Gos_farmokopeya_RB_2_tom_2007
.pdf
Тысячелистника трава |
431 |
помещают в водяную баню и выдерживают до полной коагуляции осадка. Горячую жидкость полностью отфильтровывают в колбу через бумажный фильтр, прикрывая воронку часовым стеклом. Охлаждают, к фильтрату прибавляют 1 мл кислоты серной Р, колбу взвешивают с точностью до 0,01 г и кипятят с обратным холодильником в течение 1,5 ч, поддерживая равномерное и слабое кипение. Охлаждают до комнатной температуры, взвешивают, доводят массу колбы допервоначальнойводойРиполностьюотфильтровывают через бумажный фильтр в колбу вместимостью 250 мл. К фильтрату прибавляют 0,1 г порошка цинка Р и встряхивают в течение 5 мин. Жидкость нейтрализуют натрия гидрокарбона-
том Р (около 1—2 г) по красной лакмусовой бумаге Р, прибавляют еще 2 г натрия гидрокар-
боната Р и после его растворения фильтруют через бумажный фильтр.
50,0 мл фильтрата переносят в плоскодонную колбу вместимостью 500 мл, прибавляют 200 мл воды Р и немедленно титруют из микроили полумикробюретки 0,1 М раствором йода до появления синего окрашивания, не исчезающего втечение1мин,используявкачествеиндикатора
раствор крахмала, свободный от йодидов, Р. 1 мл 0,1 М раствора йода соответствует
0,01361 г арбутина.
Хранение
В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.
Тыквы семена
Cucurbitae semina
PUMPKIN SEED*
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Зрелые, очищенные от остатков мякоти околоплодника и высушенные семена однолетних растений Cucurbita pepo L., C. maxima Duch. и
C. moschata (Duch.) Poir. или смеси этих видов.
ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)
A. Внешние признаки (#2.8.3). Семена эл-
липтические, плотные, слегка суженные с одной стороны,окаймленныепокраюободком.Поверхность семян глянцевая или матовая, гладкая или слегка шероховатая. Кожура семени состоит из двух частей: деревянистой, легко отделяемой и внутренней — пленчатой, плотно прилегающей к зародышу; иногда деревянистая кожура отсутствует. Зародыш состоит из двух желтоватобелых семядолей и небольшого корешка. Длина семени от 1,5 см до 2,5 см, ширина от 0,8 см до 1,4 см. Цвет семян белый, белый с желтоватым или сероватым оттенком, реже зеленоватосерый или желтый. Запах отсутствует. Вкус се-
мени, очищенного от деревянистой части кожуры, маслянистый, сладковатый.
B. Микроскопия (#2.8.3). На поперечном срезе семени тыквы видны: семенная кожура, алейроновый слой (недоразвитый эндосперм) и семядоли зародыша. В семенной кожуре эпидермис представлен крупными палисадными клетками с утолщенными и, как правило, волнистыми боковыми стенками и почти всегда разрушенной наружной стенкой. Под эпидермисом расположена мощная склеренхима, в которой различаются три слоя. Наружная часть склеренхимы состоит из 5—7 рядов плотно сомкнутых клеток с многочисленными порами. Срединная часть склеренхимы представлена одним слоем очень крупных округлочетырехугольных клеток с толстой слоистой оболочкой и узкими порами. Внутренняя часть склеренхимы в зависимости от вида тыквы содержит от двух до шести рядов клеток звездчатой формы, которые образуют крупные межклетники. К внутренней части склеренхимы примыкают несколько слоев тонкостенных сдавленных клеток. Алейроновый слой представлен одним рядом небольших изодиаметрических клеток, густо заполненных алейроновыми зернами. В клетках семядолей хорошо различим эпидермальный слой из мелких овальных клеток; далее следуют клетки палисадного слоя. Все они густо заполнены алейроновыми зернами и каплями жирного масла.
ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)
Допустимые примеси (#2.8.2). Несырье-
вые части растения: фрагменты околоплодника в виде отделившихся пленок и остатков сухой мякоти — не более 0,2%; пустые и поврежденные семена — не более 2%. Органические примеси: не более 0,5%. Минеральные примеси: не более 0,1%.
Потерявмассепривысушивании(2.2.32).
Не более 13,0%. 2,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до
105°С.
Общая зола (2.4.16). Не более 5,0%.
ХРАНЕНИЕ
В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.
Тысячелистника трава
Millefolii herba
Yarrow
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Трава тысячелистника состоит из цельных или измельченных высушенных цветущих верхних частей Achillea millefolium L. Содержит не менее 1 мл/кг эфирного масла в пересчете на сухое сырье.
432 |
Государственная фармакопея Республики Беларусь |
ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)
А. Внешние признаки (#2.8.3). Цельные или частично измельченные цветоносные побеги. Стебли округлые, опушенные, с очередными листьями, длиной до 15 см. Листья длиной до 10 см, шириной до 3 см, продолговатые, дваждыперисторассеченные на ланцетные или линейные доли. Корзинки продолговато-яйцевидные, длиной 3—4 мм,шириной1,5—3 мм,в щитковидных соцветиях или одиночные. Обвертки корзинок из черепитчатых продолговато-яйцевидных листочков с перепончатыми буроватыми краями. Цветоложе корзинок с пленчатыми прицветниками. Краевые цветки пестичные. Средние цветки трубчатые обоеполые. Цвет стеблей и листьев серовато-зеленый, краевых цветков — белый, реже розовый, срединных — желтоватый. Запах слабый, ароматный.
В. Микроскопия (#2.8.3). При просматривании листа с поверхности видны клетки эпидермиса, несколько вытянутые по длине дольки листа, с извилистыми стенками и складчатой кутикулой, эпидермис с нижней стороны отличается более мелкими клетками и сильно извилистыми стенками. Устьица с обеих сторон листа, преобладают на нижней, окружены 3—5 клетками эпидермиса (аномоцитный тип). На обеих сторонах листа, особенно на нижней, встречаются многочисленные волоски и эфиромасличные железки. Волоски простые, в основании имеют 4—7 коротких клеток с тонкими оболочками, конечная клетка волоска длинная, слегка извилистая, с толстой оболочкой и узкой нитевидной полостью,
всырье часто отломана. Железки состоят из 8 (реже 6) выделительных клеток, расположенных
в2 ряда и 4 (реже 3) яруса. Жилки листа сопровождаются секреторными ходами с желтоватым зернистым или маслянистым содержимым.
