Добавил:
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Скачиваний:
964
Добавлен:
06.06.2016
Размер:
4.97 Mб
Скачать

Основные отрасли применения биотехнологии

Отрасль

Примеры

Сельское хозяйПолучение новых штаммов, новые метоство ды селекции растений и животных

(включая клонирование).

Производство

Получение органических кислот (напри-

химических ве-

мер, лимонной, итаконовой), использо-

ществ

вание ферментов в составе моющих

 

средств, получение хим. продуктов, ис-

 

пользующихся в быту (клеи, детергенты,

 

красители, волокна, желатирующие ве-

 

щества и загустители, душистые вещест-

 

ва, пигменты, пластики, смазки, воски и

 

пр.).

 

 

Энергетика

Увеличение потребления биогаза, круп-

 

номасштабное производство этанола как

 

жидкого топлива.

 

 

Добыча мине-

Выщелачивание руд, увеличение выхода

рального сырья,

нефти из нефтяных пластов.

нефти

 

Получение меди из вскрышных пород с использованием работы бактерий

Реннеберг Р., Реннеберг И. От пекарни до биофабрики. —

М.: Мир, 1991. — 112 с.

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

21

 

 

 

 

 

________________________________

 

 

Основные отрасли применения биотехнологии

 

________________________________

 

 

(продолжение)

 

 

 

________________________________

 

 

 

 

 

 

 

 

Отрасль

Примеры

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Защита окружающей

Биотехнологическая очистки сточных

 

 

________________________________

 

среды

вод, переработка неутилизуемых отхо-

 

 

 

 

 

дов сферы материального производст-

 

 

________________________________

 

 

 

ва и коммунального хозяйства.

 

 

 

Пищевая промыш-

Создание новых методов переработки

 

 

 

 

ленность

и хранения пищевых продуктов, полу-

 

 

________________________________

 

 

 

чение пищевых добавок (напр., поли-

 

 

 

 

 

 

меров, продуцируемых микроорганиз-

 

 

________________________________

 

 

 

мами АК), использование белка, син-

 

 

 

 

 

тезируемого одноклеточными орга-

 

 

 

 

 

 

низмами, и ферментов при переработ-

 

 

________________________________

 

 

 

ке пищевого сырья.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Здравоохранение

Диагностика, получение новых лекар-

 

 

________________________________

 

 

 

ственных средств, применение генной

 

 

 

 

 

инженерии для коррекции клеток ор-

 

 

________________________________

 

 

 

ганизма.

 

 

 

 

 

 

 

 

________________________________

 

 

 

 

 

 

 

 

В зависимости от цели применения лекарствен-

 

 

 

________________________________

 

 

ные средства и препараты можно подразделить

 

 

 

 

 

 

на следующие группы:

________________________________

лечебные (антибиотики, ферменты, алкалоиды, сер-

 

 

 

 

дечные гликозиды, гормоны т.д.);

________________________________

профилактические (вакцины, сыворотки, анатокси-

ны, адаптогены, интерфероны, витамины, нормоф- ________________________________

лоры и т.д.);

реабилитационные (витамины, адаптогены, нор-

________________________________

 

мофлоры и т.д.);

 

диагностические (диагностикумы на основе фер-

________________________________

 

ментов и иммобилизованных клеток, иммунные

 

 

тест-системы на основе моноклональных и поли-

________________________________

 

клональных антител).

 

 

 

 

________________________________

 

 

 

 

В настоящее время лекарственные субстанции

________________________________

 

могут быть получены следующими методами:

 

________________________________

 

1) химическим, органическим и неорганическим

 

 

 

синтезом;

________________________________

 

2) выделением из нативного сырья растительного,

 

 

 

животного или минерального происхождения (тра-

________________________________

 

диционные технологии);

 

 

 

3) в результате биотехнологического производства.

________________________________

 

 

 

________________________________

 

 

 

 

На современном этапе методами биотехнологии

 

________________________________

 

производится более 350 наименований лекарствен-

 

ных средств для лечения 200 заболеваний, в том

________________________________

 

числе угрожающих жизни.

