Добавил:

tdilyana Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.

Вуз:

Тюменский государственный медицинский университет

Предмет:

Биоорганическая химия

Файл:

Тетрадь для лабораторных

.pdf

Скачиваний:

Добавлен:

15.05.2017

Размер:

720.4 Кб

Скачать

☆

<<< < Предыдущая 1 2 3 45 / 65 6 > Следующая >>>

интенсивно красный цвет.

			2+
3		Fe+2
3
N	N	N	N
		Fe+2	3

Наблюдения:

____________________________________________________________________

_________________________________________________________________

Выводы:

____________________________________________________________________

Вопросы к защите работы.

1.Напишите уравнение реакции катехина (1,2-дигидроксибензола) с ацетатом свинца.

____________________________________________________________________

2.Напишите уравнение реакции окисления этанола бихроматом калия в кислой среде.

____________________________________________________________________

3.Какое значение имеет реакция образования иодоформа?

____________________________________________________________________

Занятие 1.3.4.

Важнейшие -аминокислоты, пептиды

Лабораторная работа № 11 Химические методы обнаружения аминокислот и белков

О п ы т № 1 .Реакция обнаружения аминокислот и белков

Реакция используется для обнаружения -аминокислот и белков, в криминалистике - обнаружение невидимых пятен белковой природы.

Методика эксперимента: В пробирки поместить по 3-4 капли 1% раствора глицина, -аланина и по 2 капли 0,1% раствора нингидрина. Содержимое пробирок нагреть.

ХИМИЗМ ПРОЦЕССА:

O			O
		O	O
		O
OH
+ H2N CH2	COOH		N
OH			N
OH
O		O	O
O			O

+ CO2 + HCOH +3H2O

Наблюдения, отметьте цвет продукта:__________________________________

___________________________________________________________________

Выводы:____________________________________________________________

____________________________________________________________________

О п ы т №	2 . Амфотерные свойства аминокислот
Методика	эксперимента. В 2 пробирки поместить по 5 капель 1%

раствора -аланина и добавить по каплям в одну из них 0,1% раствор хлороводородной кислоты, подкрашенной индикатором конго в синий цвет, до появления розово-красной окраски, а в другую - 0,1% раствор гидроксида натрия, подкрашенный фенолфталеином, до исчезновения окраски.

ХИМИЗМ ПРОЦЕССОВ:

+HCl

H3N		CH2 COO	+NaOH

ClH3N CH2 COOH

H2N		CH2 COONa	+ H2O

Наблюдения:

____________________________________________________________________

_______________________________________________________________

Выводы:

____________________________________________________________________

О п ы т № 3 Реакция аминокислот с формальдегидом

Реакция под названием "формольное титрование" используется для количественного определения аминокислот. Реакция протекает по аминогруппе, поэтому образуется продукт кислой природы, количество которого можно оценить, если исходно добавить известное количества щелочи. Щелочь в присутствии фенолфталеина окрашивается в малиновый цвет. В момент нейтрализации щелочи продуктом реакции малиновая окраска исчезает.

Реакция широко используется для количественного определения аминокислот в пищевых продуктах, БАД, содержащих аминокислоты, белковые гидролизаты (с целью установления возможной фальсификации состава)..

Методика эксперимента. В пробирку поместить 5 капель 1% раствора глицина и добавить 1 каплю индикатора метилового красного. Раствор окрашивается в

желтый цвет (нейтральная среда). К полученной смеси добавить равный объем формалина.

ХИМИЗМ ПРОЦЕССА:

H2C

COONa

+NaOH

H2N CH2 COONa + H

+ H2O

CH2

внутренняя соль

метиленимин глицина

(нейтральная среда)

Отметить изменение окраски индикатора.

Наблюдения:

____________________________________________________________________

Выводы:____________________________________________________________

____________________________________________________________________

О п ы т	№ 4 . Ксантопротеиновая реакция
Реакцию	используют	для	обнаружения	ароматических	и

гетероциклических аминокислот (например, тирозина, фенилаланина, триптофана, гистидина) и содержащих их белков.

Методика эксперимента. В одну пробирку поместить 5 капель 1% раствора тирозина, в другую - 10 капель раствора яичного белка. В каждую из пробирок добавить по 3 капли концентрированной азотной кислоты. Смесь нагреть до появления желтой окраски. Пробирки охладить и осторожно добавить по 1-2 капли 10% раствора гидроксида натрия до появления яркооранжевой окраски.

ХИМИЗМ ПРОЦЕССА:

HNO3

O2N

+NaOH

CH2 CH COOH

CH2

CH COOH

NH2

O N

NH2

O2N

CH2

CH COOH

NH2

ONa

хиноидная структура

Наблюдения:

____________________________________________________________________

Выводы:

____________________________________________________________________

О п ы т № 5 Биуретовая реакция на пептидную связь

Реакция используется для обнаружения индивидуальных аминокислот и пептидных связей в пептидах, белках, представляющих собой продукт поликонденсации -аминокислот.

