Реактивы и химические реакции, используемые при анализе лекарственного сырья.

Для определения подлинности лекарственного сырья до­полнительно к внешнему осмотру нередко проводят прос­тейшие качественные химические реакции.

Реакции обычно проводят или с 10% водным извлече­нием из сырья (иногда используют и более слабые извле­чения, например, на алкалоиды, дубильные вещества и др.) в пробирках, фарфоровых чашках, на часовых стеклах, или непосредственно с сухим сырьем, нанося каплю ре­актива на излом, грубый порошок или слегка счищен­ную скальпелем поверхность объекта (корень, кору и т. д.).

Реакции на алкалоиды

Для испытания на алкалоиды готовят извлечение из сы­рья в 1—2% соляной или уксусной кислоте (2 г сырья с 50 мл кислоты кипятят в течение 10 минут). Полученное извлечение фильтруют и разливают в пробирки по 1—2 мл. К 1 мл извлечения прибавляют по каплям (2—3 капли) соответствующие реактивы.

Реакции на алкалоиды бывают двух типов: реакции оса­ждения и реакции с окрашиванием.

Реактивы, осаждающие алкалоиды.

1. Кремневольфрамовая кислота (1% водный раствор).

2. Фосфорномолибдсновая кислота (1—3% водный рас­твор).

3. Фосфорновольфрамовая кислота (1—3% водный рас­твор).

4. Реактив Вагнера. 1,27 г йода, 2 г йодида калия и 100 мл воды.

5. Реактив Майера. К 1,358 г раствора сулемы в 60 мл воды приливают раствор 5 г йодида калия в 10 мл воды и разбавляют водой до 100 мл.

6. Реактив Драгендорфа. Раствор 1: 0,85 г нитрата вис­мута основного растворяют в 40 мл воды и 10 мл уксусной кислоты. Раствор 2: 8 г йодида калия растворяют в 20 мл воды; смешивают равные объемы раствора 1 и 2. К 10 мл полученной смеси добавляют 100 мл воды и 20 мл уксусной кислоты.

7. Бром-калия бромид. 20 г бромида калия растворяют в воде и разбавляют водой до 100 мл. Добавляют бром до появления осадка.

8. 10% раствор танина в воде.

9. Пикриновая кислота (водный раствор 1:10). Перечисленные реактивы образуют с извлечениями из сырья, содержащего алкалоиды, различной интенсивности осадки, мутные или опалесцирующие растворы, что зависит от количества алкалоидов в сырье и от чувствительности ре­актива.

Осадки обычно белые или окрашенные от реактива (желтоватые, желтовато-бурые при реактивах, содержащих йод).

Реактивы, окрашивающие алкалоиды.

1. Серная и азотная кислоты, чистые концентрированные (в определенных условиях разбавленные). Часто применяет­ся такая пропись: 10 капель разбавленной азотной кислоты (10 капель 30% азотной кислоты на 100 мл воды) в 20 г концентрированной серной кислоты. Пользуются также сме­сью из 10 капель сильно разбавленной соляной кислоты и 20 мл концентрированной серной кислоты. Эти реактивы со многими алкалоидами образуют различное окрашивание, часто желтое, иди разные оттенки красного, голубого, фио­летового или зеленого. Окраска получается более устойчи­вая с чистыми алкалоидами, с извлечением из сырья она менее устойчива.

2. Ванадин-серная кислота. Ванадат аммония 0,1 части, концентрированная серная кислота (чистая) 20 частей. Ок­рашивает стрихнин в сине-фиолетовый цвет, атропин — в желто-красный, аконитин — в светло-коричневый, бруцин — в кроваво-красный, колхицин и кониин — в зеленый, хи­нин — в сине-зеленый.

3. Молибден-серная кислота. Молибденовокислый натрий 0,01 г, концентрированная серная кислота 1 мл (реактив — свежеприготовленный). Дает специфические окрашивания с различными алкалоидами.

4. Формалин-серная кислота. 5 мл концентрированной серной кислоты, 1 капля формалина или 0,2 мг формалина растворяют в 10 мл концентрированной серной кислоты, Реактив используется при установлении наличия морфина и его производных, которые дают фиолетовое окраши­вание.