 

По экспертным оценкам, доля лекарственных

________________________________

 

средств, производимых биотехнологическими ме-

 

тодами, в ближайшем будущем составит 50 % от

________________________________

 

всех применяемых лекарственных средств.

 

 

 

________________________________

22

ОБЪЕМ РОССИЙСКОГО РЫНКА БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ ≈ 1 млрд $

Выпуск российской биотехнологической продукции ≈ 360 млн $

Импорт биотехнологической продукции

≈ 650 млн $

Основные потребители биотехнологической продукции

ФАРМАЦЕВТИКА ≈ 580 млн $

(из них только 25–30 % приходится на отечественную продукцию): антибиотики, генно-инженерные белки (интерфероны, инсулин, вакцины, ферменты, диагностические средства).

ПИЩЕВАЯ ПРОМЫШЛЕННОСТЬ ≈ 100 млн $

(на этом рынке доля отеч. продукции — 10–15 %): закваски для кисло-молочных продуктов, дрожжи и ферменты для производства спирта и мясопереработки.

СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО ≈ 300 млн $

(доля отеч. продукции — 8–10 %): средства защиты растений, производство кормов и ферментов для кормопроизводства (аминокислота лизин, микрокапсулированные витамины, культуры полезных бактерий).

ПРОМЫШЛЕННОСТЬ И ЭКОЛОГИЯ

использование биосистем для разработки полезных ископаемых, биотехнологическая переработка промышленных и бытовых отходов, очистка сточных вод, обеззараживание воздуха.

(Abercade Consulting, 2002 г.)

Национальная программа «Развитие биотехнологии в Российской Федерации на 2006–2015 гг.» разработана в соответствии с решением II съезда биотехнологов России от 15 окт. 2004 г.

Доля РФ в мировом биотехнологическом рынке крайне низка.

Прогнозируется: в 2010 г. Россия будет производить 0,25 % мирового объема б/т продукции.

Отечественная б/т промышленность производит дженерики (98 % продукции), современные высокотехнологичные продукты составляют 10 %.

Цель программы:

Развертывание работ в области теоретической и практической б/т в РФ на базе современных инновационных подходов для производства импортозамешающей биотехнологической продукции.

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

23

Задачи программы:

Формирование и реализация национальных приоритетных проектов в биотехнологии.

Разработка теории и методологии фундаментальной биотехнологии.

Внедрение новейших достижений в сфере геномики, биоинформатики, нанотехнологий в соответствии с наиболее важными приоритетами (генетический паспорт, биочипы и др.).

Создание современных образовательных программ и системы подготовки кадров в области б/т.

Реализация целевых практических проектов по медицинской, с/х, пищевой, экологической, промышленной б/т и др. направлений с целью обеспечения населения отечественной б/т продукцией.

Создание действенной правовой, экономической и организационной базы для развития б/т.

Литература:

Биологическая наука и биотехнологии в России. — М., 2006, 192 с. (Национальный исследовательский совет национальных академий США в сотрудничестве с Российской Академией наук).

Национальная программа «Развитие биотехнологии в Российской Федерации на 2006–2015 гг.». — М., 2005. — 56 с.

Егорова Т.А., Клунова С.М., Живухина Е.А. Основы биотехнологии. — М.: Издат. центр «Академия»,

2003. — 208 с.

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

Для заметок

_____________________________________________________________________

_____________________________________________________________________

_____________________________________________________________________

_____________________________________________________________________

_____________________________________________________________________

_____________________________________________________________________

_____________________________________________________________________

_____________________________________________________________________

_____________________________________________________________________

_____________________________________________________________________

24

Тема 2 .

Биологические системы, используемые в биотехнологии. Совершенствования биообъектов методами мутагенеза и селекции

Цель:

Познакомить с основными биообъектами биотехнологии, их классификацией, принципом выбора биообъектов и способами их совершенствования.

Рассматриваемые вопросы:

Биообъекты.

Характеристика и классификация биообъектов.

Принцип выбора биообъекта для биотехнологического производства.

Методы совершенствования биообъектов.

Совершенствования биообъектов методами мутагенеза и селекции.

