- •Львівський національний медичний університет
- •Модуль 2. Загальні закономірності метаболізму Тематичний план практичних занять з модуля 2
- •Завдання для самостійної роботи студентів (срс)
- •Загальні правила техніки безпеки при роботі студентів у навчальній хімічній лабораторії
- •Модуль 2. Загальні закономірності метаболізму.
- •Теоретичні питання
- •Наукові напрями роботи кафедри біохімії
- •Характеристика фізико-хімічних методів дослідження
- •Загальні принципи клініко-біохімічної оцінки результатів досліджень
- •Помилки, що трапляються під час проведення лабораторних досліджень
- •Практична робота Визначення оптичної густини забарвлених розчинів у залежності від їх концентрації.
- •Контроль виконання лабораторної роботи
- •Приклади тестів „Крок-1”
- •Індивідуальна самостійна робота студентів
- •Література
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Дослід 2. Дослідження термолабільності амілази слини.
- •Контроль виконання лабораторної роботи
- •Приклади тестів „Крок-1”
- •Індивідуальна самостійна робота студентів
- •Література Основна:
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •1/16 Мл сечі розщеплює 2 мл 0,1 %-го розчину крохмалю;
- •1Мл сечі розщеплює - х мл 0,1 %-го розчину крохмалю,
- •Контроль виконання лабораторної роботи
- •Приклади тестів “Крок-1”
- •Література Основна:
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Контроль виконання лабораторної роботи
- •Приклади тестів “Крок-1”
- •А. Амілази, ліпази, фосфатази
- •Індивідуальна самостійна робота студентів
- •Література Основна:
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Контроль виконання лабораторної роботи
- •Приклади тестів “Крок-1”
- •Індивідуальна самостійна робота студентів
- •Література Основна:
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Контроль виконання лабораторної роботи
- •Приклади тестів “Крок-1”
- •А. Ацетил-КоА
- •Література Основна:
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Контроль виконання лабораторної роботи
- •1. Дослідження дії якого з перерахованих ферментів базується на знебарвленні бензидину при його окисненні?
- •3. За яких умов відбувається забарвлення пірокатехіну при окисненні його молекулярним киснем в присутності фенолоксидази:
- •Приклади тестів “Крок-1”
- •Індивідуальна самостійна робота студентів.
- •Література
- •Теоретичні питання
- •Практична робота Дослід 1. Вивчення окисного фосфорилування в мітохондріях та дії роз’єднувача – 2,4-динітрофенолу на цей процес.
- •Контроль виконання лабораторної роботи
- •Приклади тестів “Крок-1”
- •2. Універсальність хеміоосмотичної теорії для живих систем. Література
- •Теоретичні питання
- •Приклади тестового контролю знань.
- •А. Аконітатгідратази
- •Приклади тестів та ситуаційних задач по засвоєнню практичних навичок
- •Література Основна:
- •Модуль 3. Метаболізм Вуглеводів, ліпідів, амінокислот та його регуляція Тематичний план практичних занять з модуля 3
- •Завдання для самостійної роботи студентів (срс)
- •Змістовий модуль 9. Метаболізм вуглеводів та його регуляція
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Контроль виконання лабораторної роботи
- •Приклади тестів “Крок -1”
- •Література
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Контроль виконання лабораторної роботи
- •Приклади тестів “Крок-1”
- •Індивідуальна самостійна робота студентів
- •Література
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Контроль виконання лабораторної роботи
- •Приклади тестів “Крок-1”
- •Індивідуальна самостійна робота студентів
- •Література
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Контроль виконання лабораторної роботи
- •Приклади тестів “Крок-1”
- •Індивідуальна самостійна робота студентів
- •Література
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Контроль виконання лабораторної роботи
- •Приклади тестів „Крок-1”
- •Індивідуальна самостійна робота студентів
- •Література
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •2. Реакція з феруму хлоридом (III) (проба Герхарда).
- •Контроль виконання лабораторної роботи
- •Приклади тестів „Крок-1”
- •Індивідуальна самостійна робота студентів
- •Література
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Контроль виконання лабораторної роботи
- •Приклади тестів „Крок-1”
- •Індивідуальна самостійна робота студентів
- •Література
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Контроль виконання лабораторної роботи
- •Приклади тестів „Крок-1”
- •Індивідуальна самостійна робота студентів
- •Література Основна:
- •Тема № 9. Дослідження процесів детоксикації аміаку та біосинтезу сечовини.