5. Пергидроль-серная кислота. На 1 мл пергидроля 10 мл концентрированной серной кислоты. Реактив готовят при охлаждении. От этого реактива получается окраска: с хи­нином — лимонно-желтая, с эметином — оранжево-красная. Многочисленные специфические реакции на отдельные алкалоиды использу­ются в научных исследованиях.

Реакции на гликозиды

Гликозиды — очень разнообразный по химической природе класс соединений. Общим для них является наличие сахар­ного компонента, который легко отщепляется под воздей­ствием энзимов или при кипячении с разбавленными кис­лотами. После гидролиза можно обнаружить присутствие сахара.

Кислотное расщепление гликозидов. Готовят 2—4% водное извлечение из сырья. Обычно берут 2 г исследуемого сырья и 25 мл воды, кипятят в течение 2—3 минут; после охлаждения фильтруют. По 2—3 мл фильтрата наливают в две пробирки; в одну пробирку добавляют 1—-2 мл 10% соляной кислоты, в другую — воду и кипятят в течение 1— 2 минут. В каждую пробирку прибавляют раствор Фелинга (по 2,5 мл первого и второго) и нагревают до кипения. При наличии гликозидов происходит реакция восстановления ме­ди: в пробирке с соляной кислотой появляется кирпично-красный осадок закиси меди.

Реактив Фелинга состоит из двух растворов, приго­товленных отдельно.

1. 34,66 г перекристаллизованного сульфата меди рас­творяют в воде, подкисленной 2—3 каплями разведенной серной кислоты, и разбавляют водой до 500 мл.

2. 173 г сеньетовой соли (натрия — калия тартрат) и 50 г едкого натра растворяют в 400 мл воды, после охла­ждения разбавляют водой до 500 мл. Реактивом служит смесь равных объемов двух растворов. Смесь готовят перед употреблением.

Проба «кислотное расщепление гликозидов» позволяет открыть гликозиды в лекарственном сырье. Она основана на освобождении полуацеталыюго гидроксила в сахарной части гликозида (после его гидролиза), за счет которого идет вос­становление окиси меди до закиси.

Гликозиды дают осадки с баритовой водой (5 г гидрата окиси бария взбалтывают со 100 мл воды) и с уксуснокис­лым свинцом (состав реактива см. ниже). Однако с этими веществами подобно реагируют алкалоиды, дубильные ве­щества, поэтому реакции не являются специфичными для гликозидов.

Реакции на арбутин

Обычно готовят 5% водное извлечение из сырья. 0,5 г грубоизмельченного сырья или порошка кипятят с 10 мл воды в течение 5—10 минут, после охлаждения фильтруют.

1. К 1 мл охлажденного фильтрата добавляют малень­кий кристаллик сульфата закисного железа; при этом появ­ляется красно-фиолетовое, затем фиолетовое окрашивание, переходящее в темно-фиолетовый осадок. Реакция позво­ляет открыть арбутин в присутствии дубильных веществ (толокнянка, брусника, бадан). 2. К 1 мл фильтрата добавляют 4 мл раствора аммиака

и 1 мл 10% раствора фосфорно-молибденово-кислого натрия в соляной кислоте, образуется синее окрашивание (обе про­бы на арбутин проводят в фарфоровой чашке).

Реакции на антрагликозиды

1. Готовят 5_— 10 % водное извлечение из сырья путем кипячения в течение 3—5 минут, после охлаждения филь­труют. К 1—2 мл фильтрата прибавляют 3—5% раствор ед­кого натра или едкого кали; образуется вишнево-красное окрашивание.

2. 0,1 г порошка сырья кипятят в течение нескольких минут с 10 мл спиртового раствора едкого натра и фильт­руют. По охлаждении фильтрат подкисляют разведенной соляной кислотой до слабокислой реакции и взбалтывают с 10 мл эфира: при этом эфир принимает желтое окраши­вание. 5 мл отделенного эфирного извлечения взбалтывают с равным объемом раствора аммиака, последний принимает устойчивое вишнево-красное окрашивание (эмодины). Жел­тый цвет эфирного слоя при этом не изменяется (хризофанол). Реакции основаны на взаимодействии щелочи с гидроксилами производных антрахинона. Последняя реакция дает возможность дифференцировать отдельные производ­ные антрахинона, что зависит от различной растворимости в органических растворителях и их отношения к раствору аммиака.