С.К 2,0 г измельченного сырья(710) прибавляют 25 мл этилацетата Р, встряхивают в течение 5 мин и фильтруют. Выпаривают досуха на водяной бане и растворяют в 0,5 мл толуола Р (раствор А). К 0,1 мл полученного раствора прибавляют 2,5 мл раствора диметиламино-
бензальдегида Р8 и нагревают на водяной бане
втечение 2 мин. Охлаждают, прибавляют 5 мл
петролейного эфира Р и интенсивно встряхи-
вают. Водный раствор приобретает голубое или зеленовато-голубое окрашивание.
D. Тонкослойная хроматография
(2.2.27).
Испытуемый раствор. Используют раствор А, приготовленный как указано выше.
Раствор сравнения. 10 мг цинеола Р и 10 мг гвайазулена Р растворяют в 20 мл толуола Р.
Пластинка: ТСХ пластинка со слоем силикагеля Р.
Подвижная фаза: этилацетат Р — толуол Р (5:95, об/об).
Наносимый объем пробы: по 20 мкл в виде полос.
Фронт подвижной фазы: не менее 10 см от линии старта.
Высушивание: на воздухе.
Проявление: пластинку опрыскивают раст вором анисового альдегида Р, выдерживают при температуре от 100°С до 105°С в течение 5—10 мин. Просматривают при дневном свете.
Результаты: на хроматограмме раствора сравнениявверхнейчастиобнаруживаетсякрасная зона (гвайазулен), а в центральной части — синяя или серовато-синяя зона (цинеол). На хроматограмме испытуемого раствора обнаруживаются: фиолетовая зона немного выше зоны гвайазулена на хроматограмме раствора сравнения; ниже этой зоны красновато-фиолетовая зона,нижекоторойрасположеныоднаилидвене полностью разделенные серовато-фиолетовые или сероватые зоны (которые изменяют цвет на зеленовато-серый в течение нескольких часов) и красновато-фиолетовая зона немного выше зоны цинеола на хроматограмме раствора сравнения. На хроматограмме испытуемого раствора могут обнаруживаться и другие зоны.
ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)
Допустимыепримеси(#2.8.2).Несырьевые части растения: пожелтевшие, побуревшие и почерневшие части травы — не более 1 %, стебли толще 3 мм — не более 3 %. Органические примеси: не более 0,5 %. Минеральные примеси: не более 1 %.
Потерявмассепривысушивании(2.2.32).
Не более 13,0 %. 2,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до
105°С.
Общая зола (2.4.16). Не более 15,0 %.
Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 3,0 %.
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Определяют содержание эфирного масла (2.8.12, метод А). 20,0 г измельченного сырья помещают в круглодонную колбу вместимостью 1000 мл, прибавляют 500 мл смеси из воды Р
и этиленгликоля Р (1:9, об/об) в качестве жид-
кости для перегонки. В градуированную трубку помещают 0,2 мл ксилола Р и перегоняют со скоростью 2—3 мл/мин в течение 2 ч. За несколько минут до истечения времени перегонки выключают подачу воды в холодильник, продолжая перегонку, пока синие летучие компоненты не достигнут нижнего конца холодильника. Немедленно включают подачу воды в холодильник во избежание нагревания приемника. Через 5 мин останавливают перегонку. Заменяют круглодонную колбу вместимостью 1000 мл на круглодонную колбу вместимостью 250 мл, содержащую 50 мл воды Р и 0,4 мл ксилола Р. Перегоняют в течение 15 мин. Через 10 мин отмечают полученный объем. В контрольном опыте в градуи-
Укропа пахучего плоды |
433 |
рованную трубку помещают 0,2 мл ксилола Р и перегоняют смесь из 50 мл воды Р и 0,4 мл ксилола Р в течение 15 мин.
ХРАНЕНИЕ
В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.
Укропа пахучего плоды
Anethi graveolentis fructus
DILL FRUIT*
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Зрелые и высушенные плоды однолетнего травянистого растения Anethum graveolens L. Содержат не менее 20 мл/кг эфирного масла в пересчете на сухое сырье.
ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)
A.Внешние признаки (#2.8.3). Отдельные полуплодики (мерикарпии), реже цельные плоды (вислоплодники) длиной 3—7 мм, шириной 1,5—4 мм. Мерикарпий широкоэллиптический, слабовыпуклый на спинной стороне и плоский — на внутренней. Каждый мерикарпий с тремя нитевидными спинными ребрами и двумя плоскими крыловидными боковыми. Цвет плодов зеленовато-коричневый или коричневый, ребер — желто-коричневый. Запах сильный, ароматный.
B.Микроскопия (#2.8.3). На попереч-
ном срезе мерикарпия видны тангентальновытянутые клетки эпидермиса с толстыми стенками. Мезокарпий состоит из паренхимных клеток с тонкими или слегка утолщенными стенками, особенно в разросшихся боковых ребрышках. В ребрышках расположены проводящие пучки с группами механических волокон. В ложбинках находятся эфиромасличные канальцы: четыре на выпуклой стороне, два — на плоской. Канальцы различных размеров, септированные (с поперечными перегородками), с коричневыми выделительными клетками. Эндокарпий плотно сросшийся с семенной кожурой. Эндосперм состоит из многоугольных клеток, заполненных алейроновыми зернами, каплями жирного масла, мелкими друзами оксалата кальция.
ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)
Допустимыепримеси(#2.8.2).Несырьевые части растения: другие части растения (стебли и цветки) — не более 1 %. Органические примеси: не более 2 %. Минеральные примеси: не более
1 %.
