6 курс / Кардиология / СЕРДЕЧНАЯ НЕДОСТАТОЧНОСТЬ

Глава 6. Клинико генетические аспекты влияния полиморфизма...

ность оба белка подавляли клеточный рост, однако бо лее низкие антипролиферативные свойства установле ны у белка, содержащего пролин, в то время как проте ин, содержащий аргинин, продемонстрировал более быстрое эффекторное проапоптотическое действие. В других работах доказана высокая апоптотическая активность полиморфизма p53Arg за счет существен ного преобладания белка в митохондриях, а также бо лее высокой продукции (в 5–10 раз) белков апоптоза р21, MDM 2, каспаз 3 и 9 в первые 15 ч реакции. Таким образом, белок, кодируемый геном р53 и содержащий аргинин в кодоне 72, в большей степени индуцирует программируемую клеточную гибель, чем белок с про лином в этой же позиции [158, 213, 430].

Нами исследован полиморфный локус гена белка апоптоза р53 Arg72Pro экзон 4, который может быть представлен тремя генотипами (Arg/Arg, Arg/Pro,

Pro/Pro) в результате однонуклеотидной замены гуа нина (G) на цитозин (C) (CGC – аргинин, ССС – про лин).

Распределение частот встречаемости генотипов по лиморфного локуса Arg72Pro экзон 4 гена p53 в группе больных и в контрольной группе соответствовало ожи даемому при равновесии Харди–Вайнберга. Результа ты исследования гена p53 в группе контроля и в группе больных представлены в таблице 6.1.

Оказалось, что у больных ХСН по сравнению с груп пой контроля частота встречаемости генотипа Arg/Arg была выше (55,6 против 44,9%). Следовательно, с этим генотипом Arg/Arg полиморфного локуса Arg72Pro

251

252

Таблица 6.1

Частота встречаемости аллелей и генотипов полиморфного локуса G634C гена VEGF в группе больных ХСН и в группе контроля

Выборка				Аллели												Генотипы
				Arg				Pro			Arg/Arg						Arg/Pro				Pro/Pro
		n		%			n	%				n		%			n	%			n	%
Группа контроля
(n=136)	179			65,8		93		34,2			61			44,9		57		41,9		18		13,2
Группа больных
(n=277)	409			73,8		145		26,2			154			55,6		101		36,5		22		7,9

недостаточность Сердечная .Н.С Шилов ,.Н.Е Березикова ,.Т.А Тепляков

Таблица 6.2

Встречаемость генотипов и аллелей полиморфного локуса Arg72Pro ех4 гена p53 в зависимости от ФК ХСН (n, %)

Генотипы	ФК II		ФК III		ФК IV		рII–III	pIII–IV	pII–IV
и аллели	(n=112)		(n=101)		(n=64)
Arg/Arg	51	(45,5)	59	(58,4)	44	(68,8)	0,091	0,278	0,008
Arg/Pro	52	(46,4)	34	(33,7)	15	(23,4)	0,95	0,165	0,011
Pro/Pro	9	(8,0)	8	(7,9)	5	(7,8)	0,825	0,786	0,814
Arg	154 (68,8)		152 (75,2)		103 (80,5)		0,223	0,444	0,055
Pro	70	(31,3)	50	(24,8)	25	(19,5)	0,223	0,444	0,055

253

...полиморфизма влияния аспекты генетические Клинико .6 Глава

Тепляков А.Т., Березикова Е.Н., Шилов С.Н. Сердечная недостаточность

экзон 4 гена p53 ассоциируется развитие ХСН у боль ных ИБС, и в связи с этим генотип Arg/Arg (ОШ=2,1, 95%ДИ=1,036–4,118, p=0,037) является фактором риска развития ХСН.

