(m2 -m1)×2000 , m

где:

m1 — масса фильтра, г;

m2 — масса фильтра с осадком, г;

m — масса навески испытуемого сырья, г.

378	Государственная фармакопея Республики Беларусь

хранение

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Мелиссы листья

Melissae folia

MELISSA LEAF

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Высушенные листья Melissa officinalis L. Cодержат не менее 4,0 % суммы гидроксикоричных кислот в пересчете на розмариновую кислоту (С18Н16О8; М.м. 360,3) в сухом сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

A.Внешние признаки (#2.8.3). Тонкие,

овальные или сердцевидные листья длиной до 8 см и шириной до 5 см с остатком черешка различной длины. Нижняя поверхность листа с заметно выступающей сетью жилок, край листа зубчатый или городчатый. Цвет листьев с верхней стороны ярко-зеленый, с нижней стороны более светлый. Запах специфический, напоминающий запах лимона.

B.Микроскопия (#2.8.3). Исследуют из-

мельченное сырье (355). Цвет зеленоватый. При просматривании листа видны клетки эпидермиса с извилистыми стенками. Устьица диацитные, расположены только на нижней стороне листа. Эфиромасличные железки с радиально расположенными восемью выделительными клетками. Волоски простые и головчатые. Простые волоски двух типов: короткие, узкие одноклеточные конические с хорошо выраженной кутикулой

имногоклеточные однорядные с острым концом

итолстой кутикулой. Головчатые волоски мелкие, состоят из одноили трехклеточной ножки и одноклеточной, значительно реже двуклеточной головки.

С. Тонкослойная хроматография (2.2.27).

Испытуемый раствор. 2,0 г измельченного сырья(355)помещаютвкруглодоннуюколбувместимостью 250 мл, прибавляют 100 мл воды Р. Нагревают в течение 1 ч в приборе для определения эфирного масла (2.8.12, метод А), предварительно поместив в приемник 0,5 мл ксилола Р. После перегонки органическую фазу переносят в мерную колбу вместимостью 1 мл, промывая

приемник небольшими порциями ксилола Р, и доводят до 1 мл этим же растворителем.

Раствор сравнения. 1,0 мкл цитронеллаля

Ри 10,0 мкл цитраля Р растворяют в 25 мл кси-

лола Р.

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем силикагеля Р

Подвижная фаза: этилацетат Р — гексан

Р(10:90, об/об).

Наносимый объем пробы: 10 мкл раствора сравнения и 20 мкл испытуемого раствора в виде полос.

Фронт подвижной фазы: не менее 15 см от линии старта.

Высушивание: на воздухе.

Проявление: пластинку опрыскивают раст­ вором анисового альдегида Р и нагревают при температуреот100°Сдо105°Свтечение10мин. Просматривают при дневном свете.

Результаты: ниже приведена последовательность зон хроматограмм раствора сравнения и испытуемого раствора. На хроматограмме испытуемого раствора могут обнаруживаться другие зоны.

Верх хроматографической пластинки

Цитронеллаль:	Зона от серо-
зона от серо-	го до серовато-
го до серовато-	фиолетового цвета
фиолетового цвета
	Зона красновато-
	фиолетового цвета
	(эпоксикариофиллен)
Цитраль: двойная	Двойная зона от
зона от серовато-	серовато-фиолетового
фиолетового	до синевато-
до синевато-	фиолетового цвета
фиолетового цвета
Раствор сравнения	Испытуемый раствор

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Допустимые примеси (#2.8.2). Несырье-

вые части растения: стебли диаметром более 1 мм — не более 10 %. Сумма других допустимых примесей: не более 2 %. Определение проводят из 20 г испытуемого сырья.

Потерявмассепривысушивании(2.2.32).

Не более 10,0 %. 1,000 г измельченного сырья (355) сушат при температуре от 100°С до 105°С в течение 2 ч.

Общая зола (2.4.16). Не более 12,0 %.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

К 0,200 г измельченного сырья (355) прибавляют 190 мл спирта (50 %, об/об) Р. Кипятят с обратным холодильником в водяной бане в течение 30 мин. Охлаждают и фильтруют в мерную колбу вместимостью 200 мл. Промывают фильтр 10 мл спирта (50 %, об/об) Р в ту же колбу. Доводят спиртом (50 %, об/об) Р до объема 200,0 мл (раствор А).

Испытуемый раствор. К 1,0 мл раствора А в пробирке прибавляют 2 мл 0,5 М раствора хлористоводородной кислоты, 2 мл раствора,

полученного при растворении 10 г натрия мо-

либдата Р и 10 г натрия нитрита Р в 100 мл

воды Р. Затем прибавляют 2 мл раствора нат­

Мелиссы трава

379

рия гидроксида разведенного Р и доводят водой Р до объема 10,0 мл.

