1. ДНК в ядре и некоторых органоидах, а белки везде.

2. Опыты с ультрафиолетом НК с длиной волны =260нм, а белка = 280 нм. Мутагенное действие замечено при длине волны 260 нм

3. Методы изучения нуклеиновых кислот.

1. Гель-электрофорез

Применяется для разделения разноразмерных фрагментов.

2. ПЦР

Повышают температуру и происходит денатурация цепей, затем добавляют ферменты, понижают температуру= 2 двойные цепочки и т.д. используют в практических целях – диагностика вирусных инфекций, перинатальная диагностика.

3. Рестриктазный анализ

Основан на рестриктазах (молекулярные ножницы)– ферманты.

3группы:

1. Узнаёт точку и режет на значительномрассотянии от точки узнавания

2. Узнаёт и режет по точке

3. Узнаёт и режет на незначительном расстоянии от точки

С образованием липких концов. Анализ позволяет узнать нуклеотидный состав, получаются карты рестрикции, соответственно можно узнать взаимное расположение фрагментов ДНК.

4. Гибридизация

1. Рестриктазно-лигазный метод – соед. 2х фрагментов ДНК с липкими концами

2. Коннекторный метод – соед 2х концов с тупыми концами, иначально сделав их липкими

3. Блот – гибридизация за счёт использование ДНК зондов – ДНК с известным нуклеотидным составом, имеет метку, часто радиоактивную. Необходимо выделение ДНК из хромосомы, т.е в чистом виде.

4. Insitiтак же использование меток, но в отличии от блот - г. ДНК в составе хромосом.

5. Секвенирование узнавание точного нуклеотидного состава

1. Химический необходимо большое количество копий, т.е ПЦР, а затем расщепление ДНК по одному основанию

2. Ферментативный

4. Строение днк. Альтернативные формы двойной спирали днк.

1. А – форма ( d=2,3нм, 1 виток 11-12п.н)

2. В- форма (описана Уотсоном и Криком)

3. С – форма

4. Д – форма

5. Е – форма

6. Z – форма (левозакрученная спираль)

7. Н – форма (3-ая спираль ДНК)

Переходят одна из другой, В составе ДНК есть полиндронные (тонетенот) участки, которые участвуют в образовании шпилек.

Формы ДНК – чаще всего двойная линейна, двойная кольцевая, одноцепочечная, необычности у вирусов.

Для ДНК характерна денатурация (расхождение цепей); повышение температуры – плавление. М.б ренатурация – отжиг

5. Типы рнк, их распространенность и локализация в клетке. Строение рнк на примере тРнк.

РНК одноцепочечная, редко 2ц-вирусы; всегда линейная, 4 вида нуклеотидов – АУГЦ, но м.б исключения; Углевод – рибоза.

1. рРНК 80-85%

прокариоты – 5s, 16s, 23s; эукариоты – 5s, 5,8s, 18s, 28s

2. тРНК 10-15%

cуществует около 100 видов. От 70-95 нуклеотидов в составе. Есть первичный уровень – последовательность; вторичный – напоминает лист клевера, на котором выделяют антикодон – последовательность 3х нуклеотидов, которые присоединяются к кодону иРНК по принцепукомплементарности, акцепторный участок (место присоединения определённого вида АК соответствующее его антикодону); третичная структура.

3. м(и)РНК менее 5%

1000-чи видов. Размеры разнообразны. Является матрицей для синтеза белка.

4. мцРНК (малая цитоплазматическая)

90-100видов нуклеотидов 10-ки видов. Функции неизвестны

5. мяРНК (малая ядерная)

65-100 нуклеотидов. Участвует в сплайсинге ДНК.

6. гяРНК)гетерогенная ядерная)

только у эукариот т.к в ядре. Известно 100 видов. Дина разнообразна. Смесь иРНК в впроцессинге

7. тмРНК (транспортная и матричная)

в цитоплазме тогда, когда рибосома не двигается на РНК

8. киРНК (короткая интерферирующая)

блокирует синтез белковых молекул, невозможна трансляция

РНК может подвергаться денатурации, ренатурации, м. соед РНК с ДНК, стабильность гибридных пар разная