Сборник статей 2014

Результаты. Из всех проанализированных молочнокислых продуктов наиболее оптимальным составом обладали продукты «Деревенское молочко», в которых отсутствуют консерванты, красители, усилители вкуса и т.д. Недостатком этих продуктов можно считать непродолжительный срок годности.

Мы сравнили данные о микробном составе продуктов, заявленном производителем с результатами посевов. При посеве на молочный агар в исследуемых продуктах мы обнаружили: в йогурте «Для всей семьи» - грамположительные кокки и короткие палочки,

вйогурте «Чудо» - грамположительные короткие палочки и длинные нитеобразные палочки, в йогурте «Эрмигут» - единичные редкие грамположительные стрептококки, в «Бифациле» - грамположительные стафилококки и короткие грамположительные палочки,

вбифидоке «Деревенское молочко» большие короткие грамположительные палочки и грамотрицательные кокки, в йогурте полученном с заквасок «Genesis» грамположительные короткие толстые и длинные изогнутые палочки. При посеве биойогурта «Активиа» с нормальным сроком годности были обнаружены грамположительные длинные палочки и грамотрицательные кокки, с истекшим сроком годности – грамотрицательные кокки и редкие грамположительные коккобациллы.

Выводы. 1) На примере биойогурта «Активиа» было показано, что при истечении срока годности продукта происходит его обеднение микроорганизмами.

2)В домашних продуктах было выявлено большее количество дрожжей, чем в покупных, что может быть связано с нестерильностью их производства в бытовых условиях.

3)Преобладающей культурой в большинстве исследованных продуктах были дрожжи, которые могли подавить рост остальных микроорганизмов.

КЛИНИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ ИНДУКТОРОВ ЭНДОГЕННОГО ИНТЕРФЕРОНА ДЛЯ ЭКСТРЕННОЙ ПРОФИЛАКТИКИ КЛЕЩЕВОГО ЭНЦЕФАЛИТА

У.А. Ладик

Сибирский государственный медицинский университет г. Томск Кафедра инфекционных болезней и эпидемиологии.

Актуальность. Клещевой энцефалит (КЭ) – одно из самых распространенных природно-очаговых заболеваний нервной системы, передающихся иксодовыми клещами. Основным направлением в предупреждении заболеваемости КЭ являются вакцинация населения против этой инфекции. Экстренная профилактика с использованием иммуноглобулина против КЭ, которая проводится сразу после присасывания клеща, в основном рассматривается как дополнительная профилактическая мера. На сегодняшний день доказано, что эффективность профилактического действия данного серопрепарата находится в прямой зависимости от сроков его введения с момента инфицирования вируса КЭ. Кроме того, этот препарат имеет высокую стоимость и не является эффективным в случае инфицирования другими инфекционными агентами, возбудителями арбовирусных инфекций. Поэтому в последние годы одним из перспективных направлений экстренной профилактики КЭ стало применение препаратов индукторов интерферонов, к которым относится йодантипирин (ЙА).

Цель. Цель настоящей работы заключалась в изучении клинической эффективности использования отечественного индуктора интерфероногенеза ЙА для постэкспозиционной экстренной профилактики КЭ и его влияние на динамику спонтанной продукции цитокинов мононуклеарными клетками периферической крови.

Материалы и методы. Были сформированы 2 группы волонтеров, обратившихся с целью экстренной профилактики. Основная группа, включавшая 73 человека, получила в качестве курса экстренной профилактики ЙА, а в группе сравнения (контроль), состоявшей из 44 человек, был введен иммуноглобулин против КЭ (титр 1:160). Все

289

показатели были определены четырехкратно до и после назначения препаратов (через 2 недели, через 1 и 3 месяца) в группе, получавшей ЙА, и в группе, получавшей специфический иммуноглобулин. У 27 волонтеров были взяты образцы крови для получения культур мононуклеарных клеток. Спонтанные уровни продукции интерферонов-α и –γ (ИФ-α, ИФ-γ) и интерлейкинов-2, -4 и -10 (ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-10) в супернатантах, полученных культур были определены с помощью твердофазного ИФА.