Методика эксперимента. В две пробирки поместить по 3-5 капель 1% раствора сульфата меди, добавить по каплям 10% раствор гидроксида натрия до образования осадка. Далее в одну из пробирок приливают 1% раствор глицина,

ав другую - раствор яичного белка. ХИМИЗМ ПРОЦЕССА:

2 H3C HC

COOH + CuSO4

NaOH

H3C

H2N

NH2

Cu+2

NH2

CH CH3

Наблюдения:

____________________________________________________________________

Выводы:____________________________________________________________

____________________________________________________________________

О п ы т № 6 . Цветная реакция обнаружения серусодержащих аминокислот (реакция Фоля)

Реакцию Фоля используют для обнаружения биоорганических соединений, содержащих атомы серы. Этим методом может быть доказано присутствие атомов серы в таких аминокислотах как: цистеине, метионине, цистине, а также унитиоле, липоевой кислоте и др.

H N

OH H2N

CH2

HOOC

CH H2C

CH2

CH COOH

CH2

NH2

CH3

цистеин

метионин

цистин

Методика эксперимента. В пробирку поместить 5 капель 1% раствора цистеина. Добавить 2-3 капли 10% раствора гидроксида натрия. Нагреть смесь до кипения, а затем добавить 2 капли 10% раствора ацетата свинца (II).

ХИМИЗМ ПРОЦЕССА:

H2N

H N

COOH + Na S + H O

+ 2 NaOH

CH2

Na S + (CH COO) Pb

PbS + 2 CH3COONa

Наблюдения:

____________________________________________________________________

Выводы:____________________________________________________________

____________________________________________________________________

Вопросы к защите работы.

1.Какое практическое значение имеет реакция -аминокислот с нингидрином?

____________________________________________________________________

2.Напишите уравнение реакции метионина с формальдегидом.

____________________________________________________________________

3.Напишите уравнение реакции метионина со щелочью с последующим добавлением ацетата свинца.

____________________________________________________________________

4.Напишите уравнение реакции взаимодействия фенилаланина с азотной кислотой.

____________________________________________________________________

5. Приведите химизм взаимодействия -аланина с хлороводородной кислотой и гидроксидом натрия.

____________________________________________________________________

6. Каковы внешние признаки биуретовой реакции?

____________________________________________________________________

___________________________________________________________________

7. Какие -аминокислоты в составе белка могут быть обнаружены с помощью ксантопротеиновой реакции?

____________________________________________________________________

Занятие 1.3.5. Углеводы

Лабораторная работа № 12

Качественные реакции на углеводы и их функциональные группы О п ы т № 1 . Обнаружение кетоз (фруктозы) ( реакция Селиванова).

Окрашенный продукт в присутствии кетоз (фруктозы) образуется в 20 раз быстрее, чем в присутствии альдоз (например, глюкозы). Реакция используется для установления подлинности меда, содержащего значительное количество фруктозы, и исследования БАД или кондитерских изделий с фруктозой. Методика эксперимента. В пробирку поместить 1мл 2% раствора фруктозы и добавить 2 мл реактива Селиванова, представляющего собой 0,1% раствор резорцина в 50% серной кислоты. Содержимое пробирки осторожно нагреть на спиртовке до кипения. Длительный нагрев нежелателен.

Химизм процесса. Из фруктозы под действием 50% серной кислоты образуется 5-гидроксиметилфурфурол, который образует окрашенный продукт реакции конденсации с резорцином. Обычно образуется окрашенное малиновое кольцо.

			OH			HO
			OH
		O	H2SO4	HOH2C	O	C	OH
HOH2C		C +	H2SO4		O	O
HOH2C		C +				O
	O	H
		H
			OH
						OH

5-гидроксиметилфурфурол резорцин

Наблюдения:

____________________________________________________________________

_________________________________________________________________

Выводы:

____________________________________________________________________

__________________________________________________________________

О п ы т № 2 . Определение глюкозы в крови.

Методика эсперимента. В пробирку вносят по 3 капли разбавленного раствора крови и 5% раствора трихлоруксусной кислоты. Смесь перемешивают и добавляют 5 капель о-толуидина. Пробирку помещают в кипящую водяную баню на 8-10 минут. Раствор приобретает зеленую окраску за счет образования продукта конденсации. Интенсивность окраски пропорциональна концентрации глюкозы в крови

Химизм процесса:

CHO

NH2

CH3

H3C

H+

CH3

+ 2

- H2O

CH2OH

D-глюкоза

о-толуидин

Наблюдения:

____________________________________________________________________

________________________________________________________________

Выводы:

____________________________________________________________________

________________________________________________________________

О п ы т № 3 . Качественная реакция на крахмал

Методика эксперимента. В пробирку поместить 0,5 мл 0,5% раствора крахмала и добавить туда 1 каплю сильно разбавленного раствора йода. Появляется синее окрашивание, которое исчезает при нагревании пробирки, и вновь образуется при ее охлаждении. Реакция обратима.