Результаты исследования взаимосвязи полиморфиз ма гена белка p53 со степенью тяжести функциональ ного класса ХСН (по NYHA) представлены в таблице 6.2. Установлены достоверные различия по частоте встре чаемости аллелей и генотипов полиморфного локуса Arg72Pro экзон 4 белка p53 в зависимости от тяжести ФК ХСН. Так, частота встречаемости генотипа Arg/Arg в 3 й группе больных ХСН IV ФК (68,8%) преобладала над таковой во 2 й (58,4%, нд) и 1 й группах (45,5%, р=0,008). Частота встречаемости генотипа Arg/Pro достоверно чаще регистрировалась в 1 й по сравнению с 3 й группой (46,4 против 23,4%, р=0,011). Таким об разом, носительство генотипа Arg/Arg полиморфного

локуса Arg72Pro экзон 4 белка p53 является фактором риска тяжелого течения ХСН.

6.2. Полиморфизмы гена каспазы88 (–652(6N)I/D и D302H как предикторы риска развития и тяжести течения ХСН у больных ИБС

Каспазы непосредственно принимают участие в про цессе апоптоза. Данные белки, входящие в семейство цистеиновых протеаз, обладают полной специфичнос тью по аспарагиновой кислоте в позиции Р1. В резуль тате активации каспаз происходит расщепление клеточ ных субстратов, что приводит к серьезным структурным

254

Глава 6. Клинико генетические аспекты влияния полиморфизма...

изменениям клеток в процессе запрограммированной гибели последних.

На вершине апоптозного каскада находится каспа за 8, именно этот белок в процессе апоптоза, запущен ного CD95 (Fas/APO 1) и ФНО α , напрямую связывает эффекторный домен смерти с каспазами. Ген каспа зы 8 имеет не менее 11 экзонов, которые перекрывают около 30 кб участка 2q33 34 человеческой хромосомы.

Нами исследованы два полиморфных локуса гена каспазы 8: –652(6N)I/D и D302H.

Распределение частот встречаемости генотипов по лиморфных локусов –652(6N)I/D и D302H гена каспа зы 8 в группе больных и в контрольной группе соответ ствовало ожидаемому при равновесии Харди–Вайнбер га.

На основании анализа по распределению частот встречаемости генотипов гена каспазы 8 (–652(6N)I/D)

у больных ХСН установлены различия по сравнению с группой здоровых. Действительно, аллель del (54,0 про тив 43,4%) и генотип del/del (28,9 против 19,1%) у па циентов с ХСН преобладали над частотой встречаемос ти в контроле (табл. 6.3).

Таким образом, вариабельность аллеля del (ОШ=1,53, 95%ДИ=1,142–2,050, p=0,004) и генотипа del/del (ОШ=2,33, 95%ДИ=1,293–4,215, p=0,005) ас социировалась с повышенным риском развития ХСН.

Проведенный анализ не выявил достоверных разли чий в распределении частот встречаемости генотипов и аллелей полиморфного локуса D302H гена каспазы 8 у

255

256

Таблица 6.3

Частота встречаемости аллелей и генотипов полиморфного локуса –652(6N)I/D гена каспазы8 в группе больных ХСН и в группе контроля

Выборка				Аллели												Генотипы
				ins				del				ins/ins					ins/del				del/del
		n		%			n	%				n		%			n	%			n	%
Группа контроля
(n=136)	154			56,6		118		43,4			44			32,4		66		48,5		26		19,1
Группа больных
(n=277)	255			46,0		299		54,0			58			20,9		139		50,2		80		28,9

недостаточность Сердечная .Н.С Шилов ,.Н.Е Березикова ,.Т.А Тепляков

Таблица 6.4

Частота встречаемости аллелей и генотипов полиморфного локуса D302H гена каспазы8 в группе больных ХСН и в группе контроля

Выборка				Аллели												Генотипы
			G					C					G/G					G/C			C/C
		n		%			n	%				n		%			n	%		n	%
Группа контроля
(n=136)	226			83,1		46		16,9			93			68,4		40		29,4		3	2,2
Группа больных
(n=277)	472			85,2		82		14,8			199			71,8		74		26,7		4	1,4

257

...полиморфизма влияния аспекты генетические Клинико .6 Глава

Тепляков А.Т., Березикова Е.Н., Шилов С.Н. Сердечная недостаточность

больных ХСН ишемического генеза и в группе контро ля (табл. 6.4).