Результаты. На 3-й визит в отличие от группы волонтеров, получавших иммуноглобулин, в основной группе, получавшей ЙА, у 21,9% обследованных лиц в сыворотке крови были обнаружены поздние антитела к вирусу КЭ (p=0,0007). Более того, эта тенденция сохранялась и на 4-й визит после начала курса экстренной профилактики (p=0,0015), что отражает активность гуморального иммунитета в ответ на специфическую антигенную нагрузку в основной группе, в отличие от группы получавшей иммуноглобулин. В группе, получавшей ЙА, статистически значимые различия были установлены для уровней продукции в супернатантах ИФ-α (p=0,041) и ИЛ-10 (p=0,003) между 2 и 3 визитом, а также для ИЛ-10 (p=0,012) между 1 и 2 визитом. Кроме того, было показано статистически значимое повышение содержания в супернатантах ИФ-γ (p=0,012) между 1 и 2 визитами на фоне применения ЙА, с дальнейшим динамическим снижением уровня этого показателя до исходных значений к визиту 3 (p=0,06), что соответствовало смешанному T-хелпер 1/T-хелпер 2-типу адекватному типу иммунного ответа на вирусную инфекцию. Все выявленные побочные симптомы были легкой степени тяжести, не требовали назначения дополнительной медикаментозной терапии и были отмечены лишь в момент приема максимальной суточной дозы ЙА.

Выводы. Таким образом, показана высокая профилактическая эффективность препарата ЙА не только в первые 72 ч после присасывания клеща, но и в более поздние сроки.

ИЗМЕНЕНИЕ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ОКИСЛИТЕЛЬНОГО СТРЕССА У БОЛЬНЫХ С ХРОНИЧЕСКИМ ОПИСТОРХОЗОМ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ИНТЕНСИВНОСТИ ИНВАЗИИ

С.К. Панагбеева

Сибирский государственный медицинский университет г. Томск Кафедра инфекционных болезней и эпидемиологии.

Актуальность. Описторхоз – природно-очаговый биогельминтоз, для которого характерны холецистит, холангит и повышенный риск холангиокарциномы. Известно, что повышенное образование монооксида азота и малонового диальдегида (МДА) наблюдается при хроническом воспалении различной этиологии. Считается, что хронический окислительный стресс способствует повреждению ДНК и повышает риск злокачественной трансформации клеток в очагах воспаления.

Цель. . Цель настоящей работы – дать характеристику свободнорадикальных процессов, с помощью определения его маркеров – монооксида азота (нитритов) и малонового диальдегида (МДА) в сыворотке крови, а также антиоксидантной системы у больных хроническим описторхозом в зависимости от интенсивности инвазии.

Материалы и методы. Проведено обследование 69 больных хроническим описторхозом. Диагноз описторхоза был подтвержден копроовоскопически. Интенсивность инвазии определяли по методу Столла. В качестве контроля нами были обследованы 19 клинически здоровых человек, которые имели отрицательные результаты копроовоскопических и серологических анализов в отношении инвазии гельминтов. В сыворотке крови определяли содержание МДА, активность каталазы и антиокислительную активность липидов (АОАЛ). Концентрацию нитритов в сыворотке крови определяли спектрофотометрически после добавления реактива Грисса.

290

Результаты. В результате изучения показателей свободнорадикального окисления, в группе больных было установлено достоверное повышение содержания нитритов и МДА в сыворотке крови, по сравнению с соответствующим показателем у здоровых людей (P<0,01). В то же время, уровни активности каталазы и АОАЛ в сыворотке крови у обоих обследованных нами групп больных, особенно у больных, имевших микст-инвазию, были достоверно ниже соответствующих показателей у здоровых людей (при P<0,01). Кроме того, в группе больных описторхозом установлены положительные корреляционные зависимости между уровнями интенсивности инвазии и концентрацией МДА в сыворотке крови (r = ),73, при P<0,01).

Выводы. Таким образом, у больных хроническим описторхозом, по сравнению со здоровыми людьми, установлено существенное повышение содержания в сыворотке крови нитритов (монооксида азота) и МДА, при одновременном подавлении активности каталазы и АОАЛ, что коррелировало с интенсивностью инвазии. Определение показателей окислительного стресса позволяет определить тяжесть течения описторхоза и может быть использовано для оценки риска развития холангиокарциномы.

ИММУННОСТИМУЛИРУЮЩЕЕ ДЕЙСТВИЕ COLURIA GEOIDES ПРИ СТАФИЛОКОККОВОЙ ИНФЕКЦИИ

Ю.В. Ростовцева

ФГБОУ ВПО «Хакасский государственный университет им. Н. Ф. Катанова», г. Абакан Медико-психолого-социальный институт.

Кафедра фундаментальной медицины и гигиены.

Актуальность. Несмотря на успехи современной медицины, стафилококковая инфекция попрежнему остается одной из самых распространенных в мире. В США ежегодно от нее страдают от 5 до 9% населения. Для снижения распространенности данной инфекционной патологии среди населения необходима профилактика и своевременное лечение. В настоящее время перспективна разработка растительных препаратов с противомикробными и иммуностимулирующими свойствами, одним из таких препаратов является настойка Coluria geoides (Rosaceae).