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Контроль виконання лабораторної роботи
- •Приклади тестів „Крок-1”
- •Індивідуальна самостійна робота студентів
- •Література Основна:
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Контроль виконання лабораторної роботи
- •Приклади тестів „Крок-1”
- •Самостійна індивідуальна робота студентів
- •Література
- •Теоретичні питання
- •Приклади тестового контролю знань „Крок 1”
- •Приклади тестів та ситуаційних задач по засвоєнню практичних навичок
- •Література
Теоретичні питання
Ферменти: визначення; властивості ферментів як біологічних каталізаторів реакцій обміну речовин.
Фізико-хімічні властивості білків-ферментів: електрохімічні (поверхневий заряд молекули) властивості, розчинність, термодинамічна стабільність білкових молекул-ферментів, осадження, денатурація, взаємодія з лігандами та її функціональне значення.
Прості та складні білки-ферменти. Кофактори, коферменти та простетичні групи складних ферментів. Навести приклади. Роль іонів металів у функціонуванні ферментів.
Будова ферментів: активний, регуляторний (алостеричний) центри, їх значення.
Рівні структурної організації ферментів. Мультиферментні комплекси, ферментативні ансамблі, поліфункціональні ферменти, їх переваги.
Номенклатура, класифікація, шифр ферментів. Типи реакцій, що каталізують окремі класи ферментів.
Властивості ферментів:
залежність активності ферментів від рН середовища (пояснити і зобразити графічно);
залежність активності ферментів від температури (пояcнити і зобразити графічно).
Специфічність ферментів. Види специфічності (абсолютна, відносна, стереоспецифічність). Навести приклади.
Внутрішньоклітинна локалізація ферментів. Навести приклади.
Тканинна (органна) специфічність ферментів. Навести приклади.
Методи визначення ферментів у біологічних об’єктах (кров, слина, сеча, окремі тканини).
Практична робота
Дослід 1. Виявлення амілази в слині (реакція з йодом).
Принцип методу. Амілаза відноситься до класу гідролаз – ферментів, що каталізують розрив хімічних зв’язків з приєднанням молекули води. Амілаза слини каталізує гідроліз крохмалю (розрив глікозидних зв’язків) через стадію утворення декстринів до дисахариду мальтози, про що свідчить реакція на крохмаль з йодом та реакція Тромера на мальтозу. Крохмаль утворює з йодом синє забарвлення і не дає забарвлення в реакції Тромера, оскільки не містить вільних альдегідних груп. Мальтоза містить вільну альдегідну групу, а тому її можна виявити за допомогою проби Тромера.
Матеріальне забезпечення: 0,5 % розчин крохмалю, 0,1 % І2 в КІ, 10 % розчин NaOH, 5 % розчин CuSO4, дистильована вода, газовий пальник, пробірки, піпетки, штатив.
Хід роботи. Для одержання розведеної слини ротову порожнину злегка прополіскують водою, набирають нову порцію дистильованої води і прополіскують нею рот протягом 1-2 хв. Зібрану в пробірку рідину використовують для аналізу.
Щоб переконатись у тому, що крохмаль з йодом дає синє забарвлення, в пробірку вносять 10 крапель розчину крохмалю та додають 2 краплі розчину I2 в KI. Спостерігають позитивну реакцію.
У штатив ставлять 10 пробірок і наливають у кожну по 2 мл дистильованої води та додають по одній краплі розчину І2 в KI.
В окрему пробірку наливають 5 мл 0,5 % розчину крохмалю, додають 1 мл розведеної слини, вміст пробірки перемішують і спостерігають опалесценцію. З цієї пробірки кожних 60 секунд відбирають по 0,5 мл рідини і вносять по черзі в пробірки № 1, 2, 3 і т.д., що були заготовлені з розчином І2 в KI. Якщо після першого перенесення в пробірці спостерігають фіолетове або червоне забарвлення, то інтервал між перенесенням скорочують до 30 секунд.
Якщо чергова проба не змінює жовтого кольору розчину йоду, гідроліз крохмалю вважається закінченим. Відзначають час. Спостерігають зникнення опалесценції розчину в процесі гідролізу. Через 10 хв проводять пробу Тромера.
Для проведення проби Тромера до вмісту пробірки з реактивною сумішшю додають рівний об’єм 10 % розчину NaOH і 5-7 крапель 5 % розчину CuSO4. Вміст пробірки перемішують до зникнення помутніння. Верхню частину пробірки обережно нагрівають на відкритому вогні до кипіння, реакція Тромера повинна бути позитивною, що відзначають за появою жовто-червоного осаду.
Пояснити отриманий результат. Зробити висновок.