Модификационная изменчивость (длительная)

Вид изменчивости	Действующий фактор	Возможность реверсии
Лекарственная резистентность. Фильтрующаяся форма Диссоциация на S-и R- формы L- формы бактерий	Лекарственный препарат (антибиотик). Массивная антибиотикотерапия. Экстремальные условия. Антибиотики и прочие препараты	После многократных пересевов на оптимальнуюсреду. - « - После прекращения действия индуцирующего фактора (не всегда)

Приложение 3

ЭКСПЕРИМЕНТ ПО ВОССТАНОВЛЕНИЮ (РЕВЕРСИИ) ФИЛЬТРУЮЩИХСЯ ФОРМ БАКТЕРИЙ

- Приготовить фильтрат патологического материала (например, мочи), использовав бактериологический фильтр Зейтца,

• засеять чашки с МПА культурой Sarcina lutea,

- нанести фильтрат пипеткой или петлей на посев сарцины. Поставить в термостaт на 1-3 суток при +39 С⁰,

- учесть готовые результаты посева. Зарисовать колонии ревертанты на сарциновом газоне.

Приложение 4

Виды генотипической изменчивости

Вид изменчивости	Микробная модель компонента	Результат
Трансформация	Пневмококки в голодной среде: серотип I - живой, III- убитый ДНК пневмококка серотипIII и живой пневмококк Iсеротипа	Выделены из среды живые серотипыIиIII - « -
Трансдукция с лизогенной конверсией	Бактерии нетоксичные, бактериофаг из токсичных	Выделены токсичные бактерии
Генетическая половая рекомбинация (межвидовая)	Донор F^+E.coli селективные признаки Lac^+, Str^5. Реципиент F^- S.flexneri признаки Lac^-,Str^7	Генетические рекомбинанты Lac^+,Str^2

Приложение №5

СХЕМА ПОЛУЧЕНИЯ ПОЛОВЫХ ГЕНЕТИЧЕСКИХ РЕКОМБИНАНТ

• дизентерийные бактерии F^- - реципиент с главными селективными признаками:Lac^-,Str(r);

• кишечные палочки F⁺-донор с главными селективными признакамиLac⁺,Str(s);

• минимальная среда (голодная, солевая);

• стрептомицин в порошке;

• 1% раствор лактозы;

• эозин - метиленовый индикатор.

Этапы проведения эксперимента:

- стандартизация скрещиваемых культур по Пехову А. и Абидову А. РеципиентF^- -Iмлрд. мт/1 мл.

Донор - 250 млн. мт/мл,

• скрещивание культур путем приготовления бактериального кросса F⁺ : F^- в соотношении 4:1,

• инкубация в термостате для конъюгации, 1 час при +37С⁰,

• готовят минимальную среду с селективными добавками и индикатором: расплавить, остудить до +45С⁰, добавить 150 ЕД/мл стрептомицина, 1% лактозы и индикатор эозин 0,4 мг/мл +метиленовая синь 0,065 мг/мл,

• высевают на среду бактериальную смесь кросса и отдельно - исходные культуры на селективные среды,

• инкубировать в термостате при +37С⁰ 1-5 суток,

• учет-обнаружение и изучение половых гибридов. На селективной среде они вырастают только в виде цветных колоний, поскольку рекомбинанты унаследовали от донора признак Lact+, а от реципиента –Str(r).

СРАВНИТЕЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ УЧАСТНИКОВ ЭКСПЕРИМЕНТА

Свойства селективные	Дизентерийные бактерии(реципиент)	Кишечная палочка (донор)	Половой рекомбинант
Отношение к лактозе	Lac - не разлагают	Lac^+	Lac^+
Отношение к стрептомицину	Str(r) резистентны	Str(s) чувствительны	Str(r) резистентны
Наличие фактора фертильности	F^- - отсутствует	F^+ - имеется	F^+ или F^- вариабельно

Реципиент на селективной среде не растет по причине признака Lac^-,неспособности утилизировать единственного источника питания на голодной среде, а донор - из-за присутствия стрептомицина иStr(s).

Приложение 6