Инструкция к практическому занятию : “ Влияние активаторов и ингибиторов на активность амилазы слюны”

Принцип работы:Активаторы стимулируют действие ферментов, но в отличие от коферментов не принимает участия в реакции.

Активаторы некоторых ферментов : для амилазы слюны- хлорид натрия, для пепсина- ионы водорода хлористоводородной кислоты, для липазы- желчные кислоты, для аденозинтри-фосфатазы- ионы магния и марганца.

Активаторы и ингибиторы влияют на активный центр фермента, способствует образованию его или блокированию. Ингибиторы нередко являются продуктами конечных реакций какого – либо биохимического процесса.

Работа 1.

Ход работы: Разводят 1 мл слюны в 10 раз. В три пробирки наливают по 1 мл слюны, разведенной в 10 раз и ставят по схеме опыт:

№№ Фермент Исследуемое Количество Субстрат

пп (амилаза), слюна соединение (р-р крахмала)

разв. 1:10

1. 1мл дист.вода 0,5мл 1мл

2. 1мл 1% хлорид натрия 0,5мл 1мл

3. 1мл 1% сульфат меди 0,5мл 1мл

1. Все пробирки инкубируют 10 минут при температуре 25 градусов.

2. Во все пробирки добавляют по 1 капле раствора йода, перемешивают, наблюдают окраску и определяют, в какой пробирке действует активатор или ингибитор. Целесообразно в каждую пробирку добавить воды, примерно, 2 мл и перемешать. Окраска будет более наглядной.

3. Записать выводы.

Работа 2. Выполните лабораторную работу по индивидуальному заданию, полученному у преподавателя.

ВЫВОДЫ:

Подпись преподавателя.

Приложение 1.

Граф логической структуры темы «Регуляция активности ферментов. Активаторы и ингибиторы ферментов»

КАТАЛИЗИРУЕМАЯ

РЕАКЦИЯ

СУБСТРАТ, ИНДИКАТОР,

ПРОДУКТ

ИНГИБИТОРЫ

АКТИВАТОРЫ

УСЛОВИЯ ПРОТЕКАНИЯ

СУБСТРАТ

ВЕЩЕСТВА, ВЛИЯЮЩИЕ НА АКТИВНОСТЬ

ФЕРМЕНТЫ

КОФЕРМЕНТНАЯ ФУНКЦИЯ ВИТАМИНОВ

Актуальность темы.

Значение витаминов для нормальной жизнедеятельности организма в настоящее время выяснено и заключается в их участии в построении ферментов. В составе ферментов витамины образуют небелковую часть фермента – кофермент. Без кофермента сложный фермент не может функционировать, т.к кофермент, как правило, непосредственно контактирует с субстратом и является переносчиком электронов, атомов или групп атомов (аминогрупп, метильных групп и др.), тем самым участвует в катализе определенных типов метаболических реакций. Знание коферментной функции витаминов необходимо для последующего изучения метаболизма органов и тканей в курсе биохимии, а также при изучении фармакологии, клинических и гигиенических дисциплин.

Теперь ознакомьтесь с целями занятия, продумайте их, усвойте необходимость их изучения.

Общая цель.

Уметь обосновать биологическую функцию витаминов как структурных компонентов ферментов для использования на последующих кафедрах при объяснении нарушений метаболизма и их клинических проявлений при недостатке (избытке) витаминов в организме, а также для понимания принципов применения антивитаминов в лечебной практике.

. Конкретные цели: Исходный уровень знаний-умений:

Уметь:

1.Интерпретировать структуру витаминов и их превращение в кофермент.	1.Интерпретировать структуру мононуклеотидов, сложных эфиров (каф.биоорганической химии).
2.Анализировать причины нарушения синтеза коферментов.	2.Обнаруживать пируват по обраованию гидрозонов и интерпретировать его структуру (каф. биорганической химии).
3.Анализировать роль витаминов в обменных реакциях.	3. Обнаруживать лактат и интерпретировать реакцию дегидрирования (каф.биорганической химии).
4.Интерпретировать метаболические нару- шения при отсутствии витаминов.
5.Интерпретировать конкурентное действие антивитаминов.

Для проверки исходного уровня знаний-умений предлагается выполнить ряд заданий.

Задания для самопроверки и самокоррекции исходного уровня знаний-умений.

Задание 1. Студенту предложили синтезировать сложный эфир, предоставив следующие вещества: спирт, кислоту, альдегид, амин. Что он использовал, выполнив задание?

А. Кислоту и амин

В. Только кислоту

С. Только спирт

Д. Спирт и альдегид

Е. Спирт и кислоту

Задание 2. Лабораторный анализ после гидролиза вещества выявил в гидролизате аденин, рибозу и фосфорную кислоту. Какой структуры исходное вещество?

А. Пептид

В. Нуклеозид

С. Мононуклеотид

Д. Пентозофосфат

Е. Гликозаминогликан.

Задание 3. Для определение пирувата его нужно превратить в гидразон по реакции:

СН₃ NH-NH ₂

I I NO₂

С=О + O₂ N

I → гидразон

СООН

Какими функциональными группами реагируют вещества?

А. -СООН пирувата -NO₂ гидразина

В. О

II

-С- пирувата -NO₂ гидразина

C. -СООН пирувата -NН₂ гидразина

Д. О пирувата -NН₂ гидразина

II

-C-

Е. О пирувата гидразина

II

-С-