- •4.1. Перечень контрольных вопросов для самоконтроля знаний.
- •Методические указания по выполнению практической работы с полным регламентом протокола занятия и его оформлением
- •9.Программное обеспечение и Интернет-ресурсы
- •Аэробных бактерий
- •Физические методы культивирования анаэробов
- •Химический метод культивирования анаэробов
- •Биологический метод культивирования анаэробов (м-д Фортнера)
- •Биохимическое определение газообразных веществ при оценке протеолитической активности
Химический метод культивирования анаэробов
Эксикатор, на котором помещается один из поглотителей кислорода, например пирогалол. Крышка плотно притерта.
Пробирка Бюхнера с шаровидным расширением и шейкой внизу, куда также помещается поглотитель О2, а над шейкой устанавливается косячок с посевом. Пробка резиновая.
Приложение 4
Биологический метод культивирования анаэробов (м-д Фортнера)
Метод основан на одновременном посеве в чашку со средой, разделенной по диаметру канавкой, испытуемого материала или чистой выделенной культуры анаэробов и какого-либо штамма-аэроба – жадного потребителя кислорода (Bac. prodigiosum, Sarcina lutea– из воздуха).
Чашкaс посевом герметически закрывается с помощью утрамбованной ваты, пластилина или парафина, и становиться для инкубации в термостат.
Вначале в связи с присутствием в чашке О2бурно растут анаэробы.
Приложение 5
Биохимическое определение газообразных веществ при оценке протеолитической активности
Метод Сальковского для определения индола
Бульонную культуру микроорганизмов нагревают с 4 мл 10% серной кислоты, затем с 0,5 – 2 мл, 0,05 раствора азотисто-натриевой соли. Реактивы приливают по стенке пробирок.
Появление красно-фиолетового кольца указывает на наличие индола.
Определение индола по методу Эрлиха
Культуру выращивают на МПА, после чего делают густой посев в пробирки жидкой средой с казеином, нагретой до 30-35С0.
Пробирки инкубируют 2 часа в термостате, а затем добавляют сначала 5 мл раствора №1, а затем 5 мл раствора №2. Через 5 минут, при наличие индола, появляется красное окрашивание среды.
Раствор №1:
парадиметиламинобензальгид – 1г
Этиловый спирт (95о) - 95мл
Соляная кислота (удельный вес 1,19) -20мл
Раствор №2: насыщенный растворK2Cr2O2.
Определение сероводорода по методу Хоменко
К расплавленному МПА добавляют уксусно-кислый свинец, охлаждают до 45 0 C, добавляют яичный белок в количестве 2%, тщательно смешивают со средой, разливают по пробиркам и стерилизуют текучим паром (3 дня по 30 мин).
Посевы делают уколом. При наличии способности образовывать H2Sсреда по линии укола чернеет.