Основу биологического производства составляют биологические объекты и технологические процессы, осуществляемые на биотехнологическом оборудовании.

Биологический объект является средством производства лекарственных субстанций и диагностических компонентов тест-систем.

Биообъектом в процессах биосинтеза лекарственных субстанций является продуцент целевого продукта, а в процессах биокатализа или биотрансформации биообъект — это промышленный фер- мент-биокатализатор, находящийся в свободном состоянии или иммобилизованный на носителе.

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

25

Биологическими объектами в б/т являются самые разнообразные биологические системы.

Реннеберг Р., Реннеберг И. От пекарни до биофабрики. —

М.: Мир, 1991. — 112 с.

Биообъекты как средство производства лекарственных, профилактических и диагностических средств можно разделить на 4 группы:

макробиообъекты животного происхождения (млекопитающие, птицы, рептилии, рыбы, насекомые, паукообразные, морские позвоночные). Культуры тканей человека и др. млекопитающих;

биообъекты растительного происхождения (дикорастущие и плантационные растения, водоросли). Культуры растительных тканей;

биообъекты — микроорганизмы (эукариоты — простейшие, грибы, дрожжи. Прокариоты — актиномицеты, эубактерии. Вирусы);

биообъекты — макромолекулы с ферментативной активностью (промышленные катализаторы на основе индивидуальных ферментов и мультиферментных комплексов).

Выбор биообъекта

Выбор биологической системы зависит от целей биотехнологического процесса.

При выборе объекта основная задача биотехнолога

— отбор более продуктивных объектов с качествами, повышающими возможность их использования в промышленном производстве.

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

26

Выбор биообъекта (продолжение)

Главный критерий при отборе продуцентов — способность синтезировать целевой продукт.

К наиболее важным качествам с точки зрения технологии производства относятся:

высокая скорость роста;

устойчивость к инфекции;

рост на менее дефицитных средах;

большее соответствие требованиям промышленной гигиены.

Все это позволяет значительно снизить затраты на производство целевого продукта.

Чтобы с максимальной продуктивностью использовать биообъект в процессе, необходимо знать и учитывать его структурно-функциональные особенности применительно к конкретным условиям производства.

Классификация живых организмов

Живые организмы

Неклеточные

Клеточные

Вирусы

Прокариоты

Эукариоты

(ДНК–содержащие

 

животные

РНК-содержащие )

простейшие растения

 

бактерии

 

 

актиномицеты,

грибы нитчатые,

 

цианобактерии,

дрожжи,

 

 

водоросли

Прокариотические клетки

Не имеют заключенного в мембрану ядра. Генетический аппарат клеток представлен двойной замкнутой нитью ДНК, не отделенной мембраной от цитоплазмы. Гистоны и митотический аппарат отсутствуют, нет интронов; отсутствуют органеллы, свойственные эукариотам (хлоропласты, митохондрии).

Отличаются относительно небольшими размерами и простотой строения. Обычно они существуют изолированно, вне связи с другими клетками.

Линейные размеры (могут иметь сферическую, палочкообразную или спиральную форму), как правило, составляют от 0,5 до 3 мкм.

Клетка окружена жесткой стенкой толщиной около

200 А0 (1м=1010 А0).

Непосредственно под стенкой располагается клеточная мембрана, толщиной около 70 А0.

Внутри клетки имеются нуклеотиды, рибосомы (центры белкового синтеза), цитоплазма, резервные гранулы.

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

27

Бактерии вида Bacillus brevis (прокариоты), образующие антибиотик грамицидин С.

Промышленная микробиология и успехи генетической инженерии. : пер. с англ. — М.: Мир, 1984. — 176 с.

Эукариотические клетки клетки, ядро которых заключено в мембрану. Ядерная ДНК заключена в хромосомы, обычно не кольцевидные, с гистонами.

Обладают отграниченными мембраной клеточными органеллами — митохондриями, хлоропластами и др.

Как правило, эукариотическая клетка по объему в 1000–10 000 раз больше прокариотической.

Отличаются большим разнообразием форм, что необходимо для обеспечения различных специализированных функций.