Цель. Целью настоящей работы явилась оценка иммуностимулирующего действия настойки C.geoides при генерализованной стафилококковой инфекции при лечебном и профилактическом введении фитопрепарата.

Материалы и методы. Исследование проводили на базе вивария МПСИ на белых нелинейных мышах обоего пола, в возрасте 2 месяцев, в эксперименте принимало участие 3 группы животных: контрольная и две экспериментальные, включающие по 56 особей в каждой. Животные содержались в соответствии с правилами, принятыми Европейской конвенцией по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и иных научных целей (Страсбург, 1986). Исследуемый препарат вводили в желудок в дозе 50мг/кг веса в течение 5 дней, начиная со дня заражения, животным первой экспериментальной группы и в течение 5 дней до заражения животным второй экспериментальной группы. Контрольным животным вводили соответствующий объем растворителя. В ходе инфекции периодически производили забор образцов крови из хвостовой вены. Оценку фагоцитарной активности нейтрофилов периферической крови проводили по стандартной методике. Полученные в ходе исследования результаты обрабатывали методом вариационной статистики и представляли в формате: значение медианы, 25-го и 75-го квартилей (медиана, 25%÷75%). Независимые группы сравнивали с помощью непараметрического U-теста Манна-Уитни, различия считали достоверными при р<0,05.

Результаты. При лечебном введении фагоцитарный индекс у животных контрольной группы на 2–3 день находился на одинаковом уровне (18-19%). С 5–го дня установили

291

незначительное его повышение, и снова снижение к седьмому дню. Максимума он достигал на 10 и 15 день инфекции 38,00 (35,00÷50,00) %. Снижался этот показатель на 20 день (25,00 %) и оставался на таком же уровне до 25-го дня. У животных первой экспериментальной группы фагоцитарный индекс значительно и статистически достоверно (р≤0,001) превышал аналогичный показатель животных контрольной группы на всем протяжении инфекционного процесса, достигал максимального значения на 15 день: 69,00 (48,00÷79,00) %, затем постепенно снижался к 25 дню (до 41 %). При профилактическом введении исследуемого препарата (у животных второй экспериментальной группы) фагоцитарный индекс также значительно и статистически достоверно (р≤0,001) превышал аналогичный показатель животных контрольной группы, постепенно повышался с 3-го дня и достигал максимального к 10-му дню 55,50 (48,25÷74,50) %, к 20-му дню постепенно снижался до 38,00 (31,50÷45,25) %.

Фагоцитарное число нейтрофилов периферической крови животных контрольной группы в течение всего периода практически не изменялось и колебалось в пределах 1,43- 2,31 частиц латекса/нейтрофил. У животных первой экспериментальной группы оно значительно и статистически достоверно (р≤0,001) превышало аналогичный показатель животных контрольной группы на всем протяжении инфекционного процесса и варьировало в пределах 1,83-12,50 частиц латекса/нейтрофил, медленно увеличивалось к 10 дню, с 15 дня наблюдалось резкое его увеличение до максимума 12,50 (6,74÷15,63) частиц латекса/нейтрофил и резкое снижение на 20 день 3,69 (3,51÷5,38), самый низкий уровень наблюдали на 25 день 1,83 (1,59÷2,02) частиц латекса/нейтрофил. У второй экспериментальной группы фагоцитарное число тоже значительно и статистически достоверно (р≤0,001) превышал аналогичный показатель животных контрольной группы. У животных этой группы данный показатель в течение всего периода практически не изменялся и находилось в пределах 1,69- 4,12 частиц латекса/нейтрофил. Максимума оно достигало также к десятому дню 4,12 (2,65÷9,18) частиц латекса/нейтрофил и снижалось к 20– му до 3,24 (2,32÷4,23) частиц латекса/нейтрофил

Выводы. Таким образом, настойка C.geoides обладает иммуностимулирующими свойствами, повышая активность и интенсивность фагоцитоза нейтрофилов периферической крови экспериментальных животных при лечебном и профилактическом введении.

ВЗАИМОСВЯЗЬ ЛИПИДНОГО ОБМЕНА И ИММУННОЙ СИСТЕМЫ НА МОДЕЛИ ВИЧ-ИНФЕКЦИИ

Н.В. Яковец

Белорусский государственный медицинский университет г. Минск Кафедра инфекционных болезней

Актуальность. В основе любой иммунной реакции лежат клеточные механизмы пролиферации, дифференцировки и распознания. Наиболее важными являются процессы, происходящие в области раздела фаз, роль которых выполняют мембраны клеток. Общеизвестно, что основными компонентами мембран являются липиды. Таким образом, выявление взаимосвязи иммунной и липидтранспортной систем является актуальным.

