2.9.4. Линия ооцитов китайского хомячка (клетки cho)
В 2007 г. авторы из Аргентины (университет Ла-Платы) опубликовали данные по цитогенетическим повреждениям (аберрациям хромосом и микроядрам) у потомков клеток CHO, подвергавшихся воздействию рентгеновского излучения в дозах 10 и 50 мГр [AS18]. Основные результаты представлены на рис. 2.9.5.
Аргентинские исследователи, авторы работы [AS18], связали возможные механизмы выявленных эффектов с РИНГ. В особенности это касается микроядер, поскольку клетки с подобными нарушениями не жизнеспособны.
Из обсуждения работы [AS18] следует, что аргентинцы оказались несколько озадаченными тем, что в большинстве исследований РИНГ in vitro, выполненных другими авторами, дозы были гораздо выше, чем в их опытах. Тем не менее, аргентинцы попытались привести ссылки, которые свидетельствовали бы о доказанности РИНГ и при малых дозах любого излучения тоже. Как и авторы из России и стран СНГ, пытающиеся сделать аналогичные попытки в последние годы (см. выше подразделы 2.4.1 и 2.4.4), аргентинцы сразу же «попали пальцем в небо».
Рисунок 2.9.5. Отсроченные цитогенетические повреждения в 4–16-й генерациях потомков облученных в дозах 10 и 50 мГр клеток CHO [AS18]. Звездочки — различные уровни достоверности отличий от контроля. (В работе [AS18] сходная зависимость была зарегистрирована и по показателю отстроченных анафазно-телофазных нарушений.)
В их публикации есть следующая фраза [AS18]:
«Во множестве работ сообщается об индукции хромосомной нестабильности малыми дозами радиации. Для различных типов клеток, таких как лимфоциты, HPV-G трансфецированные кератиноциты, CHO и других есть свидетельства отсроченных повреждений хромосом после воздействия γ- или рентгеновского излучения (0,1–12 Гр) или α-частиц (Holmberg et al. 1998, Bortolleto et al. 2001, Mothersill et al. 2000, Little et al. 1997, Ponnaiya et al. 2004)». (“A great variety of papers have reported the induction of chromosomal instability by low dose radiation exposure...”)
Нам известны все цитированные аргентинцами работы, и мы должны сказать, что никаких доз в 0,1–0,2 Гр излучения с низкой ЛПЭ там нет. В (Holmberg et al., 1998) [AH20] и (Bortolleto et al., 2001) [AB25] изучена РИНГ в лимфоцитах при дозах 1–3 Гр. Дозы облучения клеток CHO в работе (Little et al., 1997) [AL23], как и в других подобных работах этих же авторов, составляют 0,5–12 Гр. Насколько нам известно, никогда Дж. Литтл не публиковал никаких эффектов РИНГ для доз в 0,1–0,2 Гр радиации с низкой ЛПЭ.
В (Ponnaiya et al., 2004) [AP23] исследовано действие α-частиц в дозах, действительно, от 0,1 до 1 Гр, но ведь это не рентгеновское и не γ-излучение...
Единственные авторы из цитированных аргентинцами, которые описали нечто в плане РИНГ для малых доз γ-излучения — это К. Мазерсилл с сотрудниками. Их работы 2000–2002 г. на иммортализованных вирусом папилломы кератиноцитах человека (клетки HPV-G), где имелись эффекты РИНГ для доз от 5–10 мГр [AM39, AM46, AS23], подробно рассмотрены выше в разделе 2.9.2. Однако аргентинские авторы в [AS18] приводят почему-то совсем другую, более раннюю работу (Mothersill et al., 2000) [AM38], где минимальная доза составляла 0,5 Гр... Ну, совсем как Н.Б. Ахматуллина из Казахстана (см. выше раздел 2.4.1).
Можно видеть, что попытки утверждать о «множестве работ» про РИНГ при дозах порядка 0,1–0,2 Гр рентгеновского или γ-излучения исчерпываются единичным зарубежным исследованием К. Мазерсилл с соавторами (которое к тому же неверно процитировано) на аномальной линии клеток. Подобно тому, как в российской радиобиологии все исчерпывается единичным исследованием И.И. Пелевиной с сотрудниками на нестабильных раковых клетках HeLa.
Что же касается собственно объекта исследования аргентинских авторов — конкретной линии клеток CHO, то, несмотря на получение их исходно из Коллекции клеточных культур США [AS18], данный штамм кажется слишком радиочувствительным. Так, сразу после облучения в столь малых дозах, как 10 и 50 мГр, выявлено слишком большое увеличение частоты микроядер — почти в 2–3 раза, вкупе с повышенной частотой различных типов аберраций хромосом [AS18]. Известно, однако, что при воздействии редкоионизирующего излучения в дозах порядка 10–50 мГр на различные клетки млекопитающих обычно наблюдается индукция адаптивного ответа по цитогенетическим повреждениям [РК25]. Более того, дозы в 30–50 мГр обладают радиоадаптирующим действием и по критерию частоты микроядер [РП6, РЧ2]. На раковых (а потому нестабильных) клетках HeLa доза в 30 мГр не приводила к какому-либо ощутимому увеличению частоты микроядер [РЧ2].
Далее. На фибробластах китайского хомячка (клетки V79) было показано, что количество клеток с аберрациями хромосом намного, в 6–8 раз превышает количество клеток с микроядрами, поскольку микроядерный текст гораздо менее чувствителен и информативен по сравнению с аберрационным [РШ3]. Но даже по аберрациям хромосом, как известно, для дозы в 10 мГр излучения с низкой ЛПЭ какое-либо достоверное повышение не зарегистрировано, в том числе и для столь радиочувствительных клеток, как лимфоциты [AP13, AL27, AL28, AL29] (см. выше рис. 1.3.1).
А здесь имеется некая линия клеток CHO, исследованная аргентинскими авторами, которые никак не комментируют ее аномально высокую радиочувствительность [AS18]. Понятно, что возникают сомнения, но не в корректности аргентинского исследования как такового, а в том, насколько нормальной были условия и использованный конкретный клеточный штамм.
Кроме того, не следует забывать и о том, что ранее для клеток CHO другими авторами РИНГ не была продемонстрирована для доз менее 1 Гр по самым разным показателям (см. выше табл. 2.6.1). Это многочисленные работы одного из основоположников исследований РИНГ — Дж. Б. Литтла с сотрудниками (J.B. Little; см. выше подраздел 2.4.2). Никаких малых доз радиации с низкой ЛПЭ, применительно к индукции РИНГ в клетках CHO, мы в работах Дж. Б. Литтла с соавторами не обнаруживаем.