Спектрофотометрия.

Это — физико-химический метод исследования растворов и твёрдых веществ, основанный на изучении спектров поглощения в ультрафиолетовой (200—400 нм), видимой (400—760 нм) и инфракрасной (>760 нм) областях спектра. Основная зависимость, изучаемая в спектрофотометрии зависимость интенсивности поглощения падающего света от длины волны. Спектрофотометрия широко применяется при изучении строения и состава различных соединений (комплексов, красителей, аналитических реагентов и др.), для качественного и количественного определения веществ (определения следов элементов в металлах, сплавах, технических объектах). Приборы спектрофотометрии — спектрофотометры.

Спектрофотометрия — физико-химический метод исследования растворов и твёрдых веществ, основанный на изучении спектров поглощения в ультрафиолетовой (200—400 нм), видимой (400—760 нм) и инфракрасной (>760 нм) областях спектра. Основная зависимость, изучаемая в спектрофотометрии зависимость интенсивности поглощения падающего света от длины волны. Спектрофотометрия широко применяется при изучении строения и состава различных соединений (комплексов, красителей, аналитических реагентов и др.), для качественного и количественного определения веществ.

Спектрофотометрия - метод анализа, основанный на измерении спектров поглощения в оптической области электромагнитного излучения, обусловленного электронными пе­реходами: а-о*, п-о*, п-к* (переходы перечислены в порядке уменьшения энергии, необходимой для их осуществления).

Различные электронные переходы в молекулах веществ требуют неодинаковой энер­гии, а поэтому полосы поглощения располагаются при разных длинах волн.

Наибольшей энергии требует о-а* переход. Он связан с возбуждением внутренних электронов и соответствует поглощению в дальней УФ-области (Х<200 нм). Такие пере­ходы наблюдаются у метана, этана и других насыщенных углеводородов. Из числа токси­кологически важных соединений такой переход а-о* характерен для соединений:

Люминесцентный метод анализа

Это совокупность методов анализа, основанных на явлении люминесценции. Наибольшее распространение получил анализ, основанный на фотолюминесценции исследуемого вешества. Pегистрируют люминесценцию визуально, фотографически или фотоэлектрически с помощью спектрографов, фотометров и спектрофотометров. Качественный люминесцентный анализ проводят по спектрам люминесценции. Разновидность качеств. люминесцентного анализа - сортовой анализ, который позволяет обнаруживать невидимые при обычном освещении различия в исследуемых объектах и используется для установления сортности и качества стекол, семян, с.-х. продукции, для определенияминералов в породах, поверхностных и сквозных дефектов выявления подделок, в криминалистике и т.д.  Этот метод основан на явлении люминесценции. Наибольшее распространение получил анализ, основанный на люминесценции, возбуждаемой УФ-излучением. Для этой цели применяют ртутно-кварцевую лампу типа ПРК и светофильтры УФС-3 и УФС-4, кото­рые почти полностью поглощают видимый свет, но пропускают ультрафиолетовый.

По характеру люминесцентного свечения различают фосфоресценцию - свечение, продолжающееся более или менее длительное время после отключения источника воз­буждения свечения и флуоресценцию - свечение, прекращающееся сразу после удаления источника возбуждения.

Интенсивность флуоресценции зависит от присутствия в растворе посторонних ве­ществ. Некоторые вещества способны гасить ее, и в их присутствии интенсивность флуо­ресценции падает. Например, присутствие ионов хлора значительно ослабляет флуорес­ценцию хинина. Некоторые вещества вызывают усиление флуоресценции, например сер­ная кислота. Способность некоторых ядовитых веществ флуоресцировать используется в химико-токсикологическом анализе с целью их обнаружения. Эта реакция отличается высокой чувствительностью.

Если органическое соединение обладает кислотными или основными свойствами, его люминесценция меняется в зависимости от рН среды. Например, в кислой среде в присутствии серной кислоты хинин имеет голубую флуоресценцию, в щелочной среде (рН=9) хинин флуоресцирует фиолетовым цветом. Продукты окисления хинина имеют желто-зеленую флуоресценцию.

Флуоресценция используется для обнаружения пахикарпина. Продукты ею окис­ления флуоресцируют красно-оранжевым цветом. Для секуринииа характерна желто коричневая флуоресценция.

Способность ядовитых веществ флуоресцировать или поглощать УФ-лучи исполь­зуется при определении в биологических объектах лекарственных и наркотических ве­ществ с помощью хроматографии в тонком слое сорбента. При облучении пластинки УФ-излучателем возможно обнаружение некоторых ядовитых веществ. Флуоресцировать мо­гут и трупные яды, выделяемые из объекта вместе с веществами кислотного и основного характера. Например, при облучении УФ-лучами норгарман дает темно-синюю флуорес­ценцию, триптамин - желто-зеленую. Поэтому использование люминесцентного анализа сочетается с применением других подтверждающих способов и реакций обнаружения.

Люминесцентный метод широко используется также в иммунохимическсом анализе для обнаружения и определения многих лекарственных и наркотических вещеществ.