Потерявмассепривысушивании(2.2.32).
Не более 12,0 %. 2,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до
105°С.
Общая зола (2.4.16). Не более 10,0 %.
Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 1,0 %.
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Определяют содержание эфирного масла (2.8.12, метод В). 10,00 г испытуемого сырья измельчают в ступке в течение 2 мин с прибавлением 3 г битого стекла или фарфора, предварительно отсеянного от пыли сквозь сито (250). Измельченную массу количественно переносят в колбу для перегонки. Перегонку проводят в течение 2,5 ч.
ХРАНЕНИЕ
В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.
Фасоли створки
Phaseoli vulgaris valvae fructus
HARICOT PODS*
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Высушенные створки зрелых плодов Phaseolus vulgaris L. Содержат не менее 0,01 % фенолкарбоновых кислот в пересчете на кофейную кислоту (С9Н7О4; М.м. 180,2) в сухом сырье.
ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)
A.Внешние признаки (#2.8.3). Удлинен-
ные, часто спиралевидно скрученные створки плодов, частично изломанные, желобчатые или прямые. Снаружи поверхность створок гладкая, иногда слегка морщинистая, матовая, от светложелтого до желтого цвета, изредка видны полос ки или пятна коричневого или фиолетового цвета. Внутренняя поверхность блестящая, белая или желтовато-белая.
B.Микроскопия (#2.8.3). Видны: экзокарпий, который снаружи состоит из прямостенных клеток эпидермиса со складчатостью кутикулы
ис многочисленными местами прикрепления оснований опавших волосков в виде радиальных розеток; под экзокарпием — 2-3 слоя веретеновидно вытянутых склеренхимных волокон с сильно утолщенными стенками; внутренняя поверхность створок плодов — эндокарпий — состоит из 2—6 рядов мелких одревесневших склеренхимных волокон.
С. Тонкослойная хроматография (2.2.27).
Испытуемыйраствор.К5,0гизмельченного сырья (355) прибавляют 10 мл смеси из метанола Р и воды Р (50:50, об/об), выдерживают в течение 30 мин при перемешивании и фильтруют.
Раствор сравнения. 3 мг аргинина Р раст-
воряют в 10 мл смеси из метанола Р и воды Р
(50:50, об/об).
434 |
Государственная фармакопея Республики Беларусь |
|
|
Пластинка: ТСХ пластинка со слоем сили-
кагеля G Р
Подвижная фаза: бутанол Р — кислота уксусная ледяная Р — вода Р (40:10:10, об/об/об).
Наносимый объем пробы: 4 мкл раствора сравнения и 15 мкл испытуемого раствора в виде полос.
Фронт подвижной фазы: не менее 10 см от линии старта.
Высушивание: на воздухе.
Проявление: пластинку опрыскивают раст вором нингидрина Р1 и нагревают при температуре от 100°С до 105°С в течение 5 мин. Просматривают при дневном свете.
Результаты: на хроматограмме раствора сравнения в нижней трети обнаруживается основная зона (аргинин). На хроматограмме испытуемого раствора обнаруживается зона, соответствующая по расположению и цвету зоне аргинина на хроматограмме раствора сравнения. На хроматограмме испытуемого раствора могут обнаруживаться и другие зоны.
ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)
Допустимые примеси (#2.8.2). Несырье-
вые части растения: почерневшие с обеих сторон створки плодов — не более 8 %; другие части растения — не более 3 %. Органические примеси: не более 2 %. Минеральные примеси: не более 0,5 %.
Потерявмассепривысушивании(2.2.32).
Не более 15,0 %. 2,000 г измельченного сырья (355) сушат при температуре от 100°С до 105°С.
Общая зола (2.4.16). Не более 10,0 %.
Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 0,8 %.
Вещества, извлекаемые водой (#2.8.18).
Не менее 15 %.
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
10,00 г измельченного сырья (710) помещают в круглодонную колбу вместимостью 250 мл, прибавляют 50 мл метанола Р, нагревают с обратным холодильником на водяной бане в течение 30 мин и фильтруют. Дважды повторяют экстракцию метанолом Р порциями по 50 мл и фильтруют. Извлечения объединяют и выпаривают досуха при пониженном давлении. Остаток растворяют в 20 мл горячей воды Р и выдерживают в холодильнике в течение 12 ч. Полученный раствор фильтруют через бумажный фильтр в мерную колбу вместимостью 25 мл и доводят водой Р до объема 25,0 мл (раствор А).
Испытуемый раствор. К 1,0 мл раствора А прибавляют 5 мл воды Р, 1 мл 0,5 М раствора хлористоводородной кислоты, 1 мл раствора,
полученного при растворении 10 г натрия мо-
либдата Р и 10 г натрия нитрита Р в 100 мл воды Р, 1 мл раствора 40 г/л натрия гидроксида Р и доводят водой Р до объема 10,0 мл.
Компенсационный раствор. К 5 мл воды Р прибавяют 1 мл 0,5 М раствора хлористово-
дородной кислоты, 1 мл раствора, полученного при растворении 10 г натрия молибдата Р и
10 г натрия нитрита Р в 100 мл воды Р, 1 мл раствора 40 г/л натрия гидроксида Р и доводят водой Р до объема 10,0 мл.
Измеряют оптическую плотность (2.2.25) испытуемого раствора при 490 нм.
Содержание фенолкарбоновых кислот в пересчете на кофейную кислоту в процентах рассчитывают по формуле:
А×500 , m×285
где:
285 — удельный показатель поглощения кофейной кислоты;
А — оптическая плотность испытуемого раствора;
m — масса навески испытуемого сырья, г.
ХРАНЕНИЕ
В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.
Фенхеля горького плоды
FoenicuIi amari fructus
FENNEL, BITTER
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Зрелые и высушенные плоды FoenicuIum vuIgare MiII. sp. vulgare var. vulgare. Содержат не менее 40 мл/кг эфирного масла в пересчете на безводное сырье. Эфирное масло содержит не менее 60,0 % анетола и не менее 15,0 % фенхона.
ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)
А. Внешние признаки (#2.8.3). Плод — вис-
лополодник, распадающийся на два полуплодика (мерикарпия). Плод продолговатой, почти цилиндрической формы, с округлым основанием и сужающейся верхушкой, с большим стилоподием. Длина плода обычно от 3 мм до 12 мм, ширина от 3 мм до 4 мм. Мерикарпии обычно свободные, голые, с пятью заметными продолговатыми ребрышками. На поперечном срезе при увеличении видны крупные эфиромасличные канальцы: четыре с наружной стороны и два — с внутренней. Цвет от зеленовато-коричневого, коричневого или зеленого цвета.
В. Микроскопия (#2.8.3). Исследуют из-
мельченное сырье (355). Цвет от сероватокоричневого до серовато-желтого. Видны: желтые фрагменты широких секреторных канальцев, обычно состоящих из многоугольных сектеторных клеток с желтовато-коричневыми стенками, и связанного с ними слоя тонкостен-
Фенхеля сладкого плоды |
435 |
|
|
ных поперечно-вытянутых клеток шириной от 2 мкм до 9 мкм, расположенных паркетообразно; сетчатаяпаренхимамезокарпа;многочисленные тяжи волокон из ребрышек, часто с узкими спиральными сосудами; многочисленные фрагментыэндосперма,содержащиеалейроновыезерна и мелкие мелкорозеточные кристаллы оксалата кальция, а также тяжи волокон из карпофора.
С. Тонкослойная хроматография (2.2.27).
Испытуемый раствор. К 0,3 г свежеизмель-
ченного сырья (1400) прибавляют 5,0 мл метиленхлорида Р и встряхивают в течение 15 мин. Фильтруютиосторожновыпариваютфильтратдосухана водянойбанепритемпературе60°С.Остатокпосле выпаривания растворяют в 0,5 мл толуола Р.
Растворсравнения.50мкланетолаРи10мкл фенхона Р растворяют в 5,0 мл гексана Р.
Пластинка: ТСХ пластинка со слоем сили-
кагеля GF254 Р.
Подвижная фаза: гексан Р — толуол Р
(20:80, об/об).
Наносимый объем пробы: по 10 мкл в виде полос длиной 20 мм и шириной 3 мм.
Фронт подвижной фазы: не менее 10 см от линии старта.
Высушивание: на воздухе.
Проявление А: просматривают в ультрафиолетовом свете при длине волны 254 нм.
Результаты А: на хроматограммах в центральной части обнаруживается зона поглощения, соответствующая анетолу.
Проявление В: пластинку опрыскивают кислотой серной Р и нагревают при температуре 140°С в течение 5—10 мин. Просматривают при дневном свете.
Результаты В: на хроматограмме раствора сравнения в нижней трети обнаруживается зона желтого цвета (фенхон) и в центральной части — зона фиолетового цвета (анетол). На хроматограмме испытуемого раствора обнаруживаются зоны, соответствующие по расположению и цвету зонам фенхона и анетола на хроматограмме раствора сравнения; в верхней трети — зона красновато-коричневого цвета (терпены).
ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)
Эстрагол. Не более 5,0 % в эфирном масле, полученном в разделе «Количественное определение». Определение проводят как указано в разделе «Количественное определение. Определение содержания анетола и фенхона», с использованием раствора сравнения (b). Содержание эстрагола рассчитывают методом нормализации.
Допустимые примеси (#2.8.2). Несырье-
вые части растения: плодоножки — не более 1,5 %. Сумма других допустимых примесей: не более 1,5 %.
Вода (2.2.13). Не более 80 мл/кг. Определение проводят из 20,0 г измельченного сырья
(710).
Общая зола (2.4.16). Не более 10,0 %.
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ.
Определение эфирного масла (2.8.12, ме-
тод А). 5,0 г свежеизмельченного сырья (1400) помещают в круглодонную колбу вместимостью 500 мл, прибавляют 200 мл воды Р в качестве жидкостидляперегонки.Вградуированнуютрубку помещают 0,50 мл ксилола Р и перегоняют со скоростью 2—3 мл/мин в течение 2 ч.
Определение содержания анетола и фен-
хона. Газовая хроматография (2.2.28).
Испытуемый раствор. Смесь эфирного масла и ксилола Р, полученную при определении эфирного масла, разводят ксилолом Р до объема 5,0 мл, ополаскивая прибор для определения эфирного масла этим же растворителем.
Раствор сравнения (а). 5 мг фенхона Р и 5 мг анетола Р растворяют в 0,5 мл ксилола Р.
Раствор сравнения (b). 5 мг эстрагола Р
растворяют в 0,5 мл ксилола Р. Условия хроматографирования:
––колонка капиллярной длиной от 30 м до 60 м и внутренним диаметром 0,3 мм, покрытая слоем макрогола 20 000 Р;
––детектор: пламенно-ионизационный;
––газ-носитель: азот для хроматографии Р;
––скорость газа-носителя: 0,40 мл/мин;
––деление потока: 1:200;
––объем вводимой пробы: 1 мкл;
––температура:
|
Время (мин) |
Температура (°С) |
|
|
|
Колонка |
0—4 |
60 |
|
4—26 |
60 → 170 |
|
26—41 |
170 |
|
|
|
Блок вво- |
|
220 |
да проб |
|
|
|
|
|
Детектор |
|
270 |
|
|
|
Порядок выхода пиков: фенхон, анетол.
Содержание анетола и фенхона рассчитывают методом нормализации.
ХРАНЕНИЕ
В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.
Фенхеля сладкого плоды
FoenicuIi dulcis fructus
FENNEL, SWEET
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Зрелые и высушенные плоды FoenicuIum vuIgare MiII. sp. vulgare var. dulce (Mill.) Thellung.
Содержат не менее 20 мл/кг эфирного масла в
436 |
Государственная фармакопея Республики Беларусь |
пересчете на безводное сырье. Эфирное масло содержит не менее 80,0 % анетола.
ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)
А. Внешние признаки (#2.8.3). Плод — вис-
лополодник, распадающийся на два полуплодика (мерикарпия). Плод продолговатой, почти цилиндрической формы, с округлым основанием и сужающейся верхушкой, с большим стилоподием. Длина плода обычно от 3 мм до 12 мм, ширина от 3 мм до 4 мм. Мерикарпии обычно свободные, голые, с пятью заметными продолговатыми ребрышками. На поперечном срезе при увеличении видны крупные эфиромасличные канальцы: четыре с наружной стороны и два — с внутренней. Цвет бледно-зеленый или бледно- желтовато-коричневый.
В. Микроскопия (#2.8.3). Исследуют из-
мельченное сырье (355). Цвет от сероватокоричневого до серовато-желтого. Видны: желтые фрагменты широких секреторных канальцев, обычно состоящих из многоугольных сектеторных клеток с желтовато-коричневыми стенками, и связанного с ними слоя тонкостенных поперечно-вытянутых клеток шириной от 2 мкм до 9 мкм, расположенных паркетообразно; сетчатая паренхима мезокарпа; многочисленные тяжи волокон из ребрышек, часто с узкими спиральными сосудами; многочисленные фрагменты эндосперма, содержащие алейроновые зерна и мелкие мелкорозеточные кристаллы оксалата кальция, а также тяжи волокон из карпофора.
С. Тонкослойная хроматография (2.2.27).
Испытуемый раствор. К 0,3 г свежеизмель-
ченного сырья (1400) прибавляют 5,0 мл метиленхлорида Р и встряхивают в течение 15 мин. Фильтруют и осторожно выпаривают фильтрат досуха на водяной бане при температуре 60°С. Остаток после выпаривания растворяют в 0,5 мл
толуола Р.
Раствор сравнения. 60 мкл анетола Р раст-
воряют в 5,0 мл гексана Р.
Пластинка: ТСХ пластинка со слоем сили-
кагеля GF254 Р.
Подвижная фаза: гексан Р — толуол Р
(20:80, об/об).
Наносимый объем пробы: по 10 мкл в виде полос длиной 20 мм и шириной 3 мм.
Фронт подвижной фазы: не менее 10 см от линии старта.
Высушивание: на воздухе.
Проявление А: просматривают в ультрафиолетовом свете при длине волны 254 нм.
Результаты А: на хроматограммах в центральной части обнаруживается зона поглощения, соответствующая анетолу.
Проявление В: пластинку опрыскивают кислотой серной Р и нагревают при температу-
ре 140°С в течение 5 мин. Просматривают при дневном свете.
Результаты В: на хроматограмме раствора сравнения в центральной части обнаруживается зона фиолетового цвета (анетол). На хроматограмме испытуемого раствора обнаруживается зона, соответствующая по расположению и цвету зоне анетола на хроматограмме раствора сравнения; в верхней трети — зона красноватокоричневого цвета (терпены).
ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)
Эстрагол и фенхон. Не более 10,0 % эстра-
гола и не более 7,5 % фенхона в эфирном масле, полученном в разделе «Количественное определение». Определение проводят как указано в разделе «Количественное определение. Определение содержания анетола» с использованием раствора сравнения (b). Содержание эстрагола и фенхона рассчитывают методом нормализации.
Допустимые примеси (#2.8.2). Несырье-
вые части растения: плодоножки — не более 1,5 %. Сумма других допустимых примесей: не более 1,5 %.
Вода (2.2.13). Не более 80 мл/кг. Определение проводят из 20,0 г измельченного сырья
(710).
Общая зола (2.4.16). Не более 10,0 %.
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ.
Определение эфирного масла (2.8.12, ме-
тод А). 10,0 г свежеизмельченного сырья (1400) помещают в круглодонную колбу вместимостью 500 мл, прибавляют 200 мл воды Р в качестве жидкостидляперегонки.Вградуированнуютрубку помещают 0,50 мл ксилола Р и перегоняют со скоростью 2—3 мл/мин в течение 2 ч.
Определение содержания анетола. Газо-
вая хроматография (2.2.28).
Испытуемый раствор. Смесь эфирного масла и ксилола Р, полученную при определении эфирного масла, разводят ксилолом Р до объема 5,0 мл, ополаскивая прибор для определения эфирного масла этим же растворителем.
Раствор сравнения (а). 5 мг анетола Р
растворяют в 0,5 мл ксилола Р.
Раствор сравнения (b). 5 мг эстрагола Р и 5 мг фенхона Р растворяют в 0,5 мл ксилола Р.
Условия хроматографирования:
––колонка капиллярная длиной от 30 м до 60 м и внутренним диаметром 0,3 мм, покрытая слоем макрогола 20 000 Р;
––детектор: пламенно-ионизационный;
––газ-носитель: азот для хроматографии Р;
––скорость газа-носителя: 0,40 мл/мин;
––деление потока: 1:200;
––объем вводимой пробы: 1 мкл;
––температура:
Фиалки трава |
437 |
|
Время |
Температура |
|
(мин) |
(°С) |
Колонка |
0—4 |
60 |
|
4—26 |
60 → 170 |
|
26—41 |
170 |
Блок ввода проб |
|
220 |
Детектор |
|
270 |
Содержание анетола рассчитывают методом нормализации.
ХРАНЕНИЕ
В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.
Фиалки трава
Violae herba
WILD PANSY (FLOWERING AERIAL PARTS)
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Собранная в фазу массового цветения и высушенная трава одноили двухлетнего травяни-
стого растения Viola tricolor L. и/или V. arvensis
Murr. Содержит не менее 1,5 % суммы флавоноидов в пересчете на виолантин в сухом сырье.
ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)
А. Внешние признаки (#2.8.3). Смесь оли-
ственных стеблей с цветками и плодами разной степени развития и отдельных стеблей, цельных или измельченных листьев, цветков, плодов. Стебли простые или ветвистые, слаборебристые, внутри полые, длиной до 25 см. Листья очередные, обычно черешковые, простые, с двумя крупными перисторассеченными или перистораздельными прилистниками; нижние — широкояйцевидные, верхние — продолговатые, по краю тупозубчатые или крупногородчатые, длиной до 6 см, шириной до 2 см. Цветки одиночные неправильные. Чашечки из пяти зеленых чашелистиков. У Viola arvensis чашелистики короче венчика, у Viola tricolor чашелистики длиннее венчика. Венчик из пяти неравных лепестков, нижний крупнее остальных, со шпорцем у основания. Плод — одногнездная, продолговато -яйцевидная коробочка, раскрывающаяся тремя створками. Семена овальные, гладкие. Цвет листьев зеленый, стеблей — зеленый или светло-зеленый, верхних лепестков — фиолетовый с 5—7 темными полосками, темносиний, бледно-желтый или бледно-фиолетовый, средних лепестков — синий или светло-желтый, нижних — желтый или светло-желтый; семян — светло-коричневый. Запах слабый.
В. Микроскопия (#2.8.3). При просматривании листа с поверхности у обоих видов фиалки
видны клетки эпидермиса, с нижней стороны более извилистые, чем с верхней; устьица располагаются с обеих сторон и окружены 3—4 клетками эпидермиса (аномоцитный тип). Простые волоски нежнобородавчатые, с толстыми стенками и заостренным концом, располагаются преимущественно на жилках и по краю листа. Железистые волоски с многоклеточной головкой на широкой многоклеточной ножке, встречаются только по краю листа с углублениями между зубцами и на концах зубцов. В мезофилле листа видны многочисленные крупные друзы оксалата кальция. Клетки эпидермиса лепестков имеют сосочковидные выросты. На эпидермисе средних и нижних лепестков (у основания) располагаются длинные одноклеточные тупоконечные волоски с тонкими стенками. На эпидермисе нижнего лепестка при входе в шпорец видны извилистые длинные одноклеточные бугорчатые волоски. В паренхиме нижней части лепестков встречаются друзы оксалата кальция. При измельчении сырья (355) видны: фрагменты эпидермиса листьев, клетки с извилистыми стенками, устьица аномоцитного типа; простые волоски со складчатой кутикулой, с толстыми стенками и заостренным концом; железистые волоски с многоклеточной головкой на широкой многоклеточной ножке. В мезофилле встречаются друзы оксалата кальция. Фрагменты клеток эпидермиса лепестков имеют сосочковидные выросты. На фрагментах эпидермиса средних и нижних лепестков (у основания) имеются длинные одноклеточные тупоконечные волоски с тонкими стенками. На фрагментах эпидермиса нижних лепестков при входе в шпорец видны извилистые длинные одноклеточные бугорчатые волоски. Встречаются фрагменты спиральных и сетчатых сосудов стебля.
С. Тонкослойная хроматография
(2.2.27).
Испытуемый раствор. К 2,0 г измельченно-
го сырья (355) прибавляют 10 мл спирта (70 %, об/об) Р. Нагревают в водяной бане при температуре 65°С в течение 5 мин при перемешивании. Охлаждают и фильтруют.
Раствор сравнения. 2,5 мг рутина Р, 2,5 мг гиперозида Р и 1,0 мг кофейной кислоты Р
растворяют в 10 мл метанола Р.
Пластинка: ТСХ пластинка со слоем силикагеля Р.
Подвижная фаза: кислота муравьиная безводная Р — кислота уксусная Р — вода Р — этилацетат Р (11:11:27:100, об/об/об/об).
Наносимый объем пробы: по 10 мкл в виде полос.
Фронт подвижной фазы: не менее 12 см от линии старта.
Высушивание: при температуре от 100°С до
105°С.
Проявление: горячую пластинку опрыскива-
ют раствором 10 г/л аминоэтилового эфира ди-
438 |
Государственная фармакопея Республики Беларусь |
|
|
фенилборной кислоты Р в метаноле Р и затем раствором 50 г/л макрогола 400 Р в метаноле Р. Через 30 мин пластинку просматривают в ультрафиолетовом свете при длине волны 365 нм.
Результаты: ниже приведена последовательность зон хроматограмм раствора сравнения и испытуемого раствора. На хроматограмме испытуемого раствора могут обнаруживаться и другие флуоресцирующие зоны.
Верх хроматографической пластинки
Кофейная кислота: |
|
флуоресцирующая |
|
зона от зеленовато- |
|
синего до светло- |
|
синего цвета |
|
|
Флуоресцирующая |
|
зона синего цвета |
———— |
———— |
Гиперозид: флуо- |
|
ресцирующая |
|
зона желтовато- |
|
коричневого цвета |
|
|
Флуоресцирующая |
|
зона желтовато- |
|
зеленого цвета |
———— |
———— |
Рутин: флуоресциру- |
Интенсивная |
ющая зона желтовато- |
флуоресцирующая |
коричневого цвета |
зона желтовато- |
|
коричневого цвета |
|
(рутин) |
|
Флуоресцирующая |
|
зона желтовато- |
|
зеленого цвета |
|
Флуоресцирующая |
|
зона желтовато- |
|
зеленого цвета |
|
Флуоресцирующая |
|
зона желтовато- |
|
зеленого цвета |
Раствор сравнения |
Испытуемый раствор |
ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)
Допустимые примеси (#2.8.2). Несырье-
вые части растения: пожелтевшие листья и стебли — не более 7 %; другие части растения (плоды, створки плодов, корни, в том числе отделенные при анализе) — не более 3 %. Органические примеси: не более 3 %. Минеральные примеси: не более 1 %.
Коэффициент набухания (2.8.4). Не менее 9. Исследуют измельченное сырье (355).
Потерявмассепривысушивании(2.2.32).
Не более 14,0 %. 2,000 г измельченного сырья (2000) сушат при температуре от 100°С до
105°С.
Общая зола (2.4.16). Не более 15,0 %.
Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 3,0 %.
