При стафило-, стрептококковых инфекциях:

1 этап.

Бактериоскопическое Бактериологичекое Кровь

исследование исследование

(мазок, окраска по Посевы (все виды Сахарный МПБ

Граму) – ответ материала,кроме крови).

Сахарный МПА, кровяной агар,

ЖСА.

Инкубация в термостате при +37⁰С – 24 часа.

2 этап

а) мазок, окраска по Граму б) изучение изолированных в) посев на кровяной МПА

колоний (характерная

форма, пигмент, гемолиз,

лецитиназная активность),

посев на скошенный МПА.

Инкубация в термостате +37⁰С – 24 часа.

3 этап.

- Изучение свойств чистой

культуры.

- Идентификация микробного

вида.

- Определение чувствительной

к антибиотикам.

Инкубация в термостате +37⁰С – 24 часа.

4 этап.

Учёт результатов, заключение

по совокупности всех биологических

признаков, окончательный ответ.

Приложение №2

Определение активности ревматического процесса по наличию и титру анти – О – стрептолизина.

1 этап: Определение О-стрептолизина, его рабочей дозы.

Ингридиенты	Разведения О-стрептолизина
Стрептолизин в мл	0,05	0,10	0,15		0,20	0,25	0,30			-
Физ. раствор в мл	0,25	0,20	0,15		0,10	0,05	-			0,3
Эритроциты 3% взвесь	0,2	0,2	0,2		0,2	0,2	0,2			0,2
В термостат на 30 мин. при +37^0С.
Учёт результатов	Гемолиза нет			Гемолиз эритроцитов				Гемолиза нет

Рабочая доза О-стрептолизина – это его минимальное количество, которое даёт чёткий чёткий гемолиз эритроцитов. В данном примере она равна 0,15 мл.

2 этап: Определение титра анти-О-стрептолизина.

Ингредиенты	Экспериментальные пробирки						Контроль
	1	2	3	4	5	Сыворотки (0,5:50)		О-стрептолизина
Разведения сыворотки больного, мл	1:50 0,5	1:100 0,5	1:200 0,5	1:400 0,5	1:800 0,5	0,5		-
О-стрептолизин в рабочей дозе, мл	0,15	0,15	0,15	0,15	0,15	-		0,15
Эритроциты 5% взвесь	0,2	0,2	0,2	0,2	0,2	0,2		0,2
Физ. раствор	-	-	-	-	-	0,15		0,5
В термостат на 30 мин. при +37^0С.
Учёт результатов	Задержка гемолиза			Гемолиз		Нет гемолиза		Гемолиз

Титр анти-О-стрептолизина – 1:200 (то максимальное разведение сыворотки с антителами к О-стрептолизину, которое ещё заделживает гемолиз.

Приложение № 3

Определение титра антигиалуронидазы.

1 этап. Определение титра и рабочей дозы гиалуроновой кислоты.

Ингредиенты	Пробирки
	1	2		3	4	5
Гиалуроновая кислота, мл	0,05	0,1		0,2	0,25	0,3
Дистилированная вода, мл	0,25	0,2		0,1	0,05	-
В термостат, +37^0С на 30-40 мин.
Уксусная кислота, капли	2 кап.	2 кап.		2 кап.	2 кап.	2 кап.
Учёт результатов	Нет сгустка		Сгусток

Рабочая доза равна 0,2 мл. Это то минимальное количество, которое под действием уксусной кислоты даёт сгусток.

2 этап. Определение титра гиалуронидазы.

Ингредиенты	Пробирки
	1	2	3	4	5	6к
Гиалуронидаза, мл	0,05	0,10	0,12	0,15	0,20	0,25
Дистилированная вода, до 0,25 мл	0,20	0,15	0,13	0,10	0,05	-
Гиалуроновая кислота в рабочей дозе, мл	0,20	0,20	0,20	0,20	0,20	0,20
В термостат, +37^0С на 30 мин.
Уксусная кислота	2 кап.	2 кап.	2 кап.	2 кап.	2 кап.	2 кап.
В термостат, +37^0С на 30 мин.
Учёт результатов	Сгусток		Нет сгустка

Титр гиалуронидазы 0,12 мл (минимальный объём при котором сгусток уже не образуется в результате разрушения гиалуроновой кислоты ферментом гиалуронидазы).

3 этап. Определение титра антигиалуронидазы (антител против гиалуронидазы).

Ингредиенты	Пробирки							Контроли
	1	2	3	4		5	Сыворотки 1:50		Гиалуро нидазы	Гиалуроновой кислоты
Сыворотка крови больного (разведения), мл	1:50 0,5	1:100 05	1:400 0,5	1:800 0,5		1:1600 0,5	0,5		-	-
Гиалуронидаза в рабочей дозе, мл	0,12	0,12	0,12	0,12		0,12	-		0,12	-
В термостат, +37^0С на 30-40 мин.
Гиалуроновая к-та в рабочей дозе, мл	0,2	0,2	0,2	0,2		0,2	-		-	0,2
Дистилированная вода, мл	-	-	-	-		-	0,32		0,7	0,62
Уксусная кислота	2 кап.	2 кап.	2 кап.	2 кап.		2 кап.	2 кап.		2 кап.	2 кап.
В термостат, +37^0С на 30-40 мин.
Учёт результатов	Сгусток				Нет сгустка						Есть

Приложение 4.

Материал для исследования, особенности его получения, доставки в лабораторию при кокковых инфекциях.

7. Менингококковая инфекция:

Необходимо учитывать, что менингококк может персистировать на слизистых носоглотки, не вызывая патологии. Носительство может завершиться воспалением верхних дыхательных путей. Менингококковый сепсис чаще встречается у детей. Специфическое заболевание, вызываемое менингококком – септицемический менингит. Его удельный вес в заболеваемости у детей имеет тенденцию к росту.

Исследуют:

• при выявлении носительства - смывы из носоглотки,

  • слизь из носа, глотки,

  • при сепсисе для бактериологического исследования берут кровь,

  • при явлениях менингита – спинно-мозговую жидкость.

Помнить: менингококк чувствителен к изменению температуры. Направляя жидкость в лабораторию, следует принять меры по предупреждению переохлаждения материала. Его надо завернуть в вату, уложить в ящик для транспортировки и положить грелку. При необходимости можно хранить 2-3 часа в термостате при +37⁰С.

8. Гонококковая инфекция:

Необходимо помнить:При гонорее возможны поражения:

- генитальные (воспаление матки, труб, яичников; у девочек – вульвовагинит, у мужчин – воспаление семенных пузырьков, предстательной железы);

- экстрагенетальные (конъюнктивит, бленорея, стоматит, артрит, менингит, эндокардит, перитонит, сепсис).

Исследуют:- отделяемое матки, конъюнктивы, уретры, влагалища, вульвы, предстательной железы, прямой кишки,

• осадок мочи,

сперму,

кровь,

прочие виды материала (при редких формах экстравагинальной гонореи.

Примечание: материал для исследования берут после предварительного обмывания половых органов стерильным физиологическим раствором,

- из первой порции утренней мочи.

Во избежание аутолиза кокков материал следует отправлять в лабораторию немедленно!

Приложение № 5.