Компенсационный раствор. К 1,0 мл раст-

вора А в другой пробирке прибавляют 2 мл 0,5 М

раствора хлористоводородной кислоты, 2 мл раствора натрия гидроксида разведенного Р и

доводят водой Р до объема 10,0 мл. Немедленно измеряют оптическую плот-

ность (2.2.25) испытуемого раствора при 505 нм Содержание суммы гидроксикоричных кислот в пересчете на розмариновую кислоту в про-

центах рассчитывают по формуле:

А×2000 , m×400

где:

400 — удельный показатель поглощения розмариновой кислоты;

А — оптическая плотность испытуемого раствора;

m — масса навески испытуемого сырья, г.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Мелиссы трава

Melissae herba

MELISSA HERB*

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранная в фазу бутонизации и цветения высушенная трава многолетнего травянистого растения Melissa officinalis L. Cодержит не менее 4,0 % суммы гидроксикоричных кислот в пересчете на розмариновую кислоту (С18Н16О8; М.м. 360,3) в сухом сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

A.Внешниепризнаки(#2.8.3).Олиственные верхние части стеблей длиной до 35 см с цветками и листьями и их кусочки, а также цельные или измельченные листья, соцветия и отдельные цветки. Стебель ветвистый, четырехгранный, продольно-желобоватый, с рыхлой сероватобелой сердцевиной; листья супротивные, черешковые, яйцевидные, городчато-пильчатые по краю, длиной до 8 см и шириной до 5 см, по всей пластинке листа расположены эфирномасличныежелезки;цветкимелкие,сидячие,собранные по 2—10 в ложные мутовки в пазухах верхних листьев; прицветники эллиптические, заостренные или продолговатые; чашечка короткотрубчатая, колокольчатая, двугубая, верхняя губа трехзубчатая, нижняя — двузубчатая; венчик двугубый, пятилепестной, сросшийся в трубочку, в полтора-два раза длиннее чашечки; тычинок четыре, две из которых короче других; пестик с

верхней четырехраздельной завязью и длинным двураздельным столбиком. Стебли, листья и чашечкислегкаопушеныбеловатымижелезистыми волосками. Цвет листьев от серовато-зеленого до зеленого, иногда зеленовато-коричневый; стеблей — от светло-зеленого до сероватозеленого; цветков — желтовато-белый, розоватый или розовато-фиолетовый. Запах слабый, ароматный.

B. Микроскопия (#2.8.3). Видны: клетки верхнего эпидермиса с извилистыми боковыми стенками, нижнего — более мелкие и извилистые; устьица диацитного типа, расположенные на обеих сторонах листа; эфирномасличные железки округлой формы, расположены преимущественно на нижней стороне листа и состоят из 8 (реже из 6) радиально расположенных выделительных клеток. Волоски встречаются трех типов: простыедлинныемногоклеточныеимелкиеодноклеточные сосочковидные волоски с гладкой или бородавчатой кутикулой, головчатые волоски на одноклеточной, реже на длинной 1—3-клеточной ножке с шаровидной одноклеточной головкой. Простые волоски расположены в основном вдоль жилок и по краю листа; у многоклеточных простых волосков часто одна или более клеток спавшиеся. Клетки эпидермиса венчика с сильно извилистыми стенками. Для венчика характерны также волоски шлангообразной или пальцевидной формы, 1—3-клеточные, покрытые штриховой кутикулой. Фрагменты стебля­ , чашечки и венчика несут те же трихомы, что и листья.

С. Тонкослойная хроматография (2.2.27).

Испытуемый раствор. 2,0 г измельченного сырья(355)помещаютвкруглодоннуюколбувместимостью 250 мл, прибавляют 100 мл воды Р. Нагревают в течение 1 ч в приборе для определения эфирного масла (2.8.12, метод А), предварительно поместив в приемник 0,5 мл ксилола Р. После перегонки органическую фазу переносят в мерную колбу вместимостью 1 мл, промывая приемник небольшими порциями ксилола Р, и доводят до 1 мл этим же растворителем.

Раствор сравнения. 10 мкл цитраля Р раст-

воряют в 25 мл ксилола Р.

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем силикагеля Р.

Подвижная фаза: этилацетат Р — гексан Р (10:90, об/об).

Наносимый объем пробы: 10 мкл раствора сравнения и 30 мкл испытуемого раствора в виде полос.

Фронт подвижной фазы: не менее 15 см от линии старта.

Высушивание: на воздухе.

