- •Глава 1. Физиологические аспекты старения...................... 10
- •Глава 2. Характеристика эндогенных геропротекторов
- •Введение
- •Глава 1
- •Структурно-функциональные изменения в организме при старении
- •Профилактика возрастной патологии
- •Геропротекторы
- •Глава 2
- •Многоступенчатая очистка активной субстанции от примесей
- •2.1. Физико-химические свойства
- •Молекулярная масса компонентов нуклеопротеиновых комплексов
- •Содержание сиаловых кислот в нуклеопротеиновых комплексах, выделенных из различных тканей
- •Содержание белка и нуклеиновых кислот в нпк, выделенных из различных тканей
- •2.2. Состав
- •Аминокислотный состав цитаминов
- •Содержание минеральных веществ в нуклеопротеиновых комплексах
- •Содержание микроэлементов нуклеопротеиновых комплексах
- •2.3. Антиоксидантные и геропротекторные свойства
- •Химический состав нуклеопротеиновых комплексов
- •Содержание витаминов в нуклеопротеиновых комплексах
- •Влияние нуклеопротеиновых комплексов на продолжительность жизни мышей
- •2.4. Тканеспецифические свойства
- •Глава 3
- •3.1. Эмбриотоксические и тератогенные свойства
- •3.2. Безопасность в отношении приемных белков
- •3.3. Безопасность в отношении вирусов и протоонкогенов
- •Глава 4
- •4.1. Характеристика больных
- •Распределение больных дисциркуляторной энцефалопатией по полу и возрасту
- •4.2. Эффективность применения церебрамина
- •Эффективность применения церебрамина у больных дисциркуляторной энцефалопатией
- •Динамика субъективных показателей у больных дисциркуляторной энцефалопатией
- •Динамика показателей выполнения корректурной пробы больными дисциркуляторной энцефалопатией
- •Динамика биоэлектрической активности головного мозга у больных дисциркуляторной энцефалопатией
- •Динамика изменения альфа-индекса у больных дисциркуляторной энцефалопатией
- •Глава 5 Применение геропротекторов для профилактики
- •5. 1. Характеристика больных
- •5.2. Исследование эффективности применения корамина
- •Динамика субъективных показателей у больных ишемической болезнью сердца
- •Динамика изменения показателей минерального обмена в крови больных ишемической болезнью сердца
- •Динамика показателей эхокардиографии у больных ишемической болезнью сердца
- •Динамика показателей велоэргометрии у больных ишемической болезнью сердца
- •Глава 6
- •6.1. Характеристика больных
- •6.2. Исследование эффективности применения эпифамина
- •Динамика субъективных показателей у больных с климактерическим синдромом
- •Динамика изменения содержания гормонов гипофиза в сыворотке крови больных с климактерическим синдромом
- •Глава 7
- •Динамика субъективных показателей у больных обменно-алиментарным ожирением с сопутствующей гипертонической болезнью
- •Показатели функционального состояния сердечно-сосудистой системы у больных обменно-алиментарным ожирением с сопутствующей гипертонической болезнью
- •Биохимические показатели в периферической крови больных обменно-алиментарным ожирением с сопутствующей гипертонической болезнью
- •Динамика субъективных показателей у больных обменно-алиментарным ожирением с хроническим панкреатитом
- •Динамика показателей гемоцитограммы у больных обменно-алиментарным ожирением с хроническим панкреатитом
- •Динамика биохимических показателей в периферической крови у больных обменно-алиментарным ожирением с хроническим панкреатитом
- •Динамика показателей углеводного обмена у больных обменно-алиментарным ожирением с хроническим панкреатитом.
- •Заключение
3.3. Безопасность в отношении вирусов и протоонкогенов
Оценка контаминации НПК вирусами и функционально активными протоонкогенами была проведена методом фенольно-детергентной экстракции нуклеиновых кислот из препарата с последующим электрофорезом в 1% агарозном геле в трис-ацетатном буфере (окрашивание бромистым этидием) [Мазин А. В. и соавт., 1990].
