Исследование качественных показателей крови

Цель работы: Ознакомиться с современными методами исследования некоторых показателей крови. Используя собственную кровь, определить скорость оседания эритроцитов, время свертывания, количество гемоглобина и группу крови. Пронаблюдать разные виды гемолиза.

Для работы необходимы: эфир, игла, спирт, вата, йод, стандартные сыворотки, две глазные пипетки, предметные стекла, карандаш по стеклу, прибор Панченкова, гемометр Сали, 0,1Н р-р соляной кислоты, дистиллированная вода, стеклянные палочки, 5% p-p лимоннокислого или щавелевокислого натрия, часовое стекло; 5% р-р глюкозы, нашатырный спирт, четыре пробирки, штатив для пробирок.

Ход работы:

1. Определение скорости оседания эритроцитов (соэ)

Для определения СОЭ используется аппарат Панченкова, состоящий из штатива с гнездами для капилляров. На капилляре нанесены деления от 0 до 100 мм, причем на делении "50" имеется метка "Р" (раствор), а на делении "0" метка "К" (кровь). В капилляр наберите 5% р-р лимоннокислого натрия до метки "Р" и выдуйте его на часовое стекло. После обработки пальца спиртом сделайте укол иглой и удалите ваткой первую каплю крови. Наберите кровь в капилляр до метки "К". При взятии крови кончик капилляра приставьте к капле крови и держите его горизонтально. Кровь заполнит капилляр. Выдуйте кровь в раствор лимоннокислого натрия на часовом стекле, перемешайте их и наберите эту смесь в капилляр до метки ''К", приставив его кончик к смеси в горизонтальном положении. Зажмите верхнее отверстие капилляра большим пальцем, переведите капилляр в вертикальное положение, поставьте нижний конец его в одно из гнезд аппарата Панченкова, плотно придавив резинку гнезда, и только после этого откройте верхний конец капилляра и введите его в гнездо до упора. Отметьте время установки капилляра в гнездо аппарата. По мере оседания эритроцитов верхний слой раствора в капилляре становился светлым. Определите по высоте неокрашенного столбика на сколько миллиметров осели эритроциты за 1 час. Сравните СОЭ своей крови с нормативными с учетом возраста и пола и сделайте выводы.

2. Определение группы крови

Карандашом напишите на одном конце предметного стекла римскую цифру II, а на другом - III и положите его на белый лист бумаги.

Разными пипетками нанесите на стекло рядом с цифрами по одной капле соответствующей сыворотки (II и III группы). Выдавите каплю крови из той же ранки, которую сделали в первом опыте. Затем одним концом стеклянной палочки перенесите небольшое количество крови в каплю сыворотки II группы, а вторым концом палочки в каплю сыворотки III группы, перемешивая при этом кровь с сывороткой. При наличии агглютинации (она наступает через 1-3 минуты) капля становится прозрачной, а эритроциты склеиваются в комочки. Установите группу собственной крови в зависимости от наличия или отсутствия реакции агглютинации в каплях и сделайте обоснование своего вывода.

3. Определение количества гемоглобина в крови по А. Сали

Ознакомьтесь с гемометром Сали. Это штатив с матовой задней стенкой и тремя пробирками. Из них две крайние запаянные пробирки содержат стандартный раствор солянокислого гематина, содержащего в 100г 16,67г гемоглобина. Средняя пробирка открыта, градуирована и используется для исследования крови.

В среднюю пробирку налейте до первой риски 0,1Н р-р соляной кислоты. Из пальца капилляром наберите кровь до метки (20мм³), оботрите его кончик фильтровальной бумагой и выдуйте кровь на дно средней пробирки гемометра. Ударами пальца по концу пробирки перемешайте содержимое и вставьте в штатив гемометра на 5-10 минут для превращения гемоглобина в солянокислый гематин. Далее в среднюю пробирку прибавляйте по каплям дистиллированную воду до получения раствора одинакового по цвету со стандартным. По цифре на уровне нижнего мениска раствора в пробирке определите количество граммов гемоглобина в 100г исследуемой крови. Сравните полученный результат с нормативами с учетом возраста и пола и сделайте вывод.