Проявление: пластинку опрыскивают раст­ вором анисового альдегида Р и нагревают при температуреот100°Сдо105°Свтечение10мин. Просматривают при дневном свете.

Результаты: ниже приведена последовательность зон хроматограмм раствора сравне-

380	Государственная фармакопея Республики Беларусь

ния и испытуемого раствора. На хроматограмме испытуемого раствора могут обнаруживаться и другие зоны.

Верх хроматографической пластинки

	Зона красновато-
	фиолетового цвета
	(эпоксикариофиллен)
Цитраль: двойная	Двойная зона от
зона от серовато-	серовато-фиолетового
фиолетового	до синевато-
до синевато-	фиолетового цвета
фиолетового цвета
Раствор сравнения	Испытуемый раствор

ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)

Допустимыепримеси(#2.8.2).Несырьевые части растения: стебли, в том числе отделенные при анализе, — не более 50 %. Органические примеси: не более 2 %. Минеральные примеси: не более 1 %.

Потерявмассепривысушивании(2.2.32).

Не более 12,0 %. 1,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до

105°С.

Общая зола (2.4.16). Не более 14,0 %.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 3,0 %.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

К 0,200 г измельченного сырья (355) прибавляют 190 мл спирта (50 %, об/об) Р. Кипятят с обратным холодильником в водяной бане в течение 30 мин. Охлаждают и фильтруют в мерную колбу вместимостью 200 мл. Промывают фильтр 10 мл спирта (50 %, об/об) Р в ту же колбу. Доводят спиртом (50 %, об/об) Р до объема 200,0 мл (раствор А).

Испытуемый раствор. К 1,0 мл раствора А в пробирке прибавляют 2 мл 0,5 М раствора хлористоводородной кислоты, 2 мл раствора,

полученного при растворении 10 г натрия мо-

либдата Р и 10 г натрия нитрита Р в 100 мл

воды Р. Затем прибавляют 2 мл раствора нат­ рия гидроксида разведенного Р и доводят во-

дой Р до объема 10,0 мл.

Компенсационный раствор. К 1,0 мл раст-

вора А в другой пробирке прибавляют 2 мл 0,5 М

раствора хлористоводородной кислоты, 2 мл раствора натрия гидроксида разведенного Р и

доводят водой Р до объема 10,0 мл. Немедленно измеряют оптическую плот-

ность (2.2.25) испытуемого раствора при 505 нм Содержание суммы гидроксикоричных кислот в пересчете на розмариновую кислоту в про-

центах рассчитывают по формуле:

А×2000 , m×400

где:

400 — удельный показатель поглощения розмариновой кислоты;

А — оптическая плотность испытуемого раствора;

m — масса навески испытуемого сырья, г.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.

Многоколосника морщинистого трава (Лофанта трава)

Agastache rugosae herba

GIANT-HYSSOP*

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранная в фазу цветения и высушенная трава Agastache rugosa Lindl. Содержит не менее 4,0 % суммы флавоноидов в пересчете на лютеолин (С15Н10О6; М.м. 286,2) в сухом сырье.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

А. Внешние признаки (#2.8.3). Цельные или частично измельченные олиственные цветоносные побеги длиной от 25 см до 45 см. Стебли четырехгранные, зеленые, коротко опушенные. Листья супротивные, длинночерешковые, яйцевидные, часто с сердцевидным основанием, к верхушке заостренные, край крупнопильчатый. Длина листовой пластинки 3—9 см, ширина 2—6 см, наиболее широкая часть расположена ближе к основанию листовой пластинки; длина черешка до 3,5 см. Цвет листьев сверху темнозеленый, снизу светло-зеленый из-за густых коротких прижатых волосков. Цветки собраны в ложные мутовки, объединенные в верхушечные колосовидные соцветия. Чашечка длиной 5—8 мм, неровнозубчатая, фиолетово-красного цвета. Венчик длиной от 7 мм до 10 мм, двугубый, более светлого цвета. Запах ароматный.

В. Микроскопия (#2.8.3). Клетки верхне-

го эпидермиса листа со слабо извилистыми стенками, обычно без устьиц. Имеются короткие 1—2-клеточные простые волоски; вдоль жилок часто встречаются головчатые волоски с 2-клеточной головкой, расположенные на короткой одноклеточной ножке. Клетки нижнего эпидермиса с сильно извилистыми стенками. Устьица многочисленные, как правило, окружены двумя околоустьичными клетками эпидермиса, расположенными перпендикулярно устьичной щели. Встречаются также устьица, окруженные большим числом (до 5) клеток эпидермиса. Многочисленные волоски расположены по жилкам и по всей нижней поверхности листовой