7.2. Количественное определение мочевой кислоты в моче

Мочевая кислота является конечным продуктом катаболизма аденозина и гуанозина (пуринового обмена). Выводится из организма почками с мочой и в меньшей степени через желудочно-кишечный тракт. Будучи слабой кислотой, мочевая кислота присутствует в биологических жидкостях как в недиссоциированной форме, так и в виде мононатриевой соли. Плохо растворима в воде.

Роль мочевой кислоты в патологии связана с ее низкой растворимостью.

Мочевая кислота осаждается в виде кристаллов урата натрия. Отложение этих кристаллов в суставах вызывает подагру. Мочевая кислота может откладываться в почках в виде камней.

Гиперурекемия наблюдается при обильном потреблении пищи, содержащей нуклеотиды; при усиленном синтезе пуриновых нуклеотидов; при врожденных нарушениях резервных «путей спасения» аденина и гипоксантина (синдром Леха-Найана (Lesch-Nyhan Syndrome) и большей частью вследствие нарушения почечной экскреции с мочой.

Цель работы

Определить суточное выделение мочевой кислоты с мочой и сравнить с нормальными величинами.

Принцип метода

Метод основан на способности мочевой кислоты восстанавливать в щелочной среде бесцветный фосфорно-вольфрамовый реактив в соединение синего цвета. При титровании этого соединения раствором красной кровяной соли K₃[Fe(CN)₆] раствор обесцвечивается. Израсходованное количество красной кровяной соли соответствует количеству мочевой кислоты.

Выполнение работы (см. приложение )

К 2,5 мл свежевзятой мочи прибавляют 1мл 30% раствора NaOH и 1 мл фосфорно-вольфрамового реактива. Раствор приобретает синее окрашивание.

Затем раствор титруют щелочным раствором красной кровяной соли (0,0015М) до обесцвечивания. Отмечают объем красной кровяной соли, пошедшей на титрование (V в литрах).

Расчет

Количество мочевой кислоты в 2,5 мл мочи составляет 0,0015 ^. V моль, в 1 л – 0,0015 ^. 400 ^. V = 0,6 ^. V моль/л. Зная относительную молекулярную массу мочевой кислоты (Mr = 168), рассчитываем ее массу в 1 литре: m = 0,6 ^. V ^. 168 = 100,8 ^. V г. Принимая суточный диурез 1,5 л, получают величину суточной экскреции мочевой кислоты с мочой:

100,8 ^. V ^. 1,5 = 151,2 ^. V г/сутки,

конечная формула расчета:

экскреция мочевой кислоты = 0,0015· V·400·168·1,5 г/сутки,

где 0,0015 – концентрация K₃[Fe(CN)₆] в моль/л;

V – объем K₃[Fe(CN)₆] в л, пошедший на титрование;

168 – молярная масса мочевой кислоты в г/моль;

1500 – суточный диурез мочи в мл;

2,5 – исходная проба мочи в мл.

Норма: 0,3 – 1,2 г/сутки.

Выводы

Тестовые задания по теме: «Распад и синтез нуклеотидов»

1) Ответить на каждый вопрос однозначно: «да» или «нет»

1. Азотистые основания пищи используются для биосинтеза нуклеиновых кислот нашего организма.

2. Источником NH₂-группы при синтезе ГМФ из инозиновой кислоты является глутаминовая кислота.

3. Конечный продукт распада аденозина у человека - мочевая кислота.

4. Концентрация мочевой кислоты в крови человека - в норме 0,2 г/ л.

5. Регуляция синтеза пиримидиновых оснований осуществляется по типу обратной связи.

6. Азот пиримидиновых оснований выводится из организма в основном в виде мочевой кислоты.

7. Участвует ли аспарагин в биосинтезе пуринового ядра?

8. Может ли ЦМФ образоваться из УМФ?

9. Является ли β-аланин конечным продуктом катаболизма ТМФ в организме человека?

10. Участвует ли карбамоилфосфат в синтезе пиримидиновых нуклеотидов?

11. Применяется ли ингибитор ксантиноксидазы для лечения подагры?

12. Только ли тиоредоксин участвует в восстановлении рибозы до дезоксирибозы?

2) Выбрать один правильный ответ

Источником NH2-группы при синтезе АМФ из инозиновой кислоты является: мочевина аспарагиновая кислота аспарагин карбамоилфосфат ион аммония

Конечный продукт катаболизма ТМФ в организме человека: мочевая кислота β-аминоизомасляная кислота инозиновая кислота креатин β-аланин

3) Найти соответствие Y (буква) и X (цифра) в следующей цепи превращений:

	X		X
Гипоксантин		Y		Мочевая кислота

1. дегидрогеназа 2. оксигеназа 3. оксидаза 4. гидроксилаза

А. инозин Б. аденин В. гуанин Г. аллантоин Д. ксантин