Листериоз
Листериоз (Listeriosis) – бактериальная болезнь животных, вызываемая мелкой палочковидной бактерией и характеризующаяся поражением нервной системы, септическими явлениями, абортами и маститами. Болеет и человек.
Историческая справка. Впервые Lucet (1892) описал эту болезнь у кроликов. В 1926 г. Е. Murray и др. листериоз наблюдали у морских свинок и кроликов. D.А. Сill в 1931 г. установил болезнь у овец. Позднее она диагностирована у птиц, крупного рогатого скота и животных других видов. В Советском Союзе листериоз впервые диагностировал Т. П. Слабоспицкий у поросят в 1936 г.
Листериоз животных зарегистрирован в 56 странах мира. В Советском Союзе за период 1956 – 1988 гг. болезнь отмечали не территории всех союзных республик (за исключением Туркменской).
Возбудитель – Listeria monocytogenes – основной патогенный вид для животных и людей; Listeria ivanovii вызывает аборты у коров, овец, коз и может поражать людей; пять патогенных видов: L. seeligeri, L. innocua, L. welshimeri, L. grayi, L. murrayi.
Эту гетерогенность рода Listeria нужно учитывать при бактериологическом исследовании и выявлении истинной причины заболевания животных. Дифференцировать эти виды между собой можно по установлению патогенных свойств, серологических различий, гемолитических свойств и использованию биохимических тестов.
Морфологически листерии – небольшие грамположительные палочковидные бактерии (0,5,– 2х0,3 – 0,5 мкм) с закругленными краями, спор и капсул не образуют. Пподвижны в молодых культурах, выращенных при комнатной температуре. Под влиянием ряда факторов (пенициллин и др.) образуются L-формы, под действием ультрафиолетовых лучей возникают радиорезистентные, а под влиянием стрептомицина – стерептомицинорезистентные мутанты. Листерии – факультртивные аэробы, хорошо растут на обычных питательных средах (оптимальный рН 7,2 – 7,4). На МПА листерии образуют в первые сутки роста мелкие колонии в виде росинок, на МПБ появляется легкое равномерное помутнение. На твердых средах может происходить превращение типичных для листерий S-форм в R-формы колоний.
У L. monocytogenes различают две серологические группы, объединяющие различных в антигенном отношении листерий, что значительно облегчает диагностику Листерии сравнительно активны в биохимическом отношении. В отличие от рожистой палочки дают положительную пробу на каталазу: при добавлении к культуре листерий перекиси водорода последняя разлагается с выделением пузырьков кислорода.
С помощью листериозных бактериофагов производятся идентификация, типизация и обнаружение (в реакции нарастания титра фага) листерий.
L. monocytogenes патогенен для белых мышей, морских свинок, кроликов, пеструшек; L. ivanovii – для белых мышей. Для L. monocytogenes характерна положительнаz проба Антона – кератоконъюнктивит при нанесении культуры листерий на конъюнктиву глаза морской свинки или кролика.
Устойчивость. Листерии длительное время сохраняются во внешней среде, способны размножаться при благоприятных условиях, например, в мертвых тканях и в силосе при низкой температуре; до 4 мес сохраняются в отрубях, овсе, сене, мясо костной муке, животноводческих помещениях; длительное время не погибают в соленом мясе при низкой температуре. При хранении в холодильнике при температуре 4 С может происходить накопление листерий в продуктах питания (молоке, мясе и т. п.), при этом отмечалось повышение вирулентности листерий. Лиофильно высушенные листерии сохраняют жизнеспособность в течение 7 лет.
Листерии погибают от действия 5 %-ною раствора лизола или креолина через 10 мин; 2,5 %-ном раствора формалина или гидроокиси натрия – через 20 мин; раствора хлорной извести при содержании 100 мг активного хлора – в течение часа, 400 мг/л – за 10 мин. Нагревание до 100 С убивает листерии через 5 мин, до 75 – 90 С – через 1 ч.
Эпизоотологические данные. Восприимчивы к листериозу овцы, козы, крупный рогатый скот, свиньи, лошади, кролики, куры, гуси, утки, индейки. Болеют животные всех возрастов, но особенно чувствителен молодняк и беременные животные. Чаще всего болеют овцы, однако есть сообщения из других стран о преимущественном положении крупного рогатого скота.
Листерии выделены от многих видов диких животных. Отмечены случаи заболевания кошек, собак, обезьян, пушных зверей, форелей (в рыбопитомниках). Листерий выделяли из птиц иксодовых и гамазовых клещей.