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
0,300 г измельченного сырья (250) помещают в колбу вместимостью 200 мл, прибавляют 40 мл спирта (60 %, об/об) Р, нагревают в водяной бане при температуре 60°С в течение 10 мин при перемешивании. Охлаждают и процеживают через ватный тампон в мерную колбу вместимостью 100 мл. Ватный тампон с остатками сырья переносят обратно в колбу вместимостью 200 мл, прибавляют 40 мл спирта (60 %, об/об) Р и нагревают в водяной бане при температуре 60°С в течение 10 мин при перемешивании. Охлаждают и процеживают в ту же мерную колбу вместимостью 100 мл. Ополаскивают колбу вместимостью 200 мл спиртом (60 %, об/об) Р, процеживают и переносят в ту же мерную колбу вместимостью 100 мл. Доводят спиртом (60 %, об/об) Р до объема 100,0 мл и фильтруют (раствор А).
Испытуемый раствор. 5,0 мл раствора А помещают в круглодонную колбу и выпаривают досуха в вакууме. Остаток после выпаривания растворяют в 8 мл смеси из метанола Р и кислоты уксусной ледяной Р (10:100, об/об) и
переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл. Ополаскивают круглодонную колбу 3 мл смеси из метанола Р и кислоты уксусной ледяной Р
(10:100, об/об) и переносят в ту же мерную колбу вместимостью 25 мл. Прибавляют 10,0 мл раствора, содержащего 25,0 г/л кислоты борной Р и
20,0 г/л кислоты щавелевой Р в кислоте муравьиной безводной Р и доводят кислотой уксусной безводной Р до объема 25,0 мл.
Компенсационный раствор. 5,0 мл раствора А помещают в круглодонную колбу и выпаривают досуха в вакууме. Остаток после выпаривания растворяют в 8 мл смеси из метанола Р и кислоты уксусной ледяной Р (10:100, об/об) и
переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл. Ополаскивают круглодонную колбу 3 мл смеси из метанола Р и кислоты уксусной ледяной Р
(10:100, об/об) и переносят в ту же мерную колбу вместимостью 25 мл. Прибавляют 10,0 мл мура-
вьиной кислоты безводной Р и доводят кислотой уксусной безводной Р до объема 25,0 мл.
Через 30 мин измеряют оптическую плотность (2.2.25) испытуемого раствора при 405 нм.
Содержание суммы флавоноидов в пересчете на виолантин в процентах рассчитывают по формуле:
А×500 , m×400
где:
400 — удельный показатель поглощения виолантина;
Фукус |
439 |
|
|
А — оптическая плотность испытуемого раствора;
m — масса навески испытуемого сырья, г.
ХРАНЕНИЕ
В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.
Фукус
Fucus vel Ascophyllum
KELP
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Куски или порошок высушенных слоевищ
FucusvesiculosusL.,F.serratusL.илиAscophyllum nodosum Le Jolis. Содержит не менее 0,03 % и не более 0,2 % общего йода (А.м. 126,9) в пересчете на сухое сырье.
ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)
A.Внешние признаки (#2.8.3). Куски слое-
вищ черновато-коричневого или зеленоватокоричневого цвета, иногда покрыты беловатым налетом. Слоевища лентовидные, дихотомически ветвящиеся, с четкими центральными жилками (псевдожилками). F. vesiculosus часто имеют листовидные пластинки с гладкими краями и случайным образом расположенными яйцевидными воздушными пузырьками. На концах некоторых ветвей, немного расширенных и имеющих яйцевидную форму, имеются многочисленные репродуктивные органы. F. serratus имеют листовидные пластинки с зазубренным краем, воздушных пузырьков на них нет, концы пластинок
срепродуктивными органами менее раздуты. Слоевища A. nodosum ветвятся неравномерно, без псевдожилок. На них встречаются одиночные воздушные пузырьки. Серповидные репродуктивные органы расположены на концах небольших веточек. Запах неприятный, морской. Вкус соленый, слизистый.
B.Микроскопия(#2.8.3).Исследуютизмель- ченноесырье(355).Цветзеленовато-коричневый. Видны: фрагменты тканей с поверхности с правильными изодиаметрическими клетками с коричневым содержимым, а также фрагменты глубоко расположенных тканей с неокрашенными удлиненными клетками, расположенными в виде длинных нитей с большим количеством слизи между ними. Иногда видны толстостенные клетки, расположенные рядами или плотно упакованными группами возле псевдожилок.
С. К 1 г измельченного сырья (355) прибавляют 20 мл 2 % (об/об) раствора кислоты хлористоводородной Р. Интенсивно встряхивают
ифильтруют. Остаток промывают 10 мл воды Р
ифильтруют. К остатку прибавляют 10 мл раствора 200 г/л натрия карбоната Р. Встряхивают
и центрифугируют. Собирают надосадочную жидкость,доводяткислотойсернойРдорН1,5.Медленно образуется белый хлопьевидный осадок.
ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)
Допустимые примеси (#2.8.2). Сумма до-
пустимых примесей: не более 2 % (м/м).
Мышьяк (2.4.27). Не более 0,009 % (90 ppm).
Кадмий (2.4.27). Не более 0,0004 % (4 ppm).
Свинец (2.4.27). Не более 0,0005 % (5 ppm). Ртуть (2.4.27). Не более 0,00001 %
(0,1 ppm).
Коэффициент набухания (2.8.4). Не менее 6. Потерявмассепривысушивании(2.2.32).
Не более 15,0 %. 1,000 г испытуемого сырья сушат при температуре от 100°С до 105°С в течение 2 ч.
Общая зола (2.4.16). Не более 24 %.
Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте (2.8.1). Не более 3,0 %.
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
К 1,000 г измельченного сырья (355) прибав-
ляют5млводыРи5гкалиягидроксидаРввысо-
ком кварцевом тигле. Перемешивают магниевой проволокой и нагревают на водяной бане. Прибавляют 1 г калия карбоната Р. Перемешивают и, вместе с магниевой проволокой, высушивают на водяной бане, а затем над открытым пламенем. Сжигают, постепенно увеличивая температуру, но не более чем до 600°С. Охлаждают. Прибавляют 20 мл воды Р и осторожно нагревают до кипения, перемешивая стеклянной палочкой. Фильтруют горячую смесь через нескладчатый фильтр в коническую колбу. Промывают осадок на фильтре 4 раза горячей водой Р порциями по 20 мл. Фильтр и тигель ополаскивают 50 мл горячей воды Р. Растворы объединяют и охлаждают.