Цель. Выявить наличие и характер связи между изменениям уровня общего холестерина крови липопротеинов плазмы крови с иммунологическим статусом исследуемых при вторичном иммунодефиците.

Материалы и методы. Был проведен анализ показателей липидного обмена у 59 взрослых ВИЧ-инфицированных лиц, которым была впервые назначена ВААРТ, с максимальной клинической и терапевтической схожестью. Продолжительность наблюдения составила 12 месяцев.

292

Параметры липидной панели оценивали на основании динамики уровней общего холестерина (ОХ), липопротеинов высокой плотности (ЛПВП), липопротеинов низкой плотности (ЛПНП), измеренных до начала лечения и через 12 месяцев от начала этиотропной терапии. В качестве критериев активности ВИЧ-инфекции использовались вирусная нагрузка и количество СD4 лимфоцитов.

Исследуемая совокупность была разбита на 2 группы в зависимости от стадии ВИЧинфекции по классификации ВОЗ. Первую группу составили 43 пациента на 1-2 стадии ВИЧ-инфекции, вторую группу – 16 человек на 3-4 стадии.

Статистический анализ содержания общего холестерина и CD4 лимфоцитов проводился с использованием критерия Стьюдента. Анализ уровня вирусной нагрузки и липопротеинов проводился с применением непараметрического критерия Вилкоксона. Парные корреляции вычислялись с использованием коэффициента корреляции Спирмена. Обработка полученных данных проводилась с использованием статистических пакетов Excel и Statisticа 6,0.

Результаты. Спустя 12 месяцев ВААРТ у всех исследуемых наблюдалось достоверное увеличение количества СD4 лимфоцитов в крови, общего холестерина плазмы, уменьшение вирусной нагрузки.

Выявлена обратная, статистически значимая средней силы связь между уровнем холестерина плазмы крови и вирусной нагрузкой.

У первой группы пациентов отмечается более высокий уровень общего холестерина, СD4 лимфоцитов и более низкий уровень вирусной нагрузки, чем у пациентов второй группы.

Наблюдается достоверное увеличение Аро А1 и уменьшение Аро В100 через 6 месяцев от начала ВААРТ, что свидетельствует об эффективной разгрузке клеток от холестерина.

Выводы. 1. Существует прямая связь между уровнем общего холестерина плазмы крови и количеством CD4 при ВИЧ-инфекции.

2.Увеличение уровня общего холестерина плазмы крови в результате ВААРТ 1 ряда нельзя рассматривать как побочное действие терапии.

3.В результате лечения происходит освобождение клеток от холестерина, что может быть следствием уменьшения (отсутствия) влияния ВИЧ на клетку.

ВЛИЯНИЕ ОСОБЕННОСТЕЙ КЛЕТОЧНОЙ СТЕНКИ РАЗЛИЧНЫХ МИКРООРГАНИЗМОВ НА АНТИБАКТЕРИАЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ ЭКСТРАКТОВ КОЛЮРИИ ГРАВИЛАТОВИДНОЙ

В.В. Вихарева

Сибирский государственный медицинский университет г. Томск Кафедра микробиологии и вирусологии

Актуальность. Несмотря на то, что при лечении инфекционных заболеваний современная медицина старается придерживаться рациональных методик использования антибиотиков, всё чаще возникает ситуация, когда используемые препараты, как правило, синтетического происхождения не обеспечивают нужный эффект из-за возникновения резистентности. Фитопрепараты реже вызывают устойчивость патогенов и побочные реакции макроорганизма, в связи с чем, в настоящее время активно изучаются антибактериальные свойства лекарственных растений.

При изучении противомикробной активности различных извлечений из лекарственного растения Сибири Колюрии гравилатовидной (C.geoides), мы получили выраженный бактерицидный эффект против золотистого стафилококка (грамположительного микроорганизма). Однако в последующих экспериментах противомикробная активность извлечений на грамотрицательные микроорганизмы (кишечную палочку, синегнойную палочку, клебсиеллу) была минимальна. Это натолкнуло нас на мысль, что мишенью

293

действия активных субстанций изученных извлечений являлась клеточная стенка бактерий. В связи с чем мы изучали действие экстрактов C.geoides на другие грамположительные микроорганизмы.

Цель. Изучить антимикробную активность различных извлечений из C.geoides на грамположительный микроорганизм Micrococcus lysodenticus.

