1.3.1.2 Оформление работы
Полученные результаты записывают в таблицу 1.
Таблица 1
№ образца |
v0, мл |
A, мл |
В, мл |
С глюкозы Мг/мл |
|
|
|
|
|
1.3.2 Опыт 2. Рефрактометрическое определение молочного сахара
Углевод молока – лактоза (молочный сахар). В молоке лактоза содержится в α- и β- форме. Обе формы могут переходить одна в другую, причем α- форма обладает меньшей растворимостью, чем β- форма. При температуре 200С в молоке содержится лактозы в форме α- около 40%, в форме β- 60%.
Лактоза имеет асимметрические атомы углерода, поэтому вращает плоскость поляризации вправо. Удельное вращение при 200С составляет 52,5.
Лактоза
Длительное кипячение молока или нагревание его выше 1000С вызывает появление бурой окраски благодаря образованию меланоидинов. Они образуются при повышенной температуре в результате реакции между аминокислотами белков молока и карбонильной группой молочного сахара.
Под влиянием ферментов бактерий лактоза сбраживается, образуя (в зависимости от вида бактерий) молочную кислоту, спирт, углекислый газ, масляную кислоту и другие соединения.
Сущность рефрактометрического метода состоит в том, что луч света, проходя через молочную сыворотку, отклоняется от прямолинейного пути на больший или меньший угол в зависимости от состава сыворотки. В молочной сыворотке на отклонение луча влияет, главным образом, молочный сахар, поэтому изменение угла преломления луча, проходящего через рефрактометр, определяет концентрацию молочного сахара.
Приборы и реактивы: рефрактометр, водяная баня, колбы с обратным холодильником, стеклянная трубка, вата, пипетки на 5 мл, 4%-ный раствор хлористого кальция.
1.3.2.1 Методика выполнения работы
Пипеткой отмерить в пробирку 5 мл исследуемого молока, прибавить 5-6 капель 4%-ного раствора хлористого кальция. Пробирки закрыть пробками с обратным холодильником и поместить на 10 минут в баню с кипящей водой. Вынув пробирки из бани, их содержимое охладить до 17,50С, при этом обращают внимание на то, чтобы капли конденсирующейся влаги не оставались на стенках пробирки.
Затем открыть пробку и осторожно втянуть сыворотку в стеклянную трубку, нижний конец которой закрыт ватой для фильтрации сыворотки. Трубку вынуть из пробирки и каплю прозрачной сыворотки нанести на поверхность нижней призмы рефрактометра, верхняя призма которого откидывается. Немедленно опустить верхнюю призму.
Специальным винтом устранить расплывчатость и радужную окраску светотени. После этого, передвижением окуляра добиться полного отчетливого совпадения границы света и тени с пунктирной линией. Произвести отсчет границы темного и светлого полей в рефрактометре, записав показатель преломления.
В соответствии со сделанным отсчетом по таблице 2 найти процентное содержание молочного сахара (по показателю преломления при 17,50С).
Таблица 2
Показатель преломления |
Содержание лактозы, % |
Показатель преломления |
Содержание лактозы, % |
Показатель преломления |
Содержание лактозы, % |
1,3390 |
3,01 |
1,3405 |
3,72 |
1,3420 |
4,49 |
91 |
3,06 |
06 |
3,77 |
21 |
4,54 |
92 |
3,11 |
07 |
3,82 |
22 |
4,59 |
93 |
3,16 |
08 |
3,87 |
23 |
4,64 |
94 |
3,21 |
09 |
3,93 |
24 |
4,69 |
95 |
3,26 |
10 |
3,98 |
25 |
4,74 |
96 |
3,31 |
11 |
4,03 |
26 |
4,79 |
97 |
3,36 |
12 |
4,08 |
27 |
4,84 |
98 |
3,42 |
13 |
4,13 |
28 |
4,89 |
99 |
3,47 |
14 |
4,18 |
29 |
4,95 |
1,340 |
3,52 |
15 |
4,23 |
30 |
5,00 |
01 |
3,57 |
16 |
4,28 |
31 |
5,05 |
02 |
3,62 |
17 |
4,33 |
32 |
5,10 |
03 |
3,67 |
18 |
4,38 |
33 |
5,15 |
04 |
3,70 |
19 |
4,44 |
34 |
5,20 |