Методика отримання накопичувальних культур молочнокислих бактерій:
Свіже молоко розлити в пробірки, наповнюючи їх на 2/3 об'єму|обсягу| і закрити|зачиняти| пробками|корками| (при використанні стерильного молока до нього додати|добавляти| кислого молока).
Пробірки помістити в термостат з|із| температурою 30-35°С|.
Після|потім| утворення|утворення| в молоці твердого згустку можна починати|розпочинати| дослідження і визначення молочної кислоти.
Для дослідження приготувати тимчасові або постійні препарати. У останньому випадку препарат висушити, зафіксувати на спиртівці або сумішшю спирту з|із| ефіром (1:1) і пофарбувати|фарбувати| метиленовою синню або карболовим фуксином.
Препарат розглянути|розглядувати| при великому збільшенні 15x40 або 15x90.
Замалювати молочнокислі бактерії: Streptococcus| lactis|, Lactobacillus| bulgaricus|, Lact|. plantarum|, Lact|. fermentum| і молочний гриб Oidium| lactis|.
Визначити молочну кислоту в кислому молоці якісною реакцією - отриманням|здобуття| оцтового|оцтового| альдегіду: кисле молоко відфільтрувати через паперовий фільтр. До 10 мл| фільтрату додати|добавляти| 1 мл| 10%-го| розчину сірчаної кислоти. Нагрівати до кипіння і додати|добавляти| по краплях|краплинах| 20%-ий| розчин марганцевокислого| калію. Молочна кислота майже вся переходить в оцтовий|оцтовий| альдегід, який виявляється на паперовому фільтрі, змоченому аміачним розчином азотнокислого срібла. При нагріванні колби оцтовий|оцтовий| альдегід випаровується, і при взаємодії з|із| аміачним розчином срібла, викликає|спричиняє| почорніння фільтрувального паперу.
1.3. Маслянокисле бродіння
Маслянокисле бродіння – це процес розкладу цукру на масляну кислоту, вуглекислий газ та водень у результаті життєдіяльності маслянокислих бактерій.
Маслянокисле бродіння вуглеводів є одним з етапів кругообігу вуглецю в природі. В анаеробних умовах здійснюється ферментативне розщеплювання вуглецьвмісних органічних сполук з утворенням масляної кислоти і АТФ.
Встановлено, що масляна кислота в невеликих концентраціях, разом з іншими органічними кислотами, що часто утворюються в ґрунті мікроорганізмами, є фізіологічно активною сполукою, яка стимулює ріст рослин.
Деякі види маслянокислих бактерій є азотфіксаторами, які поліпшують азотний режим ґрунтів. Інші використовуються в силосуванні кормів. Якщо в силосі накопичується велика кількість масляної кислоти при неправильній упаковці силосної маси, це призводить до зміни смакових якостей силосу і порушення травлення у тварин.
Збудники бродіння – маслянокислі бактерії – строгі (облігатні) анаероби, спорогенні, термофіли, рухливі, грампозитивні представники роду Clostridium (С. pasteurianum, С. acetobutylicum, C.butyricum, C.pectinovorum (рисунок 13). Характерними фізіологічними властивостями маслянокислих бактерій є здатність розкладати крохмаль до глюкози і відкладати в своїх клітинах гранульозу.
1 2
Рисунок 13 – Збудник маслянокислого бродіння Clostridium pasteurianum:
1 –вегетативні клітини, 2 - спорові клітини