Источник возбудителя инфекции при листериозе – больные животные, выделяющие листерии во внешнюю среду с истечением из носа, половых органов (при абортах), с абортированным плодом, калом, мочой, молоком (при листериозных маститах). Однако листерии могут длительное время находиться во внешней среде, размножаться при благоприятных условиях. Поэтому листериоз рассматривают как «сапроноз».
Распространять болезнь могут мышевидные грызуны. В циркуляции возбудителя листериоза между дикими (в частности, грызу нами) и домашними животными некоторую роль могут играть паразитические клещи.
Листерионосительство установлено (в желудочно-кишечном тракте) у клинически здоровых животных (и людей) по различным источникам – от 5 до 90%. Использование фекалий и навоза для удобрения полей и огородов приводит к контаминации овощей (для людей) и кормов (особенно силоса для животных). Часто сообщают о случаях болезни животных после поедания инфицированного силоса. В некоторых странах листериоз даже называют «силосной болезнью».
У овец болезнь носит сезонный характер и проявляется преимущественно с января по май. Это обусловлено активизацией факторов передачи возбудителя инфекции (миграция инфицированных грызунов к хранилищам кормов, преобладание силоса в рационе животных) и снижением резистентности организма животных. У крупного рогатого скота и свиней сезонности листериоза не обнаружено.
Листериоз проявляется спорадически, реже в виде эпизоотий. Отмечена стационарность болезни из-за длительной сохраняемости листерий во внешней среде, наличия животных-листерионосителей, а также существования природных очагов листериоза, где болезнь поддерживается в дикой фауне и различными путями передается сельскохозяйственным животным.
Патогенез. Распространение листерий по организму и клиническое проявление болезни зависят от способа заражения и состояния резистентности организма. Может возникнуть сепсис, поражение отдельных органов и систем, бессимптомное переболевание и длительное носительство. У взрослых животных чаще поражается центральная нервная система, а в период беременности – половые органы. У молодняка вследствие низкой общей устойчивости развивается сепсис. Иногда (чаще у взрослых животных) болезнь протекает бессимптомно, при этом животные длительное время остаются носителями листерий.
Листерии размножаются в месте первоначального внедрения, захватываются фагоцитирующими клетками, проникают в кровоток по организму. Незавершенный фагоцитоз способствует переживанию возбудителя внутри фагоцитов и внутриклеточному размножению.
Неблагоприятное воздействие на макроорганизм оказывают вырабатываемые листериями токсины (гемолизин, дермонекротический и моноцитопродуцирующий факторы) и ферменты (липаза, лецитиназа, каталаза), а также токсические субстанции самой бактериальной клетки. Отмечено иммунодепрессивное и токсическое действие цитоплазматической фракции. Поражения тканей и органов при листериозе характеризуются дегенеративными некродистрофическими изменениями, вследствие чего возникают нарушения регулирующего механизма нервной и эндокринной систем.
Течение и симптомы. Инкубационный период длится 7 – 30 дней. Болезнь протекает остро, подостро или хронически и проявляется в нервной, септицемической, смешанной, стертой, бессимптомной формах. У взрослого крупного рогатого скота и овец чаще поражается центральная нервная система. Болезнь начинается угнетением, вялостью, снижением аппетита. Через 3 – 7 дней появляются некоординированные движения, судороги, приступы буйства, парез нижней челюсти и отдельных групп мышц, потеря зрения, конъюнктивит, выпучивание глаз, стоматит. Температура тела при этом повышена или в пределах нормы. Длительность болезни до 10 сут.
У отдельных больных могут наблюдаться повышенная возбудимость, пугливость, тяжелые нервные расстройства, напоминающие бешенство. Больные животные погибают через 3 – 4 дня после по явления признаков поражения центральной нервной системы.
Другая форма болезни, характеризующаяся поражениями половой системы, проявляется абортами, задержанием последа и воспалительными явлениями в матке.
На почве листериоза у лактирующих животных может возникнуть мастит, который часто протекает субклинически и сопровождается длительным выделением (по некоторым данным до нескольких лет) возбудителя с молоком. Это особенно коварная форма болезни, которая часто не диагностируется, в то же время зарегистрированы эпидемии листериоза у людей, употребляющих в пищу молоко (Бостон, 1983) или мягкий сыр (Лос-Анжелес, 1985). Листериоз у телят и ягнят, как правило, протекает в виде септицемии, в отдельных случаях сопровождается поражением центральной нервной системы. Могут наблюдаться высокая температура тела, кератиты, конъюнктивиты, увеличение предлопаточных лимфоузлов и расстройство деятельности желудочно-кишечного тракта.
