4. Азотометричні методи

Азотометричні методи визначення загального|спільного| білка сироватки засновані на визначенні кількості білкового азоту, що утворюється при руйнуванні амінокислот, що входять до складу білків. Вперше|уперше| метод був запропонований Кьельдалем в 1883 році. У методі Кьельдаля, що в даний час|нині| представляє|уявляє| в цілому|загалом| історичний інтерес, азот, що міститься|утримується| у складі білків, окисляють|окислюють| до іона амонія і його кількість визначають титруванням точним розчином соляної кислоти. Крім того, іон амонія може бути визначений реактивом Несслера, манометричним методом після|потім| перетворення іона амонія на молекулярний азот під дією гіпоброміту або за допомогою оптичного тесту Варбурга за участю ферменту глутаматдегідрогенази|. Виходячи з того, що білки з|із| біологічних об'єктів містять|утримують| в середньому 16 % азоту, отриману|одержувати| в результаті|унаслідок,внаслідок| аналізу кількість азоту умножають|множать| на коефіцієнт 6,25. Історично використовують чинник|фактор| 6,25, хоча його величина залежить від білкового складу досліджуваного зразка|взірця|. Для окремих фракцій білка в сироватці або плазмі величина чинника|фактору| коливається|вагається| в діапазоні від 5,69 до 6,52.

Недоліком|нестачею| азотометричних| методів є|з'являється,являється| тривалість і складність процедури, навіть при тому, що аміак, що утворюється в реакції, можна визначати ферментативним методом. Автоматизація дозволяє використовувати цей метод у ряді випадків як метод порівняння із-за його достатньої точності і відтворюваності.

5. Гравіметричні методи

Гравіметричні (вагові) методи визначення загального|спільного| білка сироватки засновані на висушуванні білків до постійної маси і зважуванні на аналітичних вагах. Методи трудомісткі і в даний час|нині| практично не використовуються для визначення загального|спільного| білка сироватки. Гравіметричний метод продовжує використовуватися в деяких лабораторіях для визначення Фібриногену в плазмі крові.

6. «Преципітаціонні» методи

«Преципітаціонні» методи визначення загального|спільного| білка засновані на зниженні розчинності білків і утворенні суспензії зважених частинок|часток,часточок| під впливом різних агентів. Про вміст білка в досліджуваній пробі судять або по інтенсивності світлорозсіювання| (нефелометричний| метод аналізу), визначуваного числом світлорозсіювальних частинок|часток,часточок|, або по ослабленню|ослабінню| світлового потоку суспензією, що утворилася (турбідиметричний| метод аналізу).

Результати даної групи методів залежать від безлічі чинників|факторів|: швидкості змішування реактивів, температури реакційної суміші, значення рН| середовища|середи|, присутності сторонніх з'єднань|сполучень,сполук|, способів фотометрії. Ретельне дотримання умов реакції сприяє утворенню стабільної суспензії з|із| постійним розміром зважених частинок|часток,часточок| і отриманню|здобуттю| відтворних результатів. «Преципітационниє» методи для визначення білка в сироватці крові не отримали|одержували| визнання|зізнання| і знайшли застосування|вживання| при визначенні білка в сечі, спинномозкової рідини і багатьох індивідуальних білків з використанням специфічних антитіл.