Химизм процесса:

I2 + (С6Н10О5)

иодокрахмал (синего цвета)

Наблюдение:

____________________________________________________________________

Сделайте вывод какой тепловой эффект наблюдается при образовании иодкрахмала?

____________________________________________________________________

О п ы т № 4 . Доказательство наличия нескольких гидроксильных групп в молекуле углеводов (проба Троммера).

Методика эксперимента. Взять две пробирки, в одну из которых добавить по 1 мл 1% раствора глюкозы, в другую - 1% р-ра сахарозы. В каждую из 2 пробирок добавить по 1 мл 10% раствора гидроксида натрия и 3-5 капель раствора сульфата меди. Встряхнуть содержимое пробирок. Углеводы за счет соседних гидроксильных групп образуют комплексное соединение синего цвета. Запишите химизм реакции.

____________________________________________________________________

Наблюдения:

____________________________________________________________________

Вывод:

____________________________________________________________________

О п ы т № 5 (а) Реакция Толленса (реакция «серебряного зеркала»).

Методика эксперимента. В тщательно вымытую пробирку прилить 0,5 мл 1 % раствора нитрата серебра, добавить по каплям 10% раствор аммиака до полного

растворения образующегося вначале осадка. К полученному раствору добавить1% раствора гидроксида натрия и мл 1% раствора глюкозы. Пробирку осторожно нагреть в пламени спиртовки, перемешивая содержимое. Если пробирка была обезжирена (обработана раствором спирто-эфирной смеси), то на ее стенках выделяется слой серебра (зеркало), в противном случае выпадает черный осадок. Реакция используется для изготовления елочных украшений.

Химизм процесса:

CHO

COOH

+ Ag + 4 NH3 + H2O

+ [Ag(NH3)2]OH

CH2OH

D-глюкоза

Наблюдения:________________________________________________________

__________________________________________________________________

Выводы:____________________________________________________________

__________________________________________________________________

О п ы т № 6 . Окисление по Феллингу

Методика эксперимента. В пробирку прилить 2 мл раствора реактива Феллинга: раствора Сu(ОН)2 в сегнетовой соли (Na,K-виннокислый). Нагреть жидкость до начала кипения и добавить к ней по каплям 1-2 мл 1% раствора одного из восстанавливающих углеводов (выбрать самим). Реакцию проводить до полного исчезновения синей окраски смеси и выделения красного осадка .

Химизм процесса:

CHO

COH

+ Cu(OH)2

Cu+2

CH2OH

COH

COOH

2 HO

H + CuOH

CH2OH

2 CuOH

Cu2O +H2O

Проделать такой же опыт с 1% раствором сахарозы.

Наблюдения:

____________________________________________________________________

_________________________________________________________________

Выводы:____________________________________________________________

____________________________________________________________________

Занятие 1.3.6. Нуклеиновые кислоты

Лабораторная работа № 13 Определение состава нуклеопротеидов

Для исследования используется гидролизат пекарских дрожжей. Нуклеопротеиды должны содержать белковую часть, нуклеиновые основания и углеводы (рибозу и дезоксирибозу), а также остатки фосфорной кислоты. Обнаружение указанных фрагментов молекулы позволить сделать заключение о присутствии нуклеопротеидов.

О п ы т № 1 . Биуретовая реакция на полипептиды и белки.

Методика выполнения эксперимента: К 5 каплям гидролизата приливают 10 капель 10% раствора гидроксида натрия, затем 2 капли 1% раствора сульфата меди.

Химизм процесса:

2 H3C HC

COOH + CuSO4

NaOH

H3C

H2N

NH2

Cu+2

NH2

CH CH3

Наблюдения по всем опытам сведите в общую таблицу (приведена ниже).

О п ы т № 2 . Образование серебряной соли пуринов (серебряная проба на пуриновые основания).

К 10 каплям гидролизата добавляют 10 капель раствора аммиака, затем добавляют 10 капель 2% раствора нитрата серебра. Содержимое пробирки перемешивать при стоянии не надо.

Химизм процесса:

<<< < Предыдущая 1 2 3 45 / 65 6 > Следующая >>>

Соседние файлы в предмете Биоорганическая химия

#
15.05.201780.98 Кб469Otvety_k_modulyu_2.docx
#
15.05.20174.58 Mб37Testy_k_MODULYu_3.doc
#
15.05.2017453.63 Кб55Testy_k_MODULYu__1.doc
#
15.05.2017328.19 Кб41Testy_k_MODULYu__2.doc
#
15.05.201791.39 Кб228Биоорг. Модуль2.Ответы.docx
#
15.05.2017720.4 Кб47Тетрадь для лабораторных.pdf
#
15.05.20173.51 Mб51Учебное пособие 2016.pdf