Материалы и методы. Мы использовали экстракты C.geoides, полученные различными методиками: экстракты К1 и К2, полученные перколяцией на 40- и 70%-м этаноле соответственно, экстракт К4 получен реперколяцией на 40% этаноле.

В качестве примера грамположительного микроорганизма использовали суточную культуру Micrococcus lysodenticus. В качестве контроля – микроорганизмы с различным строением клеточной стенки: грамположительные – Staphylococcus aureus резистентный ® и чувствительный (S) к ципрофлоксоцину штаммы; грамотрицательные – Klebsiella pneumonia, Pseudomonas aeruginosa и E.coli (штаммы 25922 и 1257). Все штаммы брали в музее микробных культур кафедры микробиологии и вирусологии СибГМУ.

Эксперимент проводился следующим образом: в мясопептонном бульоне последовательно разводились исследуемые экстракты, затем к ним добавляли культуру микроорганизма. За контроль принималась культура без добавления экстрактов. Микробная нагрузка составляла 1 млн. клеток/мл. Данные суспензии инкубировались сутки при температуре 37°C, после чего пересевались газоном на мясопептонный агар. Спустя сутки инкубации производился подсчёт колоний. Минимальная концентрация экстракта, полностью подавляющая рост микроорганизмов, считалась бактерицидной, а бактериостатической – концентрация экстракта, обеспечивающая подавление размножения бактерий.

Результаты. В работе выявлено различное влияние экстрактов на исследуемые микроорганизмы: к К.pneumonia экстракт К1 проявляет слабый бактериостатический эффект в концентрации 14,2мг/мл. К P.aeruginosa экстракты К1 и К2 проявили бактерицидный эффект в концентрациях 14,4 и 8,2мг/мл соответственно, а так же К1 показал бактериостатичность в концентрации 13,25мг/мл. К S.aureus ® бактерицидное действие оказал экстракт К2 в концентрации 4,1мг/мл, бактериостатическое – К1 и К4 в 14,2 и 26,5мг/мл концентрациях. По отношению к S.aureus (S) все экстракты проявили как бактериостатический, так и бактерицидный эффект, особенно К2 показал высокую бактерицидность в концентрации 3,3±0,7 мг/мл и бактериостатичность в 1,6±0,5 мг/мл. В отношении E.coli обоих штаммов экстракты не проявили ожидаемых эффектов. К новому в нашей работе микроорганизму M.lysodenticus экстракты показали высокую эффективность: бактерицидность обнаружилась в концентрациях К1 – 3,55мг/мл, К2 – 4,1мг/мл, К4 – 13,25мг/мл; бактериостатический эффект выявлен у экстрактов в концентрациях К1 – 3,55мг/мл, К2 – 2,05мг/мл, К4 – 6,63мг/мл.

Выводы. Мы подтвердили высокую антимикробную активность извлечений C.geoides на грамположительные микроорганизмы, что может быть связано с действием основного действующего вещества извлечений – эвгенола на пептидогликан клеточной стенки этих бактерий.

ЗАКОНОМЕРНОСТИ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ИЗМЕНЕНИЯ ЦИТОКИНОВ В ПЛАЗМЕ КРОВИ НЕКУРЯЩИХ И КУРЯЩИХ ПАЦИЕНТОВ С ХРОНИЧЕСКОЙ ОБСТРУКТИВНОЙ БОЛЕЗНЬЮ ЛЕГКИХ

А.В. Карпучок

Белорусский государственный медицинсий университет, г. Минск Кафедра биологической химии

Актуальность. Хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ) характеризуется прогрессирующим ограничением скорости воздушного потока, которое вызывается

294

поражением мелких бронхов (обструктивный бронхиолит) и деструкцией паренхимы (эмфизема). Предполагают, что к 2020 году ХОБЛ войдет в первую тройку причин заболеваемости и смертности в мире. Главным внешним фактором риска развития ХОБЛ признается табакокурение. Однако доля пациентов с ХОБЛ, причина которой не связана с курением, в отдельных странах достигает 68,6 %.При ХОБЛ характерно накопление нейтрофилов, макрофагов и T-лимфоцитов в легочной паренхиме и стенке дыхательных путей. Этим клеткам принадлежит ключевое значение в формировании деструктивных изменений легочной ткани. Межклеточные взаимодействия между ними и их функциональное состояние регулируют цитокины. Они участвуют в формировании воспалительных реакций, в том числе, привлечении иммунокомпетентных клеток из кровотока в очаг воспаления.