Результаты исследования взаимосвязи полиморфиз мов гена каспазы 8 со степенью тяжести ФК ХСН (по NYHA) представлены в таблицах 6.5–6.6.

Частота генотипа del/del полиморфного локуса –652(6N)I/D гена каспазы 8 в 3 й группе достоверно преобладала над таковой во 2 и 1 й группах (42,2 про тив 23,8 и 25,9%, p=0,007 и р=0,039 соответственно). В то же время генотип ins/ins в 3 й группе (10,9%) встре чался реже, чем во 2 й группе (26,7%, р<0,025). Разли чия по частотам аллеля del (II ФК – 52,2%, III ФК – 48,5% и IV ФК – 65,6%) и аллеля ins (II ФК – 47,8%, III ФК – 51,5% и IV ФК – 34,4%) также оказались суще ственными (р<0,05). Следовательно, аллель ins и гено тип ins/ins полиморфного локуса –652(6N)I/D гена кас пазы 8 ассоциируются с протективными свойствами в

отношении характера течения ХСН у больных ИБС, а аллель del и генотип del/del являются прогностически ми факторами тяжелого течения заболевания.

Анализ распределения частот встречаемости геноти пов и аллелей гена D302H гена каспазы 8 в зависимос ти от ФК ХСН (NYHA) не выявил каких либо закономер ностей в генезе ХСН у больных ИБС (табл. 6.6).

Результаты исследования взаимосвязи полиморфиз мов генов белков апоптоза – Arg72Pro экзон 4 белка p53, –652(6N)I/D каспазы 8 и D302H каспазы 8 с пока зателями структурно функционального состояния ЛЖ представлены в таблице 6.7.

У пациентов с генотипом Arg/Arg гена белка p53

258

Таблица 6.5

Встречаемость генотипов и аллелей полиморфного локуса –652(6N)I/D гена каспазы8 в зависимости от ФК ХСН (n, %)

Генотипы	ФК II	ФК III	ФК IV	рII–III	pIII–IV	pII–IV
и аллели	(n=112)	(n=101)	(n=64)
ins/ins	24 (21,4)	27 (26,7)	7 (10,9)	0,457	0,025	0,119
ins/del	59 (52,7)	50 (49,5)	30 (46,9)	0,744	0,866	0,559
del/del	29 (25,9)	24 (23,8)	27 (42,2)	0,841	0,007	0,039
ins	107 (47,8)	104 (51,5)	44 (34,4)	0,503	0,003	0,02
del	117 (52,2)	98 (48,5)	84 (65,6)	0,503	0,003	0,02

259

...полиморфизма влияния аспекты генетические Клинико .6 Глава

260

Таблица 6.6

Встречаемость генотипов и аллелей полиморфного локуса –D302H гена каспазы8 в зависимости от ФК ХСН (n, %)

Генотипы	ФК II		ФК III		ФК IV		рII–III	pIII–IV	pII–IV
и аллели	(n=112)		(n=101)		(n=64)
G/G	85	(75,9)	69	(68,3)	45	(70,3)	0,28	0,932	0,527
G/C	26	(23,2)	30	(29,7)	18	(28,1)	0,358	0,968	0,586
C/C	1	(0,9)	2	(2,0)	1	(1,6)	0,927	0,688	0,737
G	196 (87,5)		168 (83,2)		108 (84,4)		0,259	0,891	0,51
C	28	(12,5)	34	(16,8)	20	(15,6)	0,259	0,893	0,508

недостаточность Сердечная .Н.С Шилов ,.Н.Е Березикова ,.Т.А Тепляков