У взрослых свиней обнаруживают исхудание, анемию, снижение аппетита, нарушение координации движений, кашель, абсцессы в различных органах и тканях. У поросят поражается центральная нервная система: расстройство координации движений, своеобразная ходульная походка, манежные движения, мышечная дрожь, приступы судорог, возбуждение. Температура тела в начальный период заболевания обычно повышена, а затем снижается. При септической форме болезни отмечают угнетение, отказ от корма, слабость, затрудненное дыхание, посинение кожи в области ушей и живота, иногда – признаки катарального энтерита. Температура тела повышена. Длительность болезни до 3 сут. Поросята чаще всего погибают.
У птиц листериоз проявляется как септическое заболевание. Цыплята и молодые куры теряют аппетит, становятся малоподвижными; наблюдаются конъюнктивиты, учащение дыхания, прогрессирующая слабость, судороги, параличи и гибель через 3 – 5 дней.
Патологоанатомические изменения. Зависят от формы болезни и длительности ее течения. При нервной форме наблюдают отек головного мозга, кровоизлияния в мозговой ткани и отдельных внутренних органах. Гистологически при поражении бактериальными формами листерий обнаруживают менингоэнцефалит с инфильтрацией вещества мозга клетками моноцитарного типа и наличием периваскулярных муфт, а при поражении L-формами – энцефалопатия, сопровождающаяся дистронекротическими изменениями без пролиферации клеток (явление стаза в кровеносных сосудах, кровоизлияния, отек и дегенерация нейронов, нейрофагия).
При септической форме болезни регистрируют гиперемию или отек легких, катаральный гастроэнтерит, кровоизлияния в сердечной мышце и в паренхиматозных органах, увеличение селезенки, дегенеративные изменения и некротические очажки в печени, селезенки, почках, миокарде, увеличение лимфатических узлов. При поражении половых органов у самок обнаруживают эндометрит. При поражении матки находят десквамацию эпителия, поверхностные эрозии по вершинам складок слизистой оболочки, кровоизлияния, скопления лейкоцитов и гистиоцитов; в подслизистом и мышечном слоях – скопления полибластов и лимфоидных клеток.
Диагноз. Его ставят на основании комплекса эпизоотологических данных, клинических признаков болезни, патологоанатомических и паталогогистологических изменений, а также результатов лабораторного исследования (подробно изложено в «Методических рекомендациях по лабораторной диагностике листериоза животных и людей». М., 1987).
Решающее значение принадлежит бактериологическому исследованию – выделению листерий. Причем, если культура листерий в бактериальной форме не выделена, но есть обоснованные подозрения на листериоз, проводят дополнительное исследование на обнаружение L-формы листерий.
Серологические методы (РА, РСК, РНГА) можно применить для выяснения эпизоотической ситуации в хозяйствах, где диагноз на листериоз поставлен комплексным методом с выделением культуры возбудителя. Для исследования в лабораторию направляют трупы мелких животных или голову (головной мозг), кусочки печени, селезенки, почки, лимфатические узлы, пораженные участки легких, абортированный плод и его оболочки. Посылают свежий материал или консервированный в 30 %-ном растворе глицерина. Для прижизненной диагностики для серологического исследования посылают кровь или сыворотку крови от больных и подозрительных по заболеванию животных (желательно парные сыворотки, взятие с интервалом 7 – 14 дней), для бактериологического исследования – истечения из половых органов абортировавших самок, молоко из пораженных долей вымени при маститах или при подозрении на скрытый мастит.
Бактериологическая диагностика включает микроскопию исходного материала, посевы на питательные среды, идентификацию выделенных культур по культурально-биохимическим, тинкториальным и серологическим свойствам, а также постановку биологической пробы на лабораторных животных. Для ускоренной диагностики листериоза можно применять прямой и непрямой методы флюоресцирующих антител (ИФА). Листериозными бактериофагами 2А и 4А можно идентифицировать более 85% культур листерий и определить их серогрупповую принадлежность. Серологическую идентификацию листерий проводят путем постановки пластинчатой РА с поливалентной и серогрупповыми (первой и второй) листериозными агглюгинирующими сыворотками.
С целью выявления скрыто больных и листерионосителей сыворотки крови исследуют в РА, РСК и РНГА. Дифференциацией листериозных 19S-, 7S-антител удается отличить свежий инфекционный процесс от скрытого бактерионосительства и хронических малосимптомных форм болезни. При исследовании парных сывороток нарастание титра в 2 – 4 и более раза подтверждает диагноз на листериоз.