Цель. Определить закономерности количественного изменения цитокинов (IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10, TNF-α, IFN-γ) в плазме крови курящих и некурящих пациентов с ХОБЛ, а также оценить их взаимосвязи с количеством иммунокомпетентных клеток.

Материалы и методы. В исследовании приняли участие 21 некурящий пациент с ХОБЛ, 20 курящих пациентов с ХОБЛ, 20 некурящих здоровых людей и 21 здоровый курильщик. К некурящим мы относили людей, которые выкурили в течение жизни менее 100 сигарет. Для оценки качества жизни пациентов с ХОБЛ использовали шкалу CAT (COPD Assessment Test, оценочный тест по ХОБЛ). Венозную кровь у обследуемых пациентов забирали рано утром натощак в объеме 10 мл в пробирку, содержащую этилендиаминтетраацет калия в качестве антикоагулянта. Для получения плазмы образцы центрифугировали по истечении одного часа после забора крови (3000 об/мин, 15 мин). До анализа образцы хранили при температуре – 75oC. В плазме крови определяли концентрацию IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10, TNF-α, IFN-γ (Вектор-Бест, Российская Федерация, R&D Systems, США) методом иммуноферментного анализа на иммуноферментом анализаторе «StatFax 3200» (Awareness Technology, США).

Результаты. Уровень IL-8 был достоверно выше у курильщиков с ХОБЛ по сравнению с курильщиками без ХОБЛ, а также у некурящих больных ХОБЛ по сравнению со здоровыми некурящими людьми. Увеличение TNF-α и IFN-γ в плазме крови имело место только у некурящих пациентов с ХОБЛ. У больных с выраженным и резко выраженным снижением качества жизни (по результатам CAT-теста, оценочного теста по ХОБЛ) уровень TNF-α и IFN-γ был значительно выше, чем у больных ХОБЛ с незначительным и умеренным снижением качества жизни. Различия уровня IL-1β, IL-6 и IL-10 отсутствовали как в группе курящих, так и в группе некурящих пациентов с ХОБЛ по сравнению с соответствующими группами здоровых людей.

Выводы. Полученные данные свидетельствуют о патогенетическом значении IL-8, TNF-α и IFN-γ при ХОБЛ.

ВЗАИМОСВЯЗЬ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ РSEUDOMONAS АERUGINOSA К БАКТЕРИОФАГУ И ПИГМЕНТООБРАЗОВАНИЯ

В.С. Добродеева

Сибирский государственный медицинский университет г. Томск, Кафедра микробиологии и вирусологии

Актуальность. Р. Аeruginosa является одним из наиболее частых возбудителей внутрибольничных инфекций. Важным диагностическим признаком при синегнойной инфекции является пигментообразование. Пигменты Р. Аeruginosa пиовердин и пиоцианин одновременно синтезируются подавляемым большинством штаммов и вносят определенный вклад в патогенез синегнойной инфекции, являясь факторами патогенности. Эти пигменты являются важными метаболитами в жизнедеятельности Р. Аeruginosa. Так пиоцианин является мощным окислителем и обладает широким спектром

295

антибиотической активности, что повышает ее конкурентоспособность. Пиовердин проявляет признаки антиоксиданта и, обладая хелатными свойствами, обеспечивает бактериальную клетку железом.

Бактериофаг Р. Аeruginosa используют в лечении синегнойных инфекций, особенно в случаях когда антибиотикотерапия не эффективна. Однако использование бактериофага не всегда приносит желаемый результат.

Представляет интерес, способны ли пигменты Р. Аeruginosa влиять на ее чувствительность к бактериофагу.

Цель. Определить влияние пигментов на чувствительность Р. Аeruginosa к бактериофагу.

Материалы и методы. Исследована чувствительность 66 штаммов Р. Аeruginosa – клинических изолятов к коммерческому препарату «Бактериофаг псевдомонас аэругиноза (синегнойный)» на средах стимулирующих синтез пиовердина и пиоцианина.

Результаты. Из 66 исследованных штаммов Р. Аeruginosa 33 штамма не проявили чувствительности к бактериофагу ни на одной из сред, а 33 – проявили, что выражалось в появлении зон лизиса в месте нанесения бактериофага. Из 33 штаммов, проявляющих чувствительность к бактериофагу, 15 штаммов имели одинаковую чувствительность на средах, стимулирующих синтез пиовердина или пиоцианина, а 18 штаммов проявили чувствительность только на одной из сред. Из этих 18 штаммов 16 были резистентны к бактериофагу на среде, стимулирующей синтез пиовердина, а 2 штамма – чувствительны к бактериофагу на этой же среде.

