Государственное бюджетное образовательное учреждение

высшего профессионального образования

«Тихоокеанский государственный медицинский университет»

Министерства здравоохранения

Российской Федерации

Кафедра _____микробиологии и вирусологии_____________

УТВЕРЖДЕНО

на заседании кафедры

протокол № 8 от «29» 04 2013г

Заведующий кафедрой _Шаркова В.А.____

Методические рекомендации для преподавателей

к практическим занятиям

МодульЧастная микробиология____________________________________________

^{(наименование модуля)}

учебной дисциплины (модуля) микробиология, вирусология __________________

^{(наименование учебной дисциплины, (согласно учебному плану)}

для специальности 060101- Лечебное дело_____________________________________

(шифр-наименование специальности)

курс ______3______семестр ____5______

Составитель: ___Шаркова В.А., д.м.н.,___ профессор, заведующая кафедрой_______

(Ф.И.О., ученая степень, звание, должность)

Рецензент:_Зайцева Е.А., д.м.н.,_________

профессор кафедры____________________

(Ф.И.О., ученая степень, звание, должность)

Владивосток - 2013г.

1. Тема занятия. Микробиология бактериальных зоонозов - бруцеллёза, туляремии, сибирской язвы, иерсиниозов

2. Мотивация изучения темы. За последние годы значительно активизировались природные очаги бруцеллеза, сибирской язвы, туляремии на территории России и сопредельных стран. Очаги данных инфекций встречаются в Смоленской, Оренбургской, Ярославской, Архангельской, Рязанской, Ивановской областях. Прогноз по чуме на ближайшие годы по РФ благоприятен. Однако, следует помнить, что эпизоотии чумы возникают по определенному циклу, в который заложены все факторы очаговости, поэтому степные районы (места расселения грызунов), территории Астраханской области, республик Калмыкии, Дагестана и Чеченской республики требуют особого внимания. Возбудители включены в реестр бактериологического оружия, заболевания относятся к ООИ.Возбудители бактериальных иерсиниозных зоонозов существуют, циркулируют среди животных в эпидемических районах земного шара. Все это обязывает врачей знать характерные признаки названных заболеваний, уметь своевременно поставить диагноз, пресечь распространение инфекции, хорошо ориентироваться в профилактических средствах и приемах, знать принципы лечения.

3. Цели занятия.

   1. Общая цель: изучения темы направлено на формирование компетенций по ФГОС специальности (компетенции, которые формируются на данном занятии- ОК1, ПК6, ПК7, ПК 11, ПК14, ПК31.

   2. Конкретные цели и задачи.Познакомиться с морфологией, биологическими свойствами возбудителей зоонозов, патогенезом, микробиологической диагностикой, иммунопрофилактикой инфекций.

При этом задачами дисциплины являются:

- приобретение студентами знаний по классификации, морфологии и физиологии возбудителей зоонозов, изучение их биологических и патогенных свойств, влияния на организм человека;

- обучение студентов рационально выбирать материал для исследования в зависимости от характера течения заболевания, забору, направлению его в лабораторию, выбору методов лабораторной диагностики, способам расшифровки результатов лабораторных исследований. Ознакомление со способами, принципами, средствами профилактики и лечения, алгоритму постановки микробиологического диагноза изучаемых инфекций;

-на основе изучения учебного материала инициировать самообразовательную деятельность студентов: формировать умение сопоставлять факты, делать выводы, развивать личностные качества, научить стремиться использовать современные достижения науки.

После изучения темы студент должен:

I уровень - «иметь представление» - о классификации, морфологии и физиологии возбудителей зоонозов, их биологических и патогенных свойствах, влиянии на организм человека, обучающиеся должны быть способны идентифицировать объект, уметь объяснить микробиологическую диагностику, иммунопрофилактику.

II уровень - «Знать»- этиологию, биологические свойства возбудителей, таксономическую характеристику, патогенез зоонозов, характерные особенности клинического течения и иммунитета.

III уровень - «Уметь»- сопоставлять биологические свойства возбудителей зоонозов с патогенетическими механизмами, анализировать их с учетом динамики развития, выбирая методы лабораторной диагностики, материал исследования. Уметь забирать материал, направить его в лабораторию, ставить некоторые методы диагностики (РА, РПГА, РИФ, ИФА). Знать состав и назначение диагностических препаратов. Уметь оценивать результаты бактериологического, серологического, биологического исследований, внутрикожной пробы. Уметь выбрать препараты для специфической терапии и профилактики зоонозов.