Результаты исследования НПК представлены на рис. 12 и 13. На рис. 12 в крайних дорожках справа и слева располагается маркер молекулярной массы — ДНК фага лямбда, обработанная эндонуклеазой Hind III. Во второй дорожке слева находится нативная ДНК, выделенная фенольно-детергентным методом из слизистой оболочки желудка человека (операционный материал). На электро-фореграмме видно, что нативная ДНК человека располагается в виде дискретной полосы выше фрагмента ДНК фага лямбда с молекулярной массой 23 тысячи пар оснований. В дорожках с 3-й по 14-ю расположены образцы НПК 12 наименований, выделенных из различных органов и тканей животных. Как видно на рисунке, эти образцы выглядят в виде шлейфов с молекулярной массой от О до 23 тысяч пар оснований.
На рис, 13 представлены результаты обработки образцов НПК нуклеазой SI (Fermentas). В дорожках 1, 3, 5 и 7 находятся не обработанные нуклеазой образцы НПК (церебрамина, офталамина, эпифамина, хондрамина), а в дорожках 2, 4, 6 и 8 — те же образцы, обработанные нуклеазой S1. На рисунке видно уменьшение интенсивности шлейфов во всех обработанных нуклеазой образцах ниже фрагмента ДНК фага лямбда с молекулярной массой 2 тысячи пар оснований. Это свидетельствует о том, что ДНК с молекулярной массой ниже 23 тысяч пар оснований содержит практически по всей длине значительное количество одноцепочечных участков или находится в одноце-почечной форме.
Полученные результаты исследования позволяют утверждать, что нуклеиновые кислоты, содержащиеся в цитаминах, представляют собой продукты глубокой деградации ДНК и РНК, которые не могут иметь матричной или инфекционной активности.
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15
Рис. 12. Электрофорез нуклеопротеиновых комплексов
в 1 % геле агарозы
Дорожки: 1 — ДНК фага лямбда, обработанная эндонуклеазой Hind III;
2 — нативная ДНК, выделенная фенольно-детергентным методом из слизистой оболочки желудка человека (операционный материал);
3— церебрамин; 4 — офталамин; 5 — эпифамин; 6 — хондрамин; 7 — тимусамин; 8 — просталамин; 9 — корамин; 10 — гепатамин;
11 — тесталамин; 12 — панкрамин; 13 — овариамин; 14 ~ тирамин; 15 — ДНК фага лямбда, обработанная эндонуклеазой Hind III
Рис. 13. Электрофорез нуклеопротеиновых комплексов в 1% геле агарозы до и после обработки нуклеазой S1
Дорожки: 1 — церебрамин; 2 — церебрамин, обработанный нуклеазой S1;
3 — офталамин; 4 — офталамин, обработанный нуклеазой S1; 5 — эпифамин;
6 — эпифамин, обработанный нуклеазой S1; 7 — хондрамин', 8 — хондрамин,
обработанный нуклеазой S1, 9 — ДНК фага лямбда, обработанная
эндонуклеазой Hind III
Таким образом, анализ технологии получения нуклео-протеиновых комплексов, выделенных из различных органов и тканей животных, а также установленная экспериментально степень деградации нуклеиновых кислот исключают возможность наличия в исследуемых препаратах жизнеспособных вирусов или функционально активных протоонкогенов [Феннер Ф. и соавт., 1977; Маниатис Т. и соавт., 1984].
Всестороннее изучение возможного неблагоприятного действия выделенных из различных органов и тканей животных биологически активных веществ показало полную безопасность их применения, гарантированную технологией производства нового класса препаратов, что позволило приступить к проведению клинического изучения эффективности применения цитаминов для лечения и профилактики возрастной патологии. Клинические исследования проводили в ведущих клиниках страны в соответствии с требованиями, предъявляемыми к проведению клинических испытаний лекарственных средств [Бабаян Э. А., Уткин О, Б., 1982].
Эффективность геропротекторного действия цитаминов оценивали на основании динамики показателей субъективного состояния пациентов, функционального состояния сердечно-сосудистой, эндокринной и центральной нервной систем организма, показателей углеводного, липидноро и минерального обмена [Коркушко О. В. и соавт., 2002].