Выводы. В ходе проведенного исследования было установлено, что активность бактериофага зависит от наличия в питательной среде пиовердина. Пониженная чувствительность штаммов в присутствии пиовердина может быть связана как с нарушением процесса проникновения фага, так и его адсорбции. Процесс проникновения некоторых бактериофагов, например фагов T2 семейства Myoviridae, внутрь бактериальной клетки является цинкзависимым. Известно также, что пиовердин способен связывать не только ионы железа, но и других металлов (цинка, магния и др.). Принимая во внимание хелатные свойства пиовердина можно предположить, что он связывает ионы цинка, препятствуя проникновению одного из бактериофагов, содержащихся в препарате «Бактериофаг псевдомонас аэругиноза (синегнойный)» - KMV семейства Myoviridae. Также известно, что некоторые бактериофаги для адсорбции используют белки наружной мембраны, участвующие в формировании канала для транспорта железа. Возможно, что пиовердин конкурирует с бактериофагом KMV за этот рецептор.

Полученные нами результаты позволяют говорить о возможном снижении чувствительности синегнойной палочки к бактериофагу в присутствии пиовердина. Однако необходимо проведение дополнительных исследований для выяснения механизмов этого явления.

СЕРОЗНЫЕ МЕНИНГИТЫ У ДЕТЕЙ

М.Я. Пягай

Сибирский государственный медицинский университет г. Томск Кафедра детских инфекционных болезней

Актуальность. В структуре нейроинфекций на долю серозных менингитов приходится примерно 70% и чаще всего они вызваны энтеровирусами. Энтеровирусные заболевания известны человечеству с середины 20-го столетия. С годами роль энтеровирусов в патологии человека увеличивается. Это объясняется появлением новых патогенных для человека серотипов, инверсией и усилением вирулентности известных ранее возбудителей. Регистрация и учет энтеровирусных инфекций (ЭВИ) в России введены

296

только в 2003 году. Энтеровирусы вызывают различные клинические формы заболеваний, в том числе серозные менингиты, реже энцефалиты.

Цель. Дать характеристику серозных менингитов у детей в осенний сезон 2013 года для планирования этапов реабилитации

Материалы и методы. Проведен анализ 44 историй болезни пациентов, находившихся на лечении в «Детской инфекционной больнице им. Г.Е.Сибирцева» с диагнозом серозный менингит средней степени тяжести. Критериями постановки диагноза являлись клиникоэпидемиологические и лабораторные исследования. Пациенты были разделены на три возрастные группы: от 0-1 года (5 детей), от 3-6 лет 11 месяцев 29 дней (25 детей) и от 7- 14 лет (14 детей). Обследование включало: общий анализ крови; общий анализ мочи; определение АлАТ и АсАТ, глюкозы, билирубина в крови; бактериологическое исследование носоглоточной слизи и фекалий; определение маркеров энтеровирусов, вируса клещевого энцефалита в ликворе; состав церебро-спинальной жидкости (ЦСЖ).

Статистический анализ полученных результатов проведен с помощью программы STATISTICA 8.0

Результаты. В период сезонного подъема почти все больные (более 90%) направлялись в стационар участковым педиатром или врачом скорой помощи с диагнозом «ОРВИ, менингит?» или «менингит?».

Большинство больных поступило в первые два дня заболевания, что обусловлено характерным внезапным началом болезни, развитием триады клинических симптомов:

лихорадки, головной боли, рвоты. У всех больных лихорадка была выше 38 С.