Реакции на дубильные вещества

Готовят извлечения из сырья путем нагревания на ки­пящей водяной бане 2 г измельченного сырья с 50 мл воды в течение 30 минут, при частом помешивании. Полученное извлечение процеживают через вату, разливают в пробирки по 1—2 мл и добавляют различные реактивы.

Концентрированный раствор закисного железа (сульфат или хлорид) раствор готовят па холоде; при употреблении разбавляют не менее чем в 10 раз. Употребляется свежепри­готовленный раствор. При добавлении указанного раствора к извлечению, содержащему дубильные вещества, получает­ся темное окрашивание (подогревание до 00° значительно ускоряет реакцию). Соли трехвалентного железа дают с дубильными веществами синие, сине-черные, зеленовато-черные осадки (см. реакции на отдельные группы дубиль­ных веществ).

Общие реакции. 1) Осаждение солями алкалоидов. Мож­но использовать различные алкалоиды. Часто пользуются 1 % раствором хлористоводородного хинина. 2) Осаждение солями тяжелых металлов. Можно использовать раствор ос­новного ацетата свинца (3 г ацетата свинца растворяют в 10 мл воды, прибавляют около 1 г окиси свинца до полу­чения прозрачного раствора). 3) Осаждение раствором же­латины (0,5—1% водный раствор добавляют по каплям. В избытке реактива осадок растворяется. Со всеми назван­ными реактивами дубильные вещества образуют соответ­ствующие комплексные соединения — танаты, выпадающие в осадок.

Реактивы на отдельные группы дубильных веществ.

1) 1% раствор железоаммониевых квасцов;

2) Раствор же­леза окисного — хлорида или сульфата — (30 г хлорида окисного железа растворяют в воде и разбавляют водой до 1 л). При добавлении этих реактивов получаются соответ­ствующие окрашивания с последующим выпадением осад­ков. Группа гидролизуемых дубильных веществ образует черно-синее окрашивание; группа конденсированных — чер­но-зеленое.

3) Осаждение дубильных веществ реактивом Стиасни (формалин и 35% раствор соляной кислоты). Этот реактив осаждает только конденсированные дубильные ве­щества (производные пирокатехина), а гидролизуомыс та-ниды при этом не осаждаются.

4) Реакция с бромной во­дой. Конденсированные дубильные вещества дают осадок, гидролизуемые — не осаждаются.

5) Ацетат свинца в уксус­нокислой среде осаждает гидролизуемые дубильные веще­ства, а конденсированные остаются в растворе (10 г аце­тата свинца растворяют в воде, прибавляют уксусной кис­лоты до получения прозрачного раствора и разбавляют во­дой до 100 мл).

6) Аммония сульфат осаждает только гид­ролизуемые дубильные вещества, а конденсированные ос­таются в растворе.

Реакция на сапонины

Эта группа соединений легко открывается по реакциям пенообразования и гемолиза.

1. При сильном встряхивании 5—10% отвара сырья, со­держащего сапонины, образуется сильная и стойкая пена. 2. 5—10% отвар в 0,9% растворе хлорида натрия при смешивании с 2% взвесью дефибринированной крови в изо­тоническом растворе хлорида натрия дает гемолиз (крас­ный прозрачный раствор).

Из лекарственного сырья при нагревании сапонины мо­гут быть извлечены спиртом (70—80°), лучше метиловым; при охлаждении сапонины выпадают, образуя белый оса­док. Повторным (2—3-кратным) переосаждением получает­ся чистый сапонин, который растворяют в воде. С таким водным раствором сапонина можно провести ряд реакций.

1. С концентрированной серной кислотой (осторожное прибавление по каплям к раствору сапонина) образуется желтое окрашивание, переходящее в красное, а затем (че­рез 10—15 минут) — в фиолетово-голубое. Лучше получается реакция с применением смеси равных количеств концен­трированной серной кислоты и 96° этилового спирта и с до­бавлением по каплям раствора окисного хлорида железа (реакция Лафона); она может быть проведена на сре­зах.

2. От прибавления раствора уксуснокислого свинца (2— 5%) сапонины выпадают в виде нерастворимого осадка (по­добная реакция получается с баритовой водой, окисью маг­ния).

3. Реакция по Бипдаусу основана на получении стероидов сапонинов. Спиртовой насыщенный раствор сапонина смешивают со спиртовым насыщенным раствором холесте­рина. Через некоторое время образуются игольчатые крис­таллы.