Дифференциальный диагноз. Дифференцировать листериоз необходимо от злокачественной катаральной горячки (по наличию при ней высокой температуры тела, кератитов, ринитов и стоматитов), от бруцеллеза, кампилобактериоза и трихомоноза (они характеризуются лишь абортами, задержанием последов, орхитами и эпидидимитами, а при листериозе на первом месте стоит поражение центральной нервной системы), от бешенства (по характерной клинической картине, агрессивности животного, наличию телец Бабеша – Негри). Болезнь Ауески отличается выраженной контагиозностью, быстрым распространением, лихорадкой и поражением дыхательных органов у взрослых свиней. При отечной болезни поражаются только поросята-отьемыши, отмечаются отеки в области головы. Ценуроз дифференцируют на основании обнаружения ценурозного пузыря в головном мозге и более длительного течения болезни. При постановке диагноза на листериоз нужно помнить о возможности смешанной инфекции.
Лечение. Чем раньше начато лечение, тем больше надежды на благополучный исход. Наилучший эффект дает предохранительная (превентивная) терапия животных условно благополучной группы (подозреваемых в заражении). Листерии – внутриклеточные паразиты и поэтому вызванная ими инфекция трудно поддается лечению.
Наиболее эффективным считается ампициллин или его сочетания с гентамицином. Эффективны также антибиотики тетрациклинового ряда, которые применяют в терапевтических дозах в течение 5 – 7 дней, при необходимости курс лечения повторяют через 5 – б дней. Для профилактики рецидивов болезни желательно вводить антибиотики несколько дней после исчезновения клинических признаков. Одновременно проводят симптоматическое лечение – назначают сердечные средства, а также препараты, улучшающие деятельность желудочно-кишечного тракта, – дезинфицирующие, вяжущие.
Иммунитет. При листериозе он изучен недостаточно. В организме переболевших животных накапливаются листериозные антитела. Наличие их устанавливают с помощью РА, РСК, РДП, РНГА. Однако гипериммунные листериозные сыворотки, несмотря на высокий титр антител и выделенные из них гамма-глобулины, не обладают достаточно выраженными превентивными свойствами. Кратковременным защитным действием обладают лишь макрофаги от гипериммунизированных животных, что свидетельствует о тканевом иммунитете при листериозе.
Изысканием вакцин при листериозе животных занимались многие исследователи, однако создать эффективную вакцину пока еще не удалось. Препараты из убитых (инактивированных) листерий не создавали невосприимчивость у животных. Наиболее широкое применение находят вакцины из живых ослабленных штаммов листерий – у нас вакцина из штамма АУФ, предложенная Казанским ветеринарным институтом; в Болгарии – вакцина, предложенная И. Ивановым. Однако эффективность применения этих вакцин в борьбе с листериозом требует обстоятельной проверки. Анализ многолетней вакцинации животных в ряде республик не выявил ее существенного влияния на заболеваемость животных листериозом (И. А. Бакулов, 1989).
Профилактика и меры борьбы. В целях профилактики листериоза необходимо комплектовать фермы животными из благополучных по листериозу хозяйств, карантинировать вновь поступающих, проводить клинический осмотр и при необходимости – лабораторные исследования животных.
При возникновении листериоза хозяйство объявляют неблагополучным, вводят ограничения на вывод животных, вывоз мяса и кормов. Животных подвергают поголовному клиническому осмотру, измеряют температуру тела. Больных с признаками поражения центральной нервной системы отправляют на убой. Подозрительных по заболеванию изолируют и лечат. Остальных вакцинируют или с профилактической целью обрабатывают антибиотиками. Для выявления листерионосителей и бессимптомно больных используют серологические реакции. Положительно реагирующих изолируют, лечат антибиотиками или отправляют на убой.
Дезинфекцию, дезинсекцию и дератизацию, а также обеззараживание навоза на неблагополучных фермах проводят согласно действующей «Инструкции по проведению ветеринарной дезинфекции, дезинвазии, дезинсекции и дератизации». Молоко от больных коров кипятят. Ограничения с хозяйства снимают через 2 мес после последнего случая выделения клинически больных животных и получения отрицательных результатов по РСК (РА, РНГА), а также проведения заключительной дезинфекции помещений и территории ферм. Особое внимание обращают на соблюдение работниками животноводства мер личной профилактики.