Длительность ее даже на фоне терапии составляла 6,0±4,0 дня. Лихорадка сопровождалась появлением распространенной головной боли различной степени выраженности. Дети отрицательно реагировали на яркий свет, громкий звук, отмечалась гиперестезия. Головная боль уменьшилась к 3 дню болезни, исчезла к 5-6 дню болезни на фоне дегидратации. Рвота возникла в первые два дня болезни у 27 детей. Кратность ее была различной: 1-2 раза – 20 детей, 3-5 раз – 10 детей, чаще 5 раз – у 4 детей. Отсутствие рвоты установлено у 10 детей. Менингиальные симптомы определялись у всех больных: ригидность затылочных мышц от 1,5 до 2 см у 36 детей, которая исчезала на 9 день госпитализации; симптомы Брудзинского у 19 детей, исчезли на 6 день и симптом Кернига у 13 детей, исчез на 7 день. Чаще выявлялись ригидность мышц затылка (81%), симптом Кернига (29,5%). У детей первого года жизни имели место положительный симптом Лесажа; напряжение и/или выбухание большого родничка; у 2 детей монотонный крик в течение двух дней. Менингиальные симптомы исчезали к 8-10 дню болезни у 12 детей, у остальных на 6-7 день. Изменения со стороны ротоглотки определялись у 40 детей (гиперемия, зернистость). Увеличение печени у 12 детей, диарея у 4 детей. Эти синдромы исчезали к 6 дню болезни. Всем больным с подозрением на менингит с диагностической целью проводилась люмбальная пункция. Ликвор вытекал под повышенным давлением, был бесцветным, прозрачным. Цитоз двухзначный у 10 детей, трехзначный у 34 детей. Количество белка не превышало норму у детей у 26 детей, у остальных повышалось до 0,77 г/л. Только у 22 детей обнаружены в ликворе РНК энтеровирусов, у остальных детей маркеры энтеровирусов и вируса клещевого энцефалита были отрицательны. У 36 детей цитоз уменьшился в 4-5 раз по сравнению с исходным к 6-7 дню госпитализации. Больные выписывались на 15-18 день болезни для реабилитации в условиях поликлиники. В стационаре пациентам проводилась антибактериальная терапия Цефтриаксоном, Цефотаксимом, Цефазолином; иммунотерапия Генфероном и Вифероном; дегидратационная терапия; цитопротекторная терапия Актовегином, так же назначились пробиотики Аципол и Бифидумбактерин под наблюдением инфекциониста и невролога.

297

Выводы. 1. Серозные менингиты регистрировались преимущественно у детей до 7 лет (30 человек)

2.Этиология серозного менингита установлена только у 22 детей (50%)

3.Клинические проявления серозного менингита представлены общеинфекционным, общемозговым синдромами, диссоциацией менингиальных симптомов

4.Возраст детей не оказал существенного влияния на тяжесть менингита.

ИЗМЕНЕНИЕ ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ СВОЙСТВ E. COLI, ВЫДЕЛЕННОЙ СО СЛИЗИСТОЙ ПОЛОСТИ РТА БОЛЬНЫХ РАКОМ ЛЕГКОГО

С.В. Дубовцева

Сибирский государственный медицинский университет г. Томск Кафедра микробиологии и вирусологии

Актуальность. Ротовая полость человека находится в тесной связи с различными внутренними органами и системами, поэтому морфофункциональные изменения слизистых оболочек полости рта нередко указывают на наличие патологических процессов в организме. Особенно часто такие явления в виде дисбиотических расстройств возникают на слизистых оболочках полости рта обнаруживаются при онкологических заболеваниях. Диагностика дисбактериозов до сих пор является серьезной проблемой. Постоянно идёт поиск методов исследования, которые могли бы быть использованы для оценки состояния микробиоценоза – основного компонента колонизационной резистентности организма. Применяемые в настоящее время методы не полностью отражают состояние микрофлоры, т.к. чаще всего показывают изменение количества или видовой состав микроорганизмов. Однако этого недостаточно для установления состояния дисбиоза, необходимо исследовать функциональные свойства выделенных штаммов бактерий, нарушения которых могут приводить к патофизиологическим проявлениям в организме больных.

Цель. Изучить функциональные свойства E. Coli, выделенной со слизистой полости рта больных раком легкого.

Материалы и методы. Исследования проводилось на базе клиник ГУ НИИ Онкологии ТНЦ СО РАМН и кафедры микробиологии и вирусологии СибГМУ. Обследовались больные в возрасте 47 – 60 лет с морфологически подтвержденным диагнозом рак легкого до проведения курса противоопухолевой химиотерапии. В качестве группы сравнения использовались пациенты без онкологической патологии. Исследуемым материалом служили мазки со слизистой оболочки полости рта. Функциональные свойства штаммов E. Сoli оценивали по изменению биохимической активности, подвижности, скорости адаптации к питательной среде, хемотаксической активности, по интенсивности газовыделения. Для этого использовались бактериологические методы и методы лазерной спектроскопии.

Результаты. Анализ полученных данных показал, что E. Сoli, выделенная от больных раком легкого характеризуется угнетением функциональной активности. Так у штаммов кишечной палочки от онкологических больных были снижены сахаролитическая активность, подвижность и интенсивность газовыделения. При посеве на питательные среды E. сoli от больных требовалось больше времени для адаптации, чем штаммам выделенным от группы сравнения. Так же наблюдалось значительное подавление хемотаксической активности.

Выводы. Штаммы E. сoli, выделенные от больных раком легкого характеризуются значительным снижением функциональных свойств, что необходимо учитывать при оценке дисбиотических расстройств у онкологических больных.

298