- •Кафедра биохимии
- •Лекция № 1 Тема: Введение в биохимию. Ферменты: строение, свойства, локализация, номенклатура и классификация.
- •Сравнение каталитического действия ферментов и неорганических катализаторов
- •Строение ферментов
- •1. Оксидоредуктазы
- •2. Трансферазы
- •4. Лиазы
- •5. Изомеразы
- •6. Лигазы (синтетазы)
- •Кафедра биохимии
- •Лекция № 2 Тема: Медицинская энзимология
- •2 Курс.
- •I. Энзимопатология
- •1. Наследственных энзимопатий
- •2. Приобретенные энзимопатии
- •II Энзимодиагностика
- •2) Определение активности ферментов и их констант (Km, t, pH).
- •3) Определение концентрации органических веществ с помощью ферментов.
- •III Энзимотерапия
- •Кафедра биохимии
- •Лекция № 3
- •Тема: Регуляция активности ферментов в клетке.
- •Общие представления о гормонах и
- •Их роли в регуляции активности ферментов.
- •2 Курс.
- •1). Аллостерическая регуляция каталитической активности ферментов
- •III. Механизмы регуляции количества ферментов
- •Клеточная сигнализация
- •Рецепторы
- •Участие рецепторов в трансмембранной передаче сигнала
- •Регуляторные белки
- •Вторичные посредники (мессенджеры)
- •Ферменты
- •Трансмембранная передача информации с участием аденилатциклазной системы
- •Аденилатциклазная система активируется:
- •Инозитолтрифосфатная система активируется:
- •Трансмембранная передача информации с участием гуанилатциклазной системы
- •Трансмембранная передача информации с участием цитоплазматических и ядерных рецепторов
III. Механизмы регуляции количества ферментов
Количество фермента в клетке зависит от скорости его синтеза и распада, процессов необходимых для обновления фермента. Синтез и распад ферментов регулируется независимо. Наиболее изучен механизм регуляции синтеза ферментов на уровне транскрипции, который осуществляется определенными метаболитами, гормонами и рядом биологически активных веществ.
Индукция – запуск синтеза ферментов под действием специфических низкомолекулярных соединений – индукторов. Например, у бактерий ферменты синтезируются только при наличии для них субстратов, которые являются для этих ферментов индукторами (у E. coli лактоза индуктор β-галактозидазы).
Индуцируемые ферменты – ферменты, концентрация, которых зависит от добавления индукторов (органоспецифические ферменты).
Конститутивные ферменты – ферменты, концентрация которых постоянна и не регулируется индукторами (ферменты гликолиза, синтеза РНК и т.д.).
Базовый уровень – концентрация фермента при отсутствии индуктора. При индукции базовый уровень фермента может быть превышен от 2 до 1000 раз.
Репрессия – остановка синтеза фермента под действием репрессора (точнее корепрессора).
Дерепрессия – возобновление синтеза ферментов или после удаления из среды репрессора или при истощении его запасов.
Часто один индуктор или репрессор регулируют синтез сразу нескольких ферментов участвующих в одном метаболическом пути. Гены этих ферментов собраны в оперон.
Оперон – участок молекулы ДНК, который содержит информацию о группе функционально взаимосвязанных структурных генов и регуляторную зону, промотор, контролирующую транскрипцию этих генов. Индукция и репрессия синтеза ферментов оперона называется координированной.
Координированная индукция – все ферменты, кодируемые генами оперона, индуцируются одним индуктором.
Координированная репрессия – остановка синтеза ферментов оперона одним репрессором.
В промоторе оперона имеется участок оператор, необходимый для присоединения репрессора. Репрессор синтезируется с гена-регулятора.
1). Индукция оперона. Репрессор присоединяется к оператору и препятствует присоединению к промотору РНК-полимеразы – транскрипции мРНК нет. Индуктор, присоединяясь к репрессору, вызывает отделение последнего от оператора, РНК-полимераза присоединяется к промотору и начинается транскрипция мРНК с оперона. С этой мРНК синтезируются сразу несколько ферментов.
рисунок
2). Репрессия оперона. Репрессор не присоединяется к оператору самостоятельно. Присоединение к оператору репрессора происходит только в комплексе с корепрессором. Комплекс репрессор-корепрессор присоединяясь к оператору, препятствует присоединению РНК-полимеразы к промотору, что блокирует транскрипцию мРНК с оперона и синтез ферментов.
рисунок
Катаболическая репрессия – более выгодный субстрат окисления ингибирует ферменты окисления менее выгодного субстрата.
Распад ферментов идет под действием гидролитических ферментов, регуляция этого процесса мало изучена.
Клеточная сигнализация
В многоклеточных организмах поддержание гомеостаза обеспечивают 3 системы:
1). нервная, 2). гуморальная, 3). иммунная.
Регуляторные системы функционируют с участием сигнальных молекул.
Сигнальные молекулы – это органические вещества, которые переносят информацию.
К сигнальным молекулам относятся гормоны, нейромедиаторы, факторы роста, цитокины и эйкозаноиды.
ЦНС для передачи сигнала использует нейромедиаторы, гуморальная система – гормоны, иммунная - цитокины.
Гормоны – сигнальные молекулы беспроводного системного действия.
Отличием истинных гормонов от других сигнальных молекул, является то, что они синтезируются в специализированных эндокринных клетках, транспортируются кровью и действуют дистантно на ткани мишени.
Гормоны по строению делятся: на белковые (гормоны гипоталамуса, гипофиза), производные аминокислот (тиреоидные, катехоламины) и стероидные (половые, кортикоиды). Пептидные гормоны и катехоламины растворимы в воде, они регулируют преимущественно каталитическую активность ферментов. Стероидные и тиреоидные гормоны водонерастворимы, они регулируют преимущественно количество ферментов.
Гормоны влияют на активность и количество ферментов в клетке не напрямую, а через каскадные системы (аденилатциклазную, гуанилатциклазную, инозитолтрифосфатную, RAS и т.д.), состоящие из:
-
рецепторов;
-
регуляторных белков (G-белки, IRS, Shc, STAT и т.д.).
-
вторичных посредников, (messenger - посыльный) (Са2+, цАМФ, цГМФ, ДАГ, ИТФ);
-
ферментов (аденилатциклаза, фосфолипаза С, фосфодиэстераза, протеинкиназы А, С, G, фосфопротеинфосфотаза);
Необходимость каскадных систем связана с тем, что, во-первых, водорастворимые гормоны не проходят клеточную мембрану, во-вторых, эти системы обеспечивают усиление первичного сигнала гормонов в миллионы раз. В результате даже одна молекула гормона способна активировать миллионы ферментов и вызвать метаболический эффект.
Водонерастворимые гормоны самостоятельно проходят клеточные мембраны и реализуют свой эффект с участием цитоплазматических и ядерных рецепторов.