Класифікація поживних середовищ

Універсальні: ПВ, МПБ, МПА

Спеціальні: цукровий МПА, МПБ, сироватковий МПА, кров’яний МПА, асцититичний МПА

Елективні: Ру, Леффлера, 1% лужна ПВ

Селективні: Середовище Мюллера, фуразолідоно-твіновий агар, Сабуро

Диференціально-діагностичні:

1) для визначення цукролітичних властивостей (середовища Гіса, Ендо, Левіна, Плоскірева)

2) для визначення протеолітичних властивостей (згорнута сироватка, МПЖ, кусочки м’язів, білка курячого яйця)

3) для визначення пептолітичних властивостей (МПБ, ПВ)

4) для визначення гемолітичних властивостей (кров’ний МПА)

для визначення редукуючих властивостей (середовища з різними барвниками)

Основні методи приготування поживних середовищ.

А). М'ясо-пептонний бульйон.

Вихідним матеріалом для приготування м'ясо-пептонних середовищ є м'ясна вода.

М'ясна вода. Свіже м'ясо – яловичину, телятину, конину – звільнюють від жиру, сухожиль і пропускають через м’ясорубку; 500 г фаршу заливають 1 л. водопровідної води, настоюють 16-24 години в прохолодному місці (4-6 градусів). М'ясний настій зливають, віджимають м'ясо, кип’ятять на слабкому вогні, а потім фільтрують через паперовий фільтр. Прозору, солом'яно- жовтого кольору рідину зливають у вимірювальний циліндр, доливають водопровідною водою до необхідного об'єму.

Отриману таким чином м'ясну воду стерилізують у склянках, закритих ватно-марлевими пробками, 20 хвилин при температурі 120 градусів або дрібно текучим паром. Стерильна м'ясна вода є основою для приготування багатьох поживних середовищ, може зберігатися довгий час.

М'ясо-пептонний бульйон готують на м'ясній воді. До теплої м'ясної води додають 10 г (1 %) пептону, 5 г (0,5 %) повареної солі і кип’ятять 10-15 хвилин на слабкому вогні при постійному перемішуванні. Після остигання приготованого бульйону встановлюють pH 7,0 – 7,2. Бульйон фільтрують, розливають у колби чи пробірки, стерилізують 20 хвилин при температурі 120 градусів.

Б). М'ясо-пептоний агар.

До 1 л м'ясо-пептонного бульйону добавляють 15 – 25 г (1,5 – 2,5 %) дрібно нарізаного і добре промитого агар-агару. Постійно перемішуючи, на слабкому вогні, бульйон з агаром доводять до кипіння, агар при цьому повинен повністю розчинитися. Встановлюючи необхідне значення pH (звичайно 7,0 – 7,2). У випадку помутніння середовища його освітлюють білком, фільтрують, розливають у пробірки чи колби і стерилізують у автоклаві 15-20 хвилин при температурі 120 градусів.

В). М'ясо-пептона желатина.

До м'ясо-пептонного бульйону додають 10-15 % (в теплий період року концентрацію желатини збільшують) дрібно нарізаної желатини і розчиняють, нагріваючи на водяній бані при температурі 40-50 градусів. Встановлюють pH 7,0 – 7,4. Розтоплену желатину фільтрують крізь паперовий фільтр (желатина фільтрується дуже повільно). Профільтроване середовище розливають у пробірки так, щоб не забруднити зсередини їх краї. Розлите по пробірках середовище стерилізують дрібно 3 дні по 1 годині при температурі 100 градусів. При сильному перегріванні желатина втрачає властивість застигати.