Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
mikra_2.docx
Скачиваний:
109
Добавлен:
19.03.2015
Размер:
69.78 Кб
Скачать

32. Понятие об умеренных бактериофагах. Лизогения и фаговая конверсия.

Бактериофаг-агент, растворяющий бактерии

Умеренные бактериофаги - вызывают латентную инфекцию и ассоциацию генома вируса с бактериальной хромосомой. Умеренные фаги, в отличие от вирулентности, не вызывают гибели бактериальных клеток и при взаимодействии с ней переходят в неинфекционную форму фага, называемую профагом. Профаг — геном фага, ассоциированный с бактериальной хромосомой.

Лизогения.-это взаимодействие может происходить по интегративному типу. Отражает потенциальную способность лизогенных бактерий к лизису при освобождении профага из состава бактериального генома и перехода в вирулентный фаг, способный репродуцироваться.

Фаговая конверсия- изменение фенотипа бактериальной клетки (антигенной характеристики, токсинообразования, чувствительности к другим фагам и т. п.), обусловленное включением в ее хромосому генома умеренного фага.

33. Методы обнаружения бактериофагов.

Метод Аппельмана: метод определения литической активности фага на жидких питательных средах путем установления его максимального разведения, вызывающего полный лизис бульонной культуры чувствительных бактерий.

Метод Грация метод титрования фага, заключающийся в определении количества активных фаговых частиц в 1 мл субстрата путем внесения образца в полужидкий агар (0,7%), содержащий чувствительную к фагу культуру, с последующим наслоением смеси на плотный агар (1,5%) в чашке Петри, термостатированием и подсчетом количества негативных колоний.

Фаготипирование- способ определения принадлежности выделенной и идентифицированной до вида культуры к тому или иному фаговару. Используют 2 подхода. Сущность первого состоит в установлении свойств, полученных из лизогенной культуры фагов (литического спектра, антигенной специфичности и др.). Сущность второго, более распространенного, подхода базируется на выявлении спектра чувствительности выделенной культуры к набору стандартных типовых фагов. Если фаговар культуры соответствует типовому фагу, наступает лизис культуры, проявляющийся в отсутствии роста, в то время как на месте нанесения др. фагов наблюдается сплошной рост микробов. Для Ф. необходимы молодая (4 - 6-часовая) культура исследуемого штамма, идентифицированного до вида или подвида; набор стандартных типовых фагов в критических тест-разведениях (в максимальном разведении фага, вызывающем сплошной лизис гомологичной культуры); чашки Петри со стандартной свежеприготовленной и хорошо высушенной средой. 

34. Практическое применение фагов.

Применение фагов с лечебными и профилактическими целями проводится сравнительно редко. Это связано с большим количеством отрицательных результатов, которые объясняются следующими причинами:

  1. Строгой специфичностью фагов, лизирующих только те клетки бактериальной популяции, которые снабжены соответствующими рецепторами, вследствие чего фагорезистентные особи, имеющиеся в каждой популяции, полностью сохраняют свою жизнеспособность.

  2. Широким применением более эффективных этиотропных средств- антибиотико, не обладающих специфичностью бактериофагов.

В настоящее время препараты бактериофагов применяются для лечения дизентирии, сальмонеллеза, гнойной инфекции, вызванных антибиотико-резистентными бактериями.

Культуру засевают сплошным газоном на чашку с питательной средой, дают ей впитаться в агар и на поверхность посева пастеровской пипеткой, штампом-репликатором или калиброванной петлей наносят типовые фаги. На второй день учитывают спектр чувствительности культуры к фагам. Результаты используют для эпидемиологического анализа.