IV уровень- «Владеть»- умением сопоставлять факты, делать выводы, развивать личностные качества. Стремиться использовать современные достижения науки, отечественных ученых

4. Этапы проведения практического занятия.

№ п/п	Название этапа	Цель этапа	Время
1	2	3	4
Вводная часть занятия				5-10 %
	Организация занятия	Мобилизовать внимание студентов на данное занятие
	Определение темы, мотивации, цели, задач занятия	Раскрыть практическую значимость занятия в системе подготовки к профессиональной деятельности, сформировать мотив и, как следствие, активизировать познавательную деятельность студентов
Основная часть занятия				%
1	2	3	4
	Контроль исходных знаний, умений и навыков	Проверка готовности студентов к занятию, выявление исходного уровня знаний, умений и навыков
	Общие и индивидуальные задания на СРС в учебное время	Дифференцированное ориентирование студентов к предстоящей самостоятельной их работе
	Демонстрация методики	Показать ориентировочную основу действия (ООД)
	Управляемая СРС в учебное время	Овладение необходимыми общекультурными, профессиональными компетенциями, исходя из конкретных целей занятия
	Реализация планируемой формы занятия (семинар, практическая работа)	Контроль результатов обучения и оценка с помощью дескрипторов
	Итоговый контроль	Оценивание индивидуальных достижений студента, выявление индивидуальных и типичных ошибок и их корректировка
Заключительная часть занятия				5-10 %
	Подведение итогов занятия	Оценка деятельности студентов, определение достижения цели занятия
	Общие и индивидуальные задания на СРС во внеучебное время	Указание на самоподготовку студентов, ее содержание и характер

5. Ориентировочная основа действия (ООД) для проведения самостоятельной работы студентов в учебное время (курация, выполнение лабораторной работы и т.д.).

1. Проверить материалы по самоподготовке (письменные ответы на вопросы домашнего задания, лекции по теме занятия).

2.Сформулировать цель занятия.

3.Контроль исходного уровня знаний.

4. Выполнить самостоятельное решение тестовых заданий, ситуационных задач в соответствии с алгоритмом:

5. Составить и обсудить алгоритм серологических реакций, выполнить их, учесть результаты готовых (см. п.6).

6. Задания для контроля уровня сформированности компетенций в учебное время.

Тестовый контроль итоговый с эталонами ответов

1. . Источники возбудителей бактериальных зоонозов:

а) человек в) вода

+б) животные и грызуны г) воздух

2. Морфология возбудителей бруцеллеза:

+а) коккобактерии, палочки б) нитевидные в) диплобациллы

г) извитые

3. Какой из возбудителей зоонозных инфекций является спорообразующим:

а) бруцелла

б) франциселла

+в) сибиреязвенная палочка

г) иерсиния

4. В качестве ускоренных иммуносерологических методов исследования на чуму используют следующие, кроме

а) иммунофлюоресцентного анализа + в) метода Ермольевой

б) РНГА г) иммуноферментного анализа

5. Продукция экзотоксина Y. рseudotuberculosis стимулируется под действием:

+a) низкой температуры в) сыворотки

б) антибиотиков

г) вакцины

6. На каких питательных средах лучше растут возбудители бруцеллеза:

+а) печеночный МПБ в) сахарный МПБ

б) МПА г) кровяной МПА

7. Y. pestis выделяет бактериоцины, оказывающие бактерицидное действие на микроборганизм:

+ a) Y. рseudotuberculosis в) S. aureus

б) E. сoli

г) H.pylori

8. Не является основным методом диагностики сибирской язвы:

а) микроскопический г) бактериологический

б) иммунологический + д) аллергический

в) биологический

9. Факторами вирулентности Y. enterocolitica считают все перечисленные, кроме:

a) адгезины и инвазины в) энтеротоксин

б) низкомолекулярные протеины + г) мышиный токсин

10. Какая вакцина используется для активной профилактики бруцеллеза:

+а) живая вакцина в) бруцеллин

б) убитая вакцина г) поливалентный бактериофаг.

Ситуационные задачи.

Задача 1. При поступлении пациента в приемное отделение врач отметил у больного сухой кашель, увеличение печени и подмышечных узлов, которые были мало болезненны и имели четкие контуры. Был поставлен предварительный диагноз туляремия (?). Однако при посеве содержимого бубона на желточную среду Мак-Коя чистую культуру Francisella tularensis выделить не удалось.

Вопросы:

1. Как следует провести лабораторную диагностику?

