Тема:

Методы исследования химического состава и метаболизма клеток и тканей

Для изучения химического состава биологических структур —

локализации веществ, их концентрации и динамики в процессах метаболизма применяют специальные методы исследования:

•

•

•

метод радиоавтографии; методы иммунофлюоресцентного анализа.

цито- и гистохимические методы;

Метод радиоавтографии

основан на введении в исследуемый объект соединения, "меченого" радиоактивным атомом и выявлении места его включения путем фотографической регистрации излучения.

Этим методом можно определять, например, скорость включения меченых аминокислот в белки, образование нуклеиновых кислот, обмен йода в клетках щитовидной железы и др.

Схема метода радиоавтографии

а — введение меченого 3Н-тимидина (3НТ); б — включение его в ДНК ядра; в —клетка покрыта фотоэмульсией, гранулы которой засвечиваются β-частицами; г— гранулы серебра над местами расположения изотопа в клетке; д — то же, вид сверху

Методы иммуно-флюоресцентного анализа

выявление расположения определенного антигена внутри клетки путем получения комплексов между антителами, конъюгированными с красителями, и анализируемыми антигенами.

Моноклональные антитела прикрепляются строго только к своим мишеням эпитопам и могут доставлять к ним определенные молекулы. На снимке: участок ткани, в котором разные типы клеток окрашены четырьмя видами моноклональных антител, несущих флуоресцентные маркеры разных цветов

На снимке: Моноклональные антитела, атакующие специфический антиген.

Гистохимические методы

Сфотографирован

участок гиппокампа крысы.

Светлые круги - ядра, а темный ободок вокруг них - цитоплазма, в которой содержится РНК. В отростках РНК нет, поэтому окружающее пространство не окрашено вовсе.

ЦИТОХИМИЯ-

раздел цитологии, изучающий химический состав клеточных структур, синтез, распределение и активность химических соединений в клетке, их изменения в связи с функциями клетки.