- •Одеський державний медичний університет
- •Модуль 1 загальна гістологія орієнтовна структура залікового кредиту – модуля 1
- •Змістовний модуль 1 основи цитології і порівняльної ембріології
- •Тема 1: мікроскоп. Мікроскопічні прилади.
- •В. Флуоресцентний мікроскоп
- •А. Електронний мікроскоп
- •С. Фазово-контрастний мікроскоп
- •В. Темнопольовий мікроскоп с. Ультрафіолетовий мікроскоп. Д. Поляризаційний мікроскоп
- •С. Фазово-контрастна мікроскопія
- •Тема 2: гістологічна техніка
- •I прижиттєві методи
- •II посмертні методи
- •II Посмертні
- •5. Авторадіографія.
- •Тестові завдання м1 см1 т2
- •Тема 3: цитологія. Поверхневий комплекс клітини.
- •Тема 4: цитологія. Цитоплазма, її структура і функції.
- •Тема 5. Цитологія. Ядро. Клітинний цикл. Ділення клітин. Зростання, дозрівання, старіння і смерть клітин.
- •Тема 6. Порівняльна ембріологія. Ранні етапи ембріонального розвитку хребетних.
- •Тема 7: порівняльна ембріологія. Розвиток, будова і функції провізирних органів хребетних.
- •Тема 8: діагностика мікропрепаратів 1
- •Тема 9: поняття про тканини. Епітеліальна тканина. Одношаровий
- •В. Трансепітеліального транспорту
- •С. Каємчатого епітелію
- •С. Мікроворсинчаті
- •Тема 10: багатошаровий і залозистий епітелій
- •Тема 11: тканини внутрішнього середовища. Кров. Еритроцити. Тромбоцити.
- •Тема 12: кров. Гранулярні лейкоцити.
- •Тема 13: кров. Агранулярні лейкоцити. Лімфа.
- •Тема 14: ембріональний і постембріональний гемоцитопоез
- •У Гранулоцитарного
- •Тема 15: власне сполучні тканини. Клітини
- •Тема 16: міжклітинна речовина сполучної тканини. Щільна сполучна тканина. Сполучна тканина Із спеціальними властивостями
- •У. У склоподібному телі
- •Тема 17: скелетні тканини. Хрящова тканина
- •Тема 18: кісткова тканина. Будова.
- •Тема 19: ембріональний остеогістоогенез. Вікові особливості, зростання і перебудова кісток
- •Тема 20: м'язові тканини. Скелетна м'язова тканина
- •Д. Гладкої
- •Тема 21: м'язові тканини. Серцева. Гладка
- •Тема 22: нервова тканина. Нейроцити. Нейроглія
- •Тема23: нервова тканина. Нервові волокна і закінчення
- •С. Нейрофібрилли
- •D. До дегенерируючого
- •Тема 24. Діагностика мікропрепаратів 2.
II Посмертні
Посмертні барвники діляться на 2 види: 1. Загальні 2. Спеціальні
1. Загальні барвники у свою чергу ділять на а) ядерні (основні) б) цитоплазматичні (кислі)
Загальні ядерні барвники фарбують ядра будь-яких клітин в свій основний колір. Наприклад: 1. Гематоксилін – забарвлює ядра у фіолетово-чорнильний колір. 2. Азур – фарбує ядра в синій колір. Сафранін – забарвлює ядра в червоний колір.
Оскільки хімічна природа ядра кисла (ДНК, РНК), ядерний барвник має властивості лугу. У зв'язку з цим, здатність якої-небудь структури забарвлюватися основними барвниками називається базофілія (basis – основа (луг) , philia - любов), а сама структура – базофільною. Висока концентрація РНК в цитоплазмі може зумовити її базофілію.
Загальні барвники цитоплазми фарбують цитоплазму будь-яких клітин в свій основний колір.
1. Еозин – фарбує цитоплазму в оранжево-рожевий колір.