Задача 2. Больному, поступившему в стационар, провели лабораторное исследование. Результаты: реакция Хеддельсона с сывороткой крови больного в объеме 0,2 мл «+ + + +», проба Бюрне «+ + + +», ОФП – 60.

Вопросы:

1. Оценить результаты лабораторного исследования. Аргументируйте ответ.

Задача 3. Расшифруйте результаты обследования работника мясокомбината: реакция Рай-та «+», проба Бюрне «+ + + +», ОФП – 6.

Вопрос:

1. Дать заключение.

Задача 4. В населенном пункте, неблагополучном по бруцеллезу у овец, в семье, состоя-щей из 4 человек, заболела дочь, студентка, приехавшая на каникулы, острым заболевани-ем с высокой температурой. Предполагаемый диагноз бруцеллез (?). Проведено лабора-торное исследование на бруцеллез всех членов семьи: выделена гемокультура от дочери и сына; реакция Райта положительна у матери (титр 1:100) и сына (1:400); реакция Бюрне положительна у отца, матери и сына.

Вопросы:

1. Кто болен острой формой бруцеллеза?

2. У кого скрытая форма инфекции или бруцеллез в прошлом?

3. У кого бессимптомная форма инфекции?

Задача 5. В клинику поступил больной с предварительным диагнозом сибирской язвы, кожная форма (?). В отделяемом карбункула микроскопическим методом обнаружены грамположительные палочки, расположенные единично, попарно или короткими цепоч-ками, напоминающими бамбуковую трость. На чашке с МПА при посеве отделяемого карбункула выросли колонии, край которых напоминает львиную голову. Для подтвер-ждения диагноза была поставлена биологическая проба. Ее результаты: в мазке отпечатке органа (легкое) белой мыши на красном фоне видны крупные, расположенные цепочкой палочки, окруженные бесцветной капсулой, общей для всей цепочки (окраска фуксином).

Вопросы:

1. Подтверждается ли диагноз сибирской язвы? Если да, то каким методом и почему?

2. От какого микроба-двойника следует отличать возбудителя сибирской язвы?

Задача 6. В природном очаге отмечено несколько случаев заболевания людей с подозрением на бубонную форму чумы. У одного из заболевших проведены бактериоскопия содержимого бубона и посев на мясо-петонный агар для выделения чистой культуры. В мазке, окрашенным метиленовым синим, обнаружены мелкие овоидные, биполярно окрашенные палочки. После суточного инкубирования посева рост на питательной среде не отмечался. Для подтверждения диагноза была взята кровь больного и проведена биологическая проба, сделан мазок-отпечаток из органов животного. Результат микроскопии при окраске метиленовым синим: синего цвета овоидные, биполярно окрашенные мелкие палочки на фоне клеток ткани животного. Дать диагностическую оценку полученным результатам.

Вопросы:

1. Подтверждается ли диагноз чумы? Если да, то каким методом диагностики и почему?

2. Может ли отсутствие роста культуры палочки чумы на питательной среде быть связано с явлением лизогении или существованием некультивируемых форм? Ответ обоснуйте и аргументируйте.

Эталоны ответа на задачи:

Задача 1.

1. В большинстве случаев F.tularensisвыделить из клинического материала с помощью бактериологического метода невозможно. Для подтверждения диагноза туляремии необходимо использовать экспресс-метод (РИФ), биологический метод диагностики (биопроба на мышах или морских свинках), кожную аллергическую пробу (эффективна для ранней диагностики).

Задача 2.

1. Антитела в РА - со второй недели заболевания бруцеллезом. Проба Бюрне положительна с 3-4-й недели заболевания. ОФП -60 – разгар заболевания. Ответ: бруцеллез, разгар инфекции.

Задача 3.

1. Рассуждения те же. Ответ: переболел, или в анамнезе бруцеллез, или вакцинация против бруцеллеза.

Задача 4.

1. Дочь.

2. У отца и матери.

3. У сына.

Задача 5.

1. Диагноз сибирской язвы подтверждается биологическим методом, так как при заражении материалом от больного (отделяемое карбункула) в ткани легкого погибшего животного обнаружены крупные стрептобациллы с капсулой.

2. Возбудители сибирской язвы следует отличать от антракоидов.

1. Подтвержден диагноз чумы, бубонная форма, так как в мазке-отпечатке из органов погибшего животного,инфицированного содержимым бубона больного, обнаружены овоидные, биполярно окрашенные палочки на фоне клеток ткани животного.

2. Отсутствие роста Y.pestisна питательной среде может быть связано с лизогенией (при заражении культурыY.pestisумеренным фагом культура не гибнет, но при активации умеренного фага происходит лизис микробной клетки) и некультивируемыми формами (у некультивируемых формY.pestisснижен метаболизм).