В составе высших организмов эти клетки сосуществуют и взаимодействуют друг с другом различными путями и поэтому не нуждаются в биохимической гибкости и приспособляемости, столь необходимой для прокариот.

Плесневый гриб Cephalosporium acremonium (эука-

риоты), образующий антибиотик цефалоспорин.

Промышленная микробиология и успехи генетической инженерии. : пер. с англ. — М.: Мир, 1984. — 176 с.

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

28

Клетка дрожжей Saccharo-myces cerevisiae (эука-

риоты).

Промышленная микробиология и успехи генетической инженерии.: пер. с англ. — М.: Мир, 1984. — 176 с.

По своим требованиям к условиям окружающей среды микроорганизмы можно разделить на три следующие группы.

Облигатные аэробы, способные метаболизировать и расти только в присутствии атмосферного кислорода.

Например: прокариотические стрептомицеты (продуценты антибиотиков), большинство нитевидных эукариотических грибов (используемых в сыроделии и пр-ве продуктов питания).

Облигатные анаэробы — метаболизируют и растут без доступа свободного кислорода (кислород для них токсичен).

Например: бактериальный род Clostridium (C.botulinum образует токсин ботулизма).

Факультативные организмы, способные переключать свои метаболические механизмы с аэробного (дыхательного) пути на анаэробный (бродильный) в зависимости от окружающей среды.

Например: промышленные дрожжи.

Основные средства производства антибиотиков — различные виды грибов Penicillium, Streptomyces, Actinomyces.

Для производства ферментов в качестве биообъектов используют различные виды грибов Penicillium и Aspergillus, штаммы кишечной палочки Bacillus.

В синтезе витаминов участвуют пропионовокислые бактерии и уксуснокислые бактерии.

Аминокислоты продуцируют иммобилизованные клетки кишечной палочки и сахаромицетов, коринебактерии.

Пробиотики получают на основе биомассы клеток нормальной и транзиторной микрофлоры желудоч- но-кишечного тракта человека.

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

_______________________________

29

Лекарственные вещества

Penicillium chrysogenum

Плесень

Пенициллины

 

 

 

Cephalosporium acremonium

»

Цсфалоспорины

 

 

 

Streptomyces

Бактерия

Амфотерицин В, канамицины, неоми-

 

 

цины, стрептомицин, тетрациклины

 

 

и др.

 

 

 

Bacillus brevis

»

Грамицидин С

 

 

 

Bacillus subtilis

»

Бацитрацин

 

 

 

Bacillus polymyxa

»

Полимиксин В

 

 

 

Rhizopus nigricans

Плесень

Трансформация стероидов

 

 

 

Arihrobacter simplex

Бактерия

»

 

 

 

Mycobacterium

»

»

 

 

 

Гибридомы

Иммуноглобулины и моноклональные

 

 

антитела

 

 

 

Клеточные линии млеко-

Интерферон

питающих

 

 

(с помощью технологии

Бактерия

Инсулин, человеческий гормон роста,

рекомбинантных ДНК)

 

соматостатин, интерферон

 

 

 

Основной банк продуцентов в России — Всесоюзная коллекция промышленных микроорганизмов ГНИИ генетики.

Совершенствование биообъектов

Генетическая программа клетки может быть изменена следующими методами:

селекцией на основе спонтанных мутаций;

индуцированным мутагенезом с селекцией на каждом этапе мутаций;

клеточной инженерией на основе гибридизации соматических клеток и культивирования изолированных культур тканей и клеток растений и животных;

генной инженерией на основе технологии рекомбинантных ДНК.

Селекция (selectio — лат.) — направленный отбор спонтанных или индуцированных мутаций и создание на их основе клоновых культур с последующим поддержанием высокой продуктивности.

Селекция биообъектов направлена на увеличение образования целевого продукта часто без знаний о путях его биосинтеза.

Методы селекционной работы

Ступенчатый отбор спонтанных мутаций.

Ступенчатый отбор на основе индуцированного мутагенеза.

Отбор продуцентов по их устойчивости к структурным аналогам целевого продукта.

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

________________________________

30