2. Водна синька – в блакитний колір
3. Фуксин кислий – інтенсивно-рожевий колір
Більшість барвників цитоплазми є кислими, оскільки гіалоплазма диференційованих клітин насичена основними білками. Властивість якої-небудь структури забарвлюватися кислими барвниками називається ацидофілія або оксифілия (acidicum – кислота, philia - любов), а сама структура – ацидофільною.
2. Спеціальні барвники зв'язуються вибірково з певною клітинною або позаклітинною структурою, дозволяючи відрізнитки її або виділити від схожих по будові структур. Найчастіше спеціальні барвники застосовують в тих випадках, коли досліджувана структура загальними барвниками не забарвлюється. Наприклад, включення жиру і включення слизу при загальному забарвленні залишаються безбарвними. Використання спеціального барвника муцикарміну дозволяє офарбувати слиз в червоний колір, а осмієва кислота забарвить жир в чорний. Інші приклади:
Судан III – жир – оранжево-червоний колір
Пікринова кислота – м'язова тканина – жовтий колір
Кармін Беста – глікоген – червоний колір
Резорцин – фуксин - еластичні волокна – синьо-фіолетовий колір
Орсеїн – еластичні волокна – червоно-бурий колір
Спеціальні методи обробки тканин.
1. Декальцинація. Застосовується по відношенню до щільних тканин (кістка, зуб). Мета – витягання солей кальцію. Внаслідок цього об'єкт стає м'яким і придатним до різання. Декальцинація завжди проводиться після фіксації. Об'єкт поміщають в 2-10% розчин азотної кислоти на декілька днів.
2. Імпрегнація. Метод відкладення солей важких металів на яких-небудь структурах з метою їх виявлення. Застосовують солі срібла, золото. Цей метод застосовується для виявлення нервових волокон, аргірофиіьних волокон (ретикулярних, преколлагенових), клітинних меж, комплексу Гольджі.
3. Гістохімічні методи дослідження проводять з метою виявлення зміст і локалізації хімічних речовин, що входять до складу тканин, постановкою хімічної реакції безпосередньо на зрізі тканини. В результаті реакції взаємодії шуканих груп або елементів досліджуваної речовини з реактивом виходить специфічне забарвлення. Користуючись спеціальними реактивами, можна виявити амінокислотний склад білків, виявити наявність нуклеїнових кислот (ДНК, РНК), визначити наявність мікроелементів, ферментів і т.д. Наприклад: для виявлення тривалентного заліза тканину обробляють свіжо приготованою рівною сумішшю 2% фероціаніду калія (жовта кров'яна сіль) і 2% соляною кислотою.
Ділянки, в яких локалізується тривалентне залізо, забарвлюються в синій колір (берлінська блакить).
Глікозаміноглікани (ГАГ) дають реакцію метахромазії – зміна основного кольору барвника при взаємодії його з шуканою речовиною. При фарбуванні толуідиновим синім, тионіном (барвники синього кольору) ГАГ дають вишнево-червоне забарвлення. ДНК виявляється реакцією Фельгена, РНК – реакцією Браше, вуглеводні з'єднання – ШИК-РЕАКЦИЕЮ і т.д.
Цитохімія - поєднання гістохімічних методів з методом електронної мікроскопії – дозволяє вивчати локалізацію хімічних речовин на субклітинному і молекулярному рівнях.
4. Імуноцитохімічний (імунофлюоресцентний) метод – заснований на реакції антиген-антитіло. Кожна клітина організму має специфічний антигенний склад. Антитіла володіють високою специфічністю відносно антигенів, що дозволяє використовувати їх для виявлення специфічних білків. Антитіла забарвлюються флюоресцируючими барвниками і після зв’язування їх з певною структурою, препарат вивчають в люмінесцентному мікроскопі.
Антитіла можна використовувати для вивчення антигенних структур на ультрамікроскопічному рівні. Для цього антитіла мітять електронний-щільними частинками, наприклад колоїдним золотом.