7.Задания для самостоятельной подготовки к практическому занятию:

7.1 Перечень контрольных вопросов для самоконтроля знаний.

1. Историю вопроса (открытие, изучение возбудителей). Заслуги отечественных исследователей в борьбе с особо опасными бактериальными зоонозами.

2. Таксономию возбудителей зоонозов. Генетические взаимосвязи (антигенное родство бруцелл и бактерий туляремии; иерсиний, сибиреязвенных бацилл).

3. Этиологические и патогенетические механизмы болезнетворности бактериальных зо-онозов:

- роль микроорганизма (факторы болезнетворности, резистентности, характер изменчивости);

- роль макроорганизма (естественная резистентность, входные ворота и пути распространения инфекции, развитие инфекционного процесса, формирование иммунитета).

4. Роль внешней среды и социальных условий в возникновении и развитии инфекционного процесса.

5. Краткую клинико-эпидемиологическую характеристику (термины: природно-очаговая, зоонозная инфекция, источник – пути передачи – реципиент, группы эпидемического риска, клинические формы).

6. Дифференциально-диагностические признаки возбудителей чумы и других иерсиониозов (ДСЛ и кишечные иерсиниозы).

7. Методы лабораторной диагностики:

- материал для исследования, правила его забора и транспортировки, оформления направления;

- методы: микробиологический, иммунологический, биологический, аллергический, фагодиагностика, их возможности. Целесообразность использования. Комплексная оценка. Экспресс-методы.

8. Принципы терапии.

9. Основы общей и специфической профилактики. Средства и методы.

2. Задания для СРС во внеучебное время

1. Составить схему микробиологической диагностики зоонозов.

2. Составить алгоритм серологических реакций (р. Райта, Хеддельсона, Минкевича, Асколи).

3. Составить таблицу препаратов для специфической профилактики, лечения и диагностики зоонозных инфекций. Указать состав: АГ или АТ, способ получения, показания к применению, механизм действия.

7.3. Задания для самоконтроля подготовки к практическому занятию (тесты) .

1.Укажите родовую принадлежность возбудителя туляремии:

а) Salmonellaв)Shigella

б) Yersinia+г)Francisella

2. Какая вакцина используется для активной профилактики туляремии:

+а) живая вакцина в) тулярин

б) убитая вакцина г) поливалентный бактериофаг

3. Какая вакцина используется для активной профилактики сибирской язвы:

+а) живая вакцина в) антраксин

б) убитая вакцина г) поливалентный бактериофаг

4. Источником инфекции при чуме не являются:

а) больной человек в) собаки, кошки

+б) птицы г) грызуны

5. Ускоренные методы исследования на сибирскую язву следующие

а) иммунофлюоресцентный анализ

б) реакция преципитации

в) иммуноферментный анализ

+г) все перечисленные

6. Заболевание, при котором источником инфекции может быть только человек, называется:

а) антропозооноз б) зооноз

+в) антропоноз г) сапроноз

7. Для роста сибиреязвенного микроба пригодны следующие питательные среды

+а) МПБ, МПА в) среда Китт-Тароцци

б) ЖСА г) Эндо

8. Для диагностики бруцеллеза применяют:

а) реакции Райта, Видаля в) реакции Хеддельсона, Вассермана

б) пробу Бюрне, реакцию Видаля + г) реакции Райта, Хеддельсона

9. Реакция сенсибилизированных тканей со специфическим бруцеллезным антигеном:

+а) Бюрне в) Райта

б) Хеддльсона г) Кумбса

10. Укажите возбудителя сибирской язвы:

а) стафилококки +в) бациллы

б) стрептококки г) эшерихии.

8. Оснащение практического занятия:

8.1. Наглядные пособия:

а) таблицы:

1.Морфология бруцелл

2. Реакция Хеддельсона

3. Francisella tularensis

4. р. Минкевича

б) схемы, стенды, витражи, альбомы:

1.Схема культивирования аэробов

в) слайды (диапозитивы):

1. реакции Райта, Хеддельсона, р. Асколи

2. Francisella tularensis- РИФ

Г) реакции: р. Райта, р Асколи

Д) вакцины- живые для профилактики бруцеллеза, сиб.язвы, туляремии

Е) аллергены – бруцеллин, тулярин, антраксин

8.2. Технические средства обучения: (лабораторное оборудование, микроскопы (бинокуляры), микроском с видео насадкой, оверхет, компьютер, мультимедийный проектор.