- •Медицинская микробиология, её задачи, связь с другими медицинскими дисциплинами.
- •Вопросы врачебной этики и деонтологии в медицинской микробиологии.
- •Размеры и основные формы бактерий.
- •Окраска по Граму. Механизм окраски. Примеры грамположительных и грамотрицательных бактерий.
- •Окраска по Цилю-Нильсену. Применение, механизм окраски.
- •Строение бактериальной клетки.
- •Спорообразование у бактерий и его значение.
- •Химический состав бактериальной клетки, его особенности.
- •Питание бактерий. Механизмы, типы питания.
- •Классификация питательных сред по назначению.
- •Классификация бактерий по типу дыхания.
- •Способы создания условий для культивирования анаэробных микроорганизмов.
- •Рост и размножение бактерий. Характеристика роста бактериальной популяции на плотных и жидких питательных средах.
- •Влияние физических факторов на микроорганизмы.
- •Влияние химических факюровнамикроорганизмы. Дезинфекция.
- •Методы стерилизации, аппаратура.
- •Методы и критерии оценки чистоты воздуха в медицинских учреждениях.
- •Нормальная микрофлора желудочно-кишечного тракта организма человека.
- •Микрофлора женской половой сферы, ее возрастная динамика, особенности у девочек. Значение микрофлоры женской половой сферы для становления микрофлоры новорожденного.
- •Открытие вирусов. Критерии царства вирусов. Строение и химический состав вирионов.
- •Типы вирусной инфекции на уровне клетки. Фазы взаимодействия вируса с клеткой при продуктивной инфекции.
- •Интегративная вирусная инфекция. Онкогенные вирусы, классификация, вызываемые заболевания. Вирусо-генетическая теория онкогенеза ла.Зильбера.
- •Методы индикации и идентификации вирусов.
- •Вирусы бактерий (бактериофаги). Фазы взаимодействия фага с бактериальной клеткой. Умеренные и вирулентные бактериофаги.
- •Организация генетического материала бактериальной клетки. Факторы вне-хромосомной наследственности (плазмиды, инсерционные элементы, транспо-зоны).
- •Виды генетической изменчивости. Мутации и генетические рекомбинации.
- •Трансформация у бактерий.
- •Трансдукция и фаговая (лизогенная) конверсия.
- •Конъюгация у бактерий.
- •Ненаследственная изменчивость (модификации). Диссоциация бактерий.
- •Практическое значение генетики и изменчивости микроорганизмов. Использование генной инженерии в медицине.
- •Антибиотики. Механизмы антимикробного действия. Методы определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам.
-
Вирусы бактерий (бактериофаги). Фазы взаимодействия фага с бактериальной клеткой. Умеренные и вирулентные бактериофаги.
Бактериофаги - вирусы бактерий. Бактериофагия - процесс взаимодействия фагов с бактериями, нередко заканчивающийся разрушением, лизисом бактерий.
Бактериофаги были открыты в 1916 г. канадским ученым Ф.Д.Эррелем. Исследователь выделил из испражнений больных дизентерией фильтрующийся агент, способный разрушать, лизировать дизентерийные бактерии. Последующие наблюдения показали, что бактериофаги встречаются повсеместно, где есть бактерии: в почве, сточных водах, кишечном тракте человека и животных, гнойном отделяемом и других субстратах.
Структура сложноустроенного бактериофага
- головка, в которой содержится нуклеиновая кислота;
- воротничковая часть;
- отросток, представляющий собой полый стержень, сверху покрытый сократительным чехлом. На конце отростка находятся 6-ти зубая пластинка для адсорбции фага на бактериальной клетке и нити прикрепления.
Оболочечные структуры фага имеют белковую природу.
У слоожноустроенного бактериофага бинарный (двойной) тип симметрии, т.к. головка имеет кубический тип симметрии, а отросток - спиральный.
Кроме сложноустроенного, существуют и другие морфологические формы бактериофагов, содержащие либо ДНК, либо РНК и объединенные А.С.Тихоненко в 5 основных групп
1. Фаги I типа - нитевидной формы. Имеют спиральный тип симметрии, ДНК-содержащие.
2. Фаги II типа - имеют головку и рудимент отростка. Кубический тип симметрии. Большинство из них - РНК-содержащие.
3. Фаги Ш типа - имеют головку с коротким отростком. Бинарный тип
симметрии. ДНК-содержащие.
4. Фаги IV типа - имеют головку и длинный несокращающийся отросток. Бинарный тип симметрии, ДНК-содержащие.
5. Фаги V типа - имеют головку и длинный сокращающийся отросток. Бинарный тип симметрии. ДНК-содержащие.
