Основные плазмиды бактерий
Плазмиды - это автономно воспроизводящиеся, функционирующие и самостоятельно передаваемые гены, расположенные либо в цитоплазме (эписомы), либо интегрированы в хромосоме, кодирующие и реализующие определенные признаки.
Название плазмиды |
Функции плазмид |
Lis+ /Let+/ лизогении |
Профаг, ген потенциальной летальности бактерии |
tох+ токсигенности |
Определяет токсигенность |
Со1+ колициногении |
Бактериоциногения у E.coli |
Pest+ пестициногении |
Бактериоциногения у Y.pestis |
Наеm+ гемолитичности |
Гемотоксичность |
Приложение 7 полимеразная цепная реакция (пцр)
ПЦР - вариант рекомбинационной (гибридологической) диагностики, основанный на биосинтезе специфических локусов, повторяющих присутствующий в субстрате геном.
Принцип метода: Исследуемый материал подвергается специальной обработке, при которой происходит лизис клеток возбудителя с выходом ДНК. Часть материалапереносится в пробирку, содержащую смесь свободных мононуклеотидов, ДНК - полимеразу, праймер - уникальную последовательность нуклеотидов, присущую искомому возбудителю. Циклическое изменение температуры (30 циклов) позволяет осуществить репликацию определенного гена возбудителя ин витро. Этот процесс называется амплификацией, в результате которого количество специфической ДНКувеличивается в миллионы раз. Такие количества ДНК могут быть выявлены с помощью электрофореза в агарозном геле.
Приложение 8
ОПРЕДЕЛЕНИЕ МУТАГЕННОЙ АКТИВНОСТИ ХИМИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙМЕТОДОМ ЭЙМСА
Принцип метода: на чашку с минимальным агаром засевают газоном ауксотрофный штаммS.typhimurium(штамм Эймса). На газон накладывают стерильные диски изфильтрованной бумаги, пропитанные испытуемыми веществами и контрольными растворами мутагенов (этидиумбромид, нитрозогуанидин). Рост колоний ревертантов вокруг дисков будут наблюдаться только в том случае, если нанесенное на них вещество обладает мутагенной активностью.