- •Методические рекомендации для преподавателей
- •9.Учебно-материальное обеспечение:
- •Методы микробиологического исследования при бруцеллезе
- •1. Материал исследования:
- •2. Методы исследования:
- •Дифференциация видов бруцелл по биохимической активности
- •Микробиологическая диагностика туляремии
- •I. Бактериологический метод:
- •II. Биологический метод:
- •II этап
- •Биохимическая активность:
- •Специфические лечебно-профилактические средства, применяемые при
Методы микробиологического исследования при бруцеллезе
1. Материал исследования:
- кровь: берут 5-10 мл из вены в начальном периоде (до лечения антибиотиками),
- моча: 30-20 мл перед посевом центрифугируют 1-2 часа и далее работают с осадком,
- желчь: получают при дуоденальном зондировании (1,5-2 мл), перед посевом центрифугируют 1-2 часа.
Кроме указанных материалов можно исследовать:
- пунктат из костного мозга,
- ткани плода при спонтанном аборте,
- околоплодные воды,
- кусочки некротизированной плаценты,
- молоко родильницы;
В сельской местности дополнительно:
- мясо погибших животных,
- молоко коров, коз,
- воду,
- навоз.
2. Методы исследования:
Микроскопический (ориентировочный, вспомогательный)
Бактериологический (один из основных)
Биологический (один из основных)
Иммунологический (наиболее часто используемый):
- серологические (реакции Райта, Хеддельсона, Минкевича, РИФ, РНИФ, ИФА),
- опсонофагоцитарная проба.
5. Аллергический:
- аллергическая проба Бюрне (с бруцеллином),
- РПН в присутствии аллергена.
Приложение 2
Схема бактериологического исследования на бруцеллез
I Этап:Материал исследования: Цель работы:
флаконы: накопление микробов
№ 1 № 2
МПБ + глюкоза + глицерин или необходимо 5-10% углекислого
печеночный бульон + 0,2% цитрат газа (зажечь ватную пробку и
натрия горящей ввести во флакон, затем
пробку залить расплавленным
парафином)
В термостат при + 37оС 30 дней (контроль каждые 4-5 дней)
II Этап: Материал исследования: Цель работы:
рост на жидких средах накопления получение изолированных
колоний
Рассев на плотнуюсреду
по Граму РИФ
печеночный агар +
антифаговая сыворотка +
генцианвиолет
В термостат при + 37оС, 25-30 дней (контроль каждые 4-5 дней)
III Этап: Материал исследования: Цель работы:
изолированные колонии выделение и
накопление чистой культуры
В термостат при + 37оС,
на 20-25 дней
печеночный МПА
по Граму
(РИФ, РНИФ)
IV Этап: Материал исследования: Цель работы:
чистая культура на идентификация
печеночном МПА микробного вида
по Граму
(РИФ, РНИФ)
- дифференциация вида бруцелл по:
потребности первичных генераций в СО2;
бактериостатическому действию на микробов анилиновых
красителей (основного фуксина, тионина);
образованию H2S;
агглютинации монорецепторными сыворотками на стекле, в развернутой классической РА;
чувствительности к фагу «Тб».
Заключение: на основе комплекса признаков.
Приложение 3
Таблица дифференциальных свойств видов роста бруцелл
ВИД |
Потреб ность в CO2 |
Продук ция H2S |
Рост на средах с добавлением |
Агглютинация с моноспецифической сывороткой |
Фагочувствительность | ||||
Тионина |
Основного фуксина |
А |
М | ||||||
Br.melitensis |
- |
- |
+ |
+ |
- |
+ |
2 - | ||
Br.abortus (bovis) |
+ |
+ |
- |
+ |
+ |
- |
+ | ||
Br.abortussuis |
- |
++ |
+ |
- |
+ |
- |
- |