микробиология / стоматМ2 / rus 2_10

ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА № 10

Тема: Роль микроорганизмов в патологии ротовой полости при стоматологических заболеваниях.

Актуальность темы: Ротовая полость человека является благоприятной средой обитания многих видов микробов: сапрофитных, условно-патогенных и патогенных (около 160 видов). Это естественные обитатели: лактобациллы, микрококки, стрептококки, диплококки; условно-патогенные: бактероиды, стафилококки, пептострептококки, фузобактерии, актиномицеты, коринобактерии и др. Поэтому врачу стоматологу крайне важно уметь различать представителей нормальной микрофлоры ротовой полости и бактерий – возбудителей стоматологических заболеваний. Знание о составе микрофлоры ротовой полости позволяет выявить предрасположенность к кариесу и уметь оценить развитие других эндогенных стоматологических заболеваний.

Цель: провести общий микробиологический анализ ротовой полости, бактериологическое исследование при стоматологических заболеваниях.

Конкретные цели – уметь:

1. Уметь давать оценку микробному составу с учетом знаний о нормальной микрофлоре ротовой полости.

2. Интерпретировать результаты микроскопического и бактериологического исследования при кариесе, гингивите, стоматите и пульпите.

3. Распознавать рост разных микроорганизмов на питательных средах.

4. Выбирать оптимальные методы культивирования для аэробов и анаэробов.

Базовый уровень знаний - умений:

1. Уметь различать по морфологии основные группы микроорганизмов.

2. Готовить, окрашивать сложными методами мазки.

3. Описывать микробный пейзаж ротовой полости в норме.

4. Характеризовать принцип действия антибиотиков на микроорганизмы.

Для того, чтобы вы могли выяснить, отвечает ли исходный уровень ваших знаний - умений необходимому уровню, предлагаем выполнять ряд заданий:

Задание №1. Какие вы знаете анаэробные бактерии?

Задание № 2. Какое значение имеет нормальная микрофлора ротовой полости человека.

Задание № 3. Поясните различие между бактерицидными и бактериостатическими действиями антибиотиков.

Эталоны ответов к задачам для самопроверки и самоконтроля исходного уровня знаний- умений:

Задание №1. Клостридии , фузобактерии, вейлонеллы, пептококки, пептострептококки.

Задание №2. Обеспечивает колонизационную резистентность, стимулирует выработку секреторного иммуноглобулина класса А, проявляет антагонизм к патогенным бактериям.

Задание №3. Бактерицидные – антибиотики, вызывают гибель бактерий,

Бактериостатические – угнетают рост и развитие бактерий.

Информацию для пополнения знаний - умений, можно найти в следующих учебниках:

1. Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии под ред. Л.Б.Борисова. М.-Медицина.-1984.

2. Борисов Л.Б. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология.- Медицинское информ.агенство.- 2002.

3. Попов М.М., Циганенко А.Я., Минухин В.В. Основы иммунологии. - Харьков.- 2005.

4. Пяткин К.Д., Кривошеин Ю.С. Микробиология.- Высшая школа К.:, 1992.

Теоретические вопросы, на основе которых возможно выполнение целевых видов деятельности:

1. Основные группы микроорганизмов, обитающие в ротовой полости здорового человека.

2. Три группы инфекционных заболеваний ротовой полости.

3. Роль микроорганизмов в формировании зубного налета, зубной бляшки и зубного камня.

4. Микробный фактор в развитии кариеса, пульпита и периодонтита.

5. Микробный фактор одонтогенных воспалений.

6. Микрофлора при парадонтозе.

7. Микрофлора при стоматите.

8. Микробиологическая диагностика и этиотропная терапия инфекционных поражений ротовой полости.

Литература для усвоения знаний - умений по данной теме:

1. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология, под ред. Л.Б.Борисова. М.- Медицина, 2002, С.

2. . Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии под ред. Л.Б.Борисова. М.-Медицина.-1984. С.211-212, 217,224,229.

3. Левицкий А.П., Мизина И.К. «Зубной налет».- Киев:Здоровье, 1983.- 71с.

Содержание должно обеспечить достижение целей - обучения, почему способствует граф логической структуры темы:

» Роль микроорганизмов в патологии ротовой полости при стоматологических заболеваниях» ( приложение 1).

Материалы и оборудование: стерильные тампоны, предметные стекла, набор красителей, микроскоп, микропрепараты приготовленные из патологического материала стоматологических больных Посевы микроорганизмов, выделенных из ротовой полости.

Ориентировочная основа действия при выполнении практической работы.

1. Общий микробиологический анализ ротовой полости.