Нейтрализуют кислотой серной разведенной Р в присутствии раствора метилового оранжевого Р. Прибавляют 3 мл кислоты серной разведенной Р и 1 мл бромной воды Р. Раствор жел-
теет. Через 5 минут прибавляют 0,6 мл раствора 50 г/л фенола Р. Раствор становится прозрач-
ным. Подкисляют 5 мл кислоты фосфорной Р и
прибавляют 0,2 г калия йодида Р. Оставляют на 5 мин в защищенном от света месте. Прибавля-
ют 1 мл раствора крахмала Р и титруют 0,01 М раствором натрия тиосульфата.
1 мл 0,01 М раствора натрия тиосульфа-
та соответствует 0,2115 мг йода.
ХРАНЕНИЕ
В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15°С до 25°С.
МАРКИРОВКА Указывают виды присутствующих водорослей.
440 |
Государственная фармакопея Республики Беларусь |
Хвоща полевого трава
Equiseti arvensis herba
EQUISETUM STEM
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Собранные в течение лета и высушенные надземные вегетативные побеги дикорастущего многолетнего травянистого растения Equisetum arvense L. Содержит не менее 0,3 % суммы флавоноидов в пересчете на изокверцитрозид (С21Н20О12; М.м. 464,4) в сухом сырье.
ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)
А. Внешние признаки (#2.8.3). Цельные и частично измельченные стебли длиной до 30 см, жесткие,членистые,бороздчатые,с6—18продоль- нымиребрышками,почтиотоснованиямутовчатоветвистые, с полыми междоузлиями и утолщениями в узлах. Ветви неразветвленные, членистые, направленные косо вверх, четырех-пятигранные, без полости. Влагалища стеблей цилиндрические, длиной 4—8 мм, с треугольно-ланцетными, темно-коричневыми, белоокаймленными по краю зубцами, спаянными по 2—3. Влагалища веточек зеленыес4—5коричневатымидлиннооттянутыми зубчиками. При обрывании ветвей на стебле удерживаются только первые короткие членики. Цвет серовато-зеленый. Запах слабый.
В. Микроскопия (#2.8.3). При просматривании стебля и ветвей с поверхности видны клетки эпидермиса, на ребрах сильно удлиненные с утолщенными прямыми или слегка извилистыми пористыми стенками, без устьиц; в бороздках
инередуцированных листьях — слегка удлиненные с более извилистыми пористыми стенками, с устьицами. У обоих типов эпидермиса на стенках концов (стыков) некоторых клеток заметны характерные выросты, с поверхности имеющие вид спаренных кружочков, при рассмотрении в продольном положении — закругленные или зубчатые с ясно выраженной перегородкой; некоторые клетки имеют сосочковидные выросты. Устьица слегка погруженные, с характерной лучистой складчатостью кутикулы, расположены обычно в три ряда, реже в четыре, два и один. На поперечном разрезе стебля под эпидермисом видны участки колленхимы как в ребрах, так
ив бороздках. В паренхиме коры против борозд расположены большие воздухоносные полости. За слабозаметной эндодермой против ребер расположены в один ряд проводящие пучки, также несущие по одной небольшой полости. Центр междоузлий полый. На срезе ветвей имеются четыре крупных ребра, центральной полости нет.
С. Просматривают хроматограмму, полученную в испытании «Другие виды Equisetum
иих гибриды».
Результаты: ниже приведена последовательность зон хроматограмм раствора сравне-
ния и испытуемого раствора. На хроматограмме испытуемого раствора могут обнаруживаться и другие флуоресцирующие зоны.
Верх хроматографической пластинки
|
Две флуоресцирую- |
|
щие зоны оранжевого |
|
цвета |
Кофейная кислота: |
|
флуоресцирующая |
|
зона зеленовато- |
|
синего цвета |
|
|
Две флуоресцирую- |
|
щие зоны зеленовато- |
|
синего цвета |
———— |
———— |
|
Флуоресцирующая |
|
зона оранжевого цвета |
Гиперозид: флуорес- |
|
цирующая зона оран- |
|
жевого цвета |
|
|
Две флуоресцирую- |
|
щие зоны зеленовато- |
|
синего цвета |
———— |
———— |
Рутин: флуоресци- |
|
рующая зона оранже- |
|
вого цвета |
|
Раствор сравнения |
Испытуемый раствор |
ИСПЫТАНИЯ (ЧИСЛОВЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ)
Другие виды Equisetum и их гибриды.
Тонкослойная хроматография (2.2.27).
Испытуемый раствор. К 1,0 г измельчен-
ного сырья (355) прибавляют 10 мл метанола Р и нагревают на водяной бане при температуре 60°С в течение 10 мин, периодически встряхивая. Охлаждают и фильтруют.
Раствор сравнения. 1,0 мг кофейной кислоты Р, 2,5 мг гиперозида Р и 2,5 мг рутина Р
растворяют в 10 мл метанола Р.
Пластинка: ТСХ пластинка со слоем силикагеля Р.
Подвижная фаза: кислота муравьиная безводная Р — кислота уксусная ледяная Р — вода Р — этилацетат Р (7,5:7,5:18:67, об/об/об/об).
Наносимый объем пробы: по 10 мкл в виде полос.
Фронт подвижной фазы: не менее 10 см от линии старта.
Высушивание: при температуре от 100°С до
105°С.
Проявление: горячую пластинку опрыскива-
ют раствором 10 г/л дифенилборной кислоты аминоэтилового эфира Р в метаноле Р и затем раствором 50 г/л макрогола 400 Р в метаноле Р. Пластинку высушивают на воздухе в течение