Вирулентные и умеренные бактериофаги. Фазы взаимодействия вирулентного бактериофага с клеткой. Практическое применение бактериофагии.
В зависимости от характера взаимодействия с бактериальной клеткой, различают вирулентные и умеренные бактериофаги.
Вирулентные фаги способны вызывать острую продуктивную инфекцию на уровне клетки. Умеренные фаги чаще вызывают ннтегратианую вирусную инфекцию на уровне клетки, реже - продуктивную.
Фазы взаимодействия сложноустроенного вирулентного бактериофага с клеткой:
L Адсорбция (отростковой частью фага) на клеточной стенке бактерий. В эту фазу рецепторы 6-ти зубой пластины и нитей прикрепления специфически взаимодействуют с определенными рецепторами клеточной стенки бактерий. Некоторые фаги в качестве рецепторов используют F-пили. На бактериях, лишенных клеточной стенки (L-формы, мико плазмы), бактериофаги не адсорбируются.
2. Проникновение нуклеиновой кислоты фага в клетку путем впрыскивания, при этом оболочка фага остается на поверхности бактериальной клетки.
3. Эклипсная фаза. Синтез фаговых частиц, подобно синтезу вирусов в эукариотической клетке. Происходит репликация нуклеиновой кислоты бактериофага с образованием множественных копий, а на рибосомах бактериальной клетки - синтез фаговых белков. В результате образуется вегетативный фаг, т.е.
неоформленный фаговый материал (белковые оболочки и нуклеиновые кислоты). 4. Композиция фаговых частиц. Происходит сборка белковых оболочек и нуклеиновых кислот и формируются зрелые бактериофаги.
5. Выход фага из бактериальной клетки путем лизиса клетки изнутри. Он осуществляется за счет свободного лизоцима, выделяемого бактериофагом, что приводит к гибели бактерий.
Таким образом, сложноустроенный бактериофаг отличается от других вирусов по следующим признакам:
а) наличие бинарного типа симметрии;
б) наличие подвижного сократительного чехла на отростке;
в) внедрение нуклеиновой кислоты бактериофага в клетку путем впрыскивания (инъекцонный механизм).
Репродукция вирулентного фага в популяции бактерий, выращенных на
жидкой питательной среде (МПБ), сопровождается их лизисом и просветлением среды В популяции чувствительных бактерий, выращенных сплошным газоном на плотной питательной среде (МПА), фаги образуют зоны очагового лизиса (рис.5), которые называются негативными колониями или стерильными бляшками.
-
Практическое использование бактериофагов в микробиологии и медицине.Практическое применение бактериофагов.
1. Для диагностики инфекционных заболеваний. Используют метод фаго-тшшрования, когда с помощью известного набора фагов определяют фаговар исследуемых бактерий. Метод основан на специфичности фагов, т.е. способности взаимодействовать только с бактериями, имеющими специфические к фагу рецепторы, и вызывать их лизис. Используется для диагностики брюшного тифа, дизентерии, чумы, холеры, стафилококковых инфекций.
Метод фаготипирования имеет важное эпидемиологическое значение, т.к. позволяет установить связи между источником инфекции и отдельными случаями заболеваний.
2. Для лечения:
а) стафилококковый бактериофаг — при гнойно-воспалительных заболеваниях, вызванных S. aureus;
б) бактериофаг P. aeruginosa - при гнойно-воспалительных заболеваниях, вызванных синегнойной палочкой.
Существуют комбинированные многокомпонентные препараты бактериофагов:
- коли-протейный бактериофаг - при колиинфекциях, вызванных диарее-генными эшерихиями и протейных дисбактериозах;
- пиобактериофаг - для лечения стафилококковой, стрептококковой, клеб-сиеллезной, протейной инфекций, а также заболеваний, вызванных диареегенными эшерихиями и синегнойной палочкой;
- интести-бактериофаг - для лечения бактериальной дизентерии, сальмонелл езов, колиинфекций, а также протейной, стафилококковой, энтерококковой и синегнойной инфекций.
Бактериофаги применяют местно путем аппликации на раневую или ожоговую поверхность, введением в полости (брюшную, плевральную, мочевой пузырь), через рот, а также ректально. Соответственно способу применения препараты бактериофагов выпускают в различных лекарственных формах: жидком виде, таблетках, мазях, свечах, аэрозолях. Перед назначением бактериофага необходимо поставить пробу на чувствительность к нему выделенной культуры микроорганизмов.
-
Для профилактики в очагах инфекции: брюшнотифозный бактериофаг, поливалентный дизентерийный бактериофаг.