стоматИностр2012 / Модуль2Рус / rus_2_12

Практическое занятие 2.12.

Тема: “Возбудители энтеровирусных инфекций. Рабдовирусы”

Актуальность темы. Вирусы полиомиелита, Коксаки, ЕСНО, энтеровирусы 68-72 типов распространяются по типу кишечных инфекций и играют важную роль в патологии человека, вызывая поражение центральной нервной системы, опорно-двигательного аппарата, печени. Широко распространении в прошлом кишечные вирусные инфекции, например полиомиелит, ныне перестали быть эпидемическими вследствие массовой вакцинации. Однако возбудитель продолжает циркулировать наряду с вакцинным штаммом, что может приводить к обострению эпидемической опасности. Бешенство, вызываемое рабдовирусами, является смертельно опасным заболеванием. Несмотря на существующие меры по профилактике этой зоонозной инфекции, оно остается актуальным в связи с распространением бездомных животных на улицах городов. Кроме бешенства рабдовирусы вызывают также везикулярный стоматит, т.е. играют определенную роль в стоматологической патологии.

Цель (общая): Уметь проводить вирусологическую диагностику заболеваний на бешенство, полиомиелит, Коксаки, ЕСНО; выбирать препараты для специфической профилактики соответствующих инфекций.

Конкретные цели (уметь)

- Проводить индикацию энтеровирусов по ЦПД на культуре клеток.

- Идентифицировать выявленный энтеровирус в реакции нейтрализации.

- Анализировать особенности биологического метода диагностики при разнообразных энтеровирусных инфекциях.

- Проявлять вирус бешенства по внутриклеточным включениям.

Исходный уровень знаний - умений:

1. Анализировать особенности взаимодействия вирусов с живыми системами.

2. Объяснять особенности иммунного ответа при вирусных инфекциях.

3. Трактовать биологические свойства вирусов как особой неклеточной формы жизни.

4. Описывать відміності структур вирусной клетки от микробной.

Для того, чтобы Вы могли уяснить, отвечает ли базовый уровень ваших знаний-умений необходимому, предлагаем выполнить ряд задач.

Задача 1. Чем отличаются простые и сложные вирусы?

Задача 2. Какие следствия для клетки имеет продуктивная вирусная инфекция?

Задача 3. Как можно обнаружить ЦПД в культуре зараженных клеток?

Задача 4. Какие компоненты необходимые для постановки реакции вирусной нейтрализации?

Информацию для пополнения знаний-умений можно найти в следующих учебниках:

1. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология под ред.Л.Б.Борисова.-Медицинское информационное агенство.-Москва.-2002.-С.68-90.

Теоретические вопросы, на основе которых возможное выполнение целевых видов деятельности:

1.Возбудители вирусных гастроэнтеритов. Общие свойства групп, роль в патологии человека. Семейство пикорнавирусов. Общие свойства, состав семейства.

2.Возбудитель полиомиелита. Биологические свойства, серотипи. Эпидемиология и специфическая профилактика.

3.Вирусы Коксаки и Есно - представители энтеровирусов, их классификация, распространение, роль в патологии.

4. Микробиологическая диагностика энтеровирусных инфекций..

5. Рабдовирусы. Общая характеристика и классификация. Возбудитель бешенства.

.6. Вирус везикулярного стоматита. Диагностика и профилактика рабдовирусных инфекций.

Литература :

1. Медицинская микробиология , вирусология и иммунология Под ред.Л.Б. Борисова, М.:Медицина,2002.с.484-490, 555-558.

2. Руководство к практическим занятиям по микробиологии. Под ред. Л.Б. Борисова, М.: Медицина,1984.с.

Ориентировочная основа действия при выполнении практической работы.

1.Провести индикацию энтеровирусов за ЦПД на культуре клеток HeLa. Рассмотреть микропрепараты незараженной культуры от зараженной патологическим материалом от больных № 1 и №2. Рисунки занести в протокол, сделать вывод об этиологию заболевания.

2. Провести индикацию выявленного энтеровируса в реакции нейтрализации. Для этого у пробирки с культурой клеток ФБЛ (фибробласты человеческого эмбриону) внести материал, который содержит вирус, смешав его с стандартной поливалентной сывороткой против вирусов группы полиомиелита, Коксаки или ЕСНО. В случае совпадения типа вируса и сыворотки происходит нейтрализация вируса и он не вызовет ЦПД в культуре клеток. Результаты отметить в протоколе, сделать вывод о видовой принадлежности выявленного вируса.

3.Сравнить особенности биологического метода диагностики при разнообразных энтеровирусных инфекциях. Результаты оформить в виде таблицы, внести ее в протокол.

4. Из набора бактериальных препаратов выбрать те, которые используются для диагностики и профилактики энтеровирусных заболеваний.

5. Выбирать специфические препараты для профилактики бешенства и с помощью таблицы зарисовать внутриклеточные включения (тельца Бабеша-Негри).

После ознакомления с теоретическими вопросами и ходом проведения эксперимента Вам предлагается выполнить следующие учебные задания:

1.В лабораторию доставлены парные сыворотки больного с подозрением на полиомиелит для постановки реакции нейтрализации. Что надо использовать как антиген в реакции нейтрализации цитопатогенного действия возбудителя? Как производится учет реакции?

2.Почему против полиомиелита разработана вакцина, а против вирусов Коксаки и ЕСНО – нет?

3.Для создания искусственного активного иммунитета трехмесячному ребенку перорально ввели живую культуральную вакцину из штаммов Сэбина. Для профилактики какого заболевания использовали эту вакцину?

4.При бешенстве в цитоплазме пораженных нервных клеток можно обнаружить включения [тельца Бабеша-Негри]. Они выявляются под микроскопом при специальном окрашивании препарата. Какой метод окраски используется с этой целью? Что предствляют собой эти включения?

5.В хирургический кабинет обратилась потерпевшая, которую покусала неизвестная собака. Широкие рваные раны локализованы на лице. Какую лечебно-профилактическую помощь нужно оказать для профилактики бешенства?

Приложение 2

Образец протокола к практическому занятию № 2.12:

Тема:Возбудители энтеровирусных инфекций. Рабдовирусы

1. Индикация энтеровирусов по ЦПД.

Рис1.Незараженная Рис.2.Культура Рис.3.Культура

культура клетки клетки, зараженная клеток, зараженная

(контроль) пат.материалом пат.материалом

от больного №1 от больного №2

Вывод: ___________________________________________________________

Задание 2. Идентификация энтеровируса в реакции нейтрализации (РН).

Стандартные поливалентные сыворотки	Группа полиомиелита	Група Коксаки	Група ЕСНО	Контроль
Учет реакции

„+” – ЦПД, „-” - отсутствие ЦПД

Вывод:

_____________________________________________________________________

Задание3. Биологичекий метод диагностики энтеровирусных инфекций.

Вирусы	полиомиелита	Коксаки	ЕСНО
Пат материал
Лабораторные жывотные
Способ заражения
Результаты

Задание 4. Препараты для діагностики и специфической профиллактики энтеровирусных инфекций.

----------------------------------------------------------------------------------------------------

Задание 5. Микроскопическая диагностика бешенства.

Рис. 4 Внутриклеточные включения (тельца Бабеша - Нэгри)

Дата _____________ Подпись преподавателя ____________

4