Стерильным тампоном, смоченным физ.раствором, хорошо обтереть все части ротовой полости: язык, зубы, десны. Смыть тампон в пробирке с 5 мл физ.раствора. Из смыва приготовить мазки, окрасить по Граму, промикроскопировать под иммерсией и просмотреть не менее 10 полей зрения. В каждом поле зрения подсчитать следующие группы микроорганизмов:

1. Грамположительные кокки.

2. Грамположительные палочки.

3. Грамотрицательные кокки.

4. Грамотрицательные палочки.

5. Дрожжи, грибки.

Дать оценку микрофлоре обследованной ротовой полости, учитывая, что преобладание грамотрицательных кокков (род Neisseria, Veilonella) характерне для здорового человека. Преобладание грамположительной флоры неблагоприятно, так как свидетельствует о выраженных ферментативных процесах, ведучим к начальным стадіям кариеса (особенно неолагоприятно сочетание стрептокока и молочнокислих палочек). Неблагоприятно и преобладание грамотрицательных палочек , что свидетельствует о гнилостных процесах (поздние стадии кариеса). Наличие большого количества грибов- повышенная кислотность в ротовой полости.

2. Изучение микрофлоры зубного налета.

Приготовить два предметных стекла, протерев и обезжирив их. На одно нанести каплю физ. раствора для приготовления мазка и окраски его по Граму, на другое – каплю колларгола для окраски по Бурри. Материал берется стерильным петлей из зубного налета. Приготовленные мазки микроскопируются под иммерсией. Рисунки заносяться в потокол.

3. Бактериологическое исследование при стоматологических заболеваниях.

Рассмотреть чашки Петри с посевом материала от стоматологических больных на разных питательных середах, вырощенных в аэробных и анаэробных условиях. Отметить наличие изолированных колоний разных типов. Описать типичные колонии и признаки роста микроорганизмов. Назовите последующие этапы выделения чистой культуры и идентификации возбудителя.

Приложение 1

Логическая схема темы » Роль микроорганизмов в патологии ротовой полости при стоматологических заболеваниях» ( приложение 1).

Патогенные микроорганизмы и их роль в стоматологической патологии

	Зубной налет	Зубной камень*	Кариес**	Пульпит	Периостит, остеомиелит	Заболевания пародонта	Стоматит катаральный	Стоматит язвенно- некротический	Специфические поражения ротовой полости
Стафилококки	+			+	+	+ (редко)	+
Стрептококки	+		+	+	+	+			Высыпания на слизистой при скарлатине
Анаэробные кокки	+					+ (редко)	+
Энтеробактерии				+ поздн
Коринебактерии		+				+ (редко)	+		Образование пленок при дифтерии
Микобактерии									Туберкулезные бугорки
Клостридии				+ поздн					Спазм жевательных мышц при столбняке
Бактероиды, фузобактерии	+	+		+ поздн		+ поздн.		+
Спирохеты				+ поздн		+ поздн.		+	I, II, III поражения при сифилисе
Актиномицеты		+				+ поздн.			Актиномикоз - хронический абсцесс
Дрожжеподобные грибки									Молочница – кандидозный стоматит

* также лактобациллы, лептотрихии

**также лактобациллы

Приложение 2

Протокол к практическому занятию № 2.10

1.Общий микробиологический анализ ротовой полости

Учет микрофлоры в 10 полях зрения

Группы микроорганизмов	Количество в 10 полях зрения
1. Грамположительные кокки.
2. Грамположительные палочки.
3. Грамотрицательные кокки.
4. Грамотрицательные палочки
5. Дрожжи, грибки.

Вывод: _____________________________________________________

2. Изучение микрофлоры зубного налета.

Рис.1. Окраска по Граму

Рис. Окраска по Бури-Гинса

2. Учет бактериологических посевов при стоматологических заболеваниях.

а) при нагноительных процессах:

рост на ЖСА (среда Чистовича) _________________________________

рост на КА (кровяном агаре) _____________________________________

рост на Эндо ___________________________________________________

рост на МПА ____________________________________________________

б) при кариесе:

рост на ЖСА (среда Чистовича) _________________________________

рост на КА (кровяном агаре) _____________________________________

рост на Эндо ___________________________________________________

в) при язвенно-гангренозном стоматите:

рост на ЖСА (среда Чистовича) _________________________________

рост на КА (кровяном агаре) _____________________________________

рост на среде Сабуро ____________________________________________

рост на Эндо ___________________________________________________

рост на среде Китт- Тароцци _______________________________________

Последующие этапы идентификации:

_________________________________________________________________

_________________________________________________________________

Дата:_________________ Подпись преподавателя ________________

Приложение 3