Отбор, хранение и транспортировка патологического материала, предназначенного для диагностики инфекционных болезней птиц

1. Для получения сыворотки

Пробы крови берут стерильно из подкрыльцовой вены, сердца, яремной вены (либо при тотальном кровопускании) в пробирки, увлажненные физиологическим раствором. Кровь выдерживают до образования сгустка при комнатной температуре, или в термостате при 37⁰С, в течение 1-2-х часов, затем осторожно обводят иглой (проволокой или пастеровской пипеткой) и оставляют на 16-18 часов в холодильнике при температуре 2-4⁰С. Образовавшуюся прозрачную, без гемолиза сыворотку отсасывают пипеткой в стерильные пробирки. Сыворотку исследуют в течение 3-х суток (или хранят в холодильнике, при 2-4⁰С). При необходимости длительного хранения, транспортировки, в нее добавляют мертиолят натрия в концентрации 1:10000 или 2%-ную борную кислоту по 1 капле. Перед отправкой сыворотку можно инактивировать в водяной бане при 56⁰С - 30 минут или добавлять в нее антибиотики 200 (1000) пенициллина, 200 мкг стрептомицина и 20 ЕД. нистатина на 1 мл. Объем сыворотки на комплексные исследования должен быть не менее 3 мл. Сыворотку следует брать от птиц, которые 12 часов не получали корм.

2. Исследование патматериала

Патматериал (пораженные органы и ткани, взятые от трупов или вынужденно убитых птиц) помещают в 50%-ный глицерин на физиологическом растворе, из расчета 1 кусочек объемом 1 см³(1 г) на 5-10 частей глицерина. Можно доставлять патматериал в замороженном или охлажденном виде. Для исследования берут трупы цыплят или живых птиц с клиническим проявлением болезни, либо целые органы. Допустимо отправлять гомогенат органов 1:6 или 1:10 на физиологическом растворе (рН 7,2-7,4) с добавлением антибиотиков из расчета 1000 ЕД. пенициллина и стрептомицина на 1 мл с предварительной выдержкой в течение 3-12-ти часов при 2-4⁰С и затем доставлять в замороженном виде.

3. Гистологическое исследование

Отбирают пробы органов в среднем величиной 1 см³. Иссечение пробы лучше проводить острым скальпелем, или лезвием бритвы на границе здоровой и пораженной ткани. В качестве фиксатора используют 96⁰этиловый спирт или 10%-ный водный раствор формалина (1 часть обычного 35-40%-ного формалина + 9 частей воды). Объем фиксатора должен в 5-10 раз превышать объем фиксируемого материала.

4. Отбор патологического материала для диагностики бактериальных инфекций

1.  Пастереллез(холера). Для бактериологических исследований направляют трупы или живых птиц. Выделение возбудителя проводят из паренхиматозных органов, крови сердца, трубчатой кости. Возможна ретроспективная серологическая диагностика заболевания.

2.  Стафилококкоз и стрептококкоз. На исследование направляют трупы или живых птиц, либо внутренние органы, в т.ч. сердце, паренхиматозные органы, трубчатую кость, пораженный сустав конечностей, а также эмбрионы на последней стадии инкубации.

4.  Гемофилез. Направляют живых птиц или трупы павших или вынужденно убитых. Можно отправлять головы, различные отделы дыхательной системы. Исследуют суспензию содержимого носовой полости, синусов, трахею, бронхи и легкие. Экспертиза успешна при очень коротком сроке между убоем или гибелью птиц и началом бактериологических исследований.

5.  Сальмонеллез. При снижении яйценоскости в стаде до 40-45% серологически исследуют сыворотку крови кур 50-55-дневного возраста, от индеек 45-50-дневного возраста. Далее исследования проводят через каждые 3 месяца. Сроки исследования должны совпадать с рекомендуемыми инструктивными документами, утвержденными Главным управлением ветеринарии РБ. Для бактериологических исследований направляют живых птиц, трупы или внутренние органы (сердце, печень с желчным пузырем, трубчатая кость, селезенка, яичник с измененными фолликулами, нерассосавшийся желток у цыплят), павшие эмбрионы.

6.  Колибактериоз. Направляют живых птиц, свежие трупы или трубчатую кость, сердце, печень и другие органы.

7.  Псевдомоноз. На исследование направляют эмбрионы различных сроков инкубации, живых птиц, трупы или внутренние паренхиматозные органы. Целесообразно одновременно исследовать комбикорм, корма животного происхождения, смывы со стен инкубатора и оборудования птичников.

8.  Респираторный микоплазмоз.  направляют сыворотку крови от птиц 1, 30, 55-60, 70-90, 150, 250-дневного возраста. Для выделения возбудителя направляют трупы или живых птиц, либо внутренние органы (кусочки носовых - подглазничных синусов, головной мозг или целую голову, трахею, легкие, воздухоносные мешки, пораженные суставы конечностей, селезенку, трубчатую кость, печень, почки). При необходимости - желточный мешок эмбрионов или суточных цыплят. У индеек и гусей, кроме вышеперечисленных органов посылают яйцевод, яичник, наружную и внутреннюю поверхность клоаки, половые органы и сперму самцов.

9.  Хламидиоз(орнитоз). Направляют парные сыворотки крови, полученные от больных и подозреваемых в заболевании птиц, при условии неприменения им антибиотиков в течение 2-х недель до взятия крови. Для выделения хламидий направляют также эякулят (сперму), паренхиматозные органы, селезенку. Материал берется не позднее чем через 2 часа после гибели или убоя птиц и направляют в замороженном виде в стерильных, герметически упакованных флаконах (или контейнерах). Для приготовления мазков-отпечатков в лабораторию также направляют печень, почки, селезенку, половые органы, эякулят и головной мозг.

При отборе патологического материала ветперсоналу необходимо соблюдать меры личной безопасности.