Основные методы цитохимии:

1.Микрохимия

2.Микроспектрофотометрия

3.Микроинтерферометрия

4.Цитофотометрия окрашенных клеток

5.Флуоресцентная микроскопия и цитофлуорометрия

1.Микрохимия

- выделение определенных клеточных структур путем дифференциального центрифугирования и осуществление химического анализа их состава.

2.Микроспектрофотометрия

- определение веществв с помощью микроскопа- спектрофотометра непосредственно в клетке по характерному спектру поглощения (напр., нуклеиновых кислот по поглощению пуринами и пиримидинами УФ излучения).

3.Микроинтерферометрия

- оценка массы клетки по сдвигу фазы поляризованного света. После экстракции определенного вещества можно измерить его содержание в клетке. Микроспектральные и интерферометрические методы позволяют проводить хим. анализ живых клеток.

Интерферограммы на экране телевизионного интерферометра

Внешний вид цифрового телевизионного интерферометра Zygo Mark II

4. Цитофотометрия окрашенных клеток - это качественное и(или) количественное определение вещества в клетке путем фотометрии окрашенного продукта, который образуется при взаимодействии анализируемого вещества с красителем или др. веществом.

Один из точных методов цитофотометрии Реакция Фёльгена

Способ гистохимического выявления дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК) в клетках животных и растительных организмов, а также у бактерий. Состоит из двух этапов:

кислотный гидролиз (обычно 8–12 мин) затем препараты помещают в светло- желтый реактив Шиффа.

По образующемуся при таком взаимодействии красно- фиолетовому продукту реакции судят о наличии ДНК

5.Флуоресцентная

микроскопия и цитофлуориметрия.

Осуществляют реакцию вещества с флуоресцирующим маркером и затем по интенсивности флуоресценции определяют количество этого вещества.