5. Методики лабораторного исследования желудочного сока: определение общей кислотности, свободной и связанной соляной кислоты методом титрования.

Исследование кислотообразующей функции желудка включает в себя определение общей кислотности (суммы всех кислых валентностей желудочного сока), свободной соляной кислоты, находящейся в виде диссоциированных ионов водорода и хлора, связанной соляной кислоты HCl, связанной с белковыми молекулами. Определение этих показателей производят во всех порциях желудочного сока.

Кислотность желудочного сока определяют титрованием его 0,1 N раствором едкого натра в присутствии индикаторов. Наиболее удобным является метод Михаэлиса. Кислотность выражают либо в условных титрационных единицах (титр. ед.) - по количеству мл 0,1 N раствора NA OH, израсходованного на титрование 100 мл желудочного содержимого, либо в миллимолях (одна титрационная единица соответствует концентрации соляной кислоты равной 1 ммоль/л), либо величиной рН.

Титрование производят в 5 мл сока, в который прибавляют по 2 капли индикаторов: диметиламидоазобензола и фенолфталеина. В присутствии свободной HCL диметиламидоазобензол приобретает красное окрашивание. Из бюретки по каплям приливают в стаканчик с соком 0,1 N раствор NaOH до изменения цвета жидкости в розовато-оранжевый (цвет семги), который соответствует моменту нейтрализации свободной HCL. Затем продолжают титрование. Жидкость сначала становится желтой, а затем снова красной. После нейтрализации всей кислоты краснеет фенолфталеин. Количество мл щелочи, потраченной на первом этапе титрования, умноженное на 20, даст величину свободной HCL. Количество 0,1 N раствора NaOH, израсходованное на все титрование (от красного и вновь до красного цвета), также умноженное на 20, укажет величину общей кислотности.

Для определения связанной HCL производят титрование 5 мл желудочного сока с добавленным индикатором ализаринсульфоновокислым натрием (до изменения цвета сока). Количество пошедшего на титрование 0,1 N Na OH умножают на 20 и полученный результат вычитают из показателя общей кислотности.

6. Как определяется содержание пепсина и возможное присутствие молочной кислоты в желудочном соке?

Для изучения ферментообразующей функции желудка определяют уровень активности пепсина в желудочном соке. В настоящее время наиболее широкое распространение получил метод Туголукова.

Активность протеолитических ферментов определяется по степени переваривания белков плазмы. В две центрифужные пробирки с точной и мелкой градуировкой наливают 2 % раствор сухой плазмы и приливают разведенный в 100 раз исследуемый сок. В одну пробирку приливают предварительно прокипяченный сок. После 20-ти часовой выдержки пробирок в термостате в обе пробирки приливают раствор трихлоруксусной кислоты и, хорошо перемешав, центрифугируют. После этого определяют объем осадка в каждой пробирке. По специальной формуле вычисляют показатель переваривания, а затем по таблице В.Н. Туголукова определяют содержание пепсина в желудочном соке.

Некоторое диагностическое значение имеет определение в желудочном соке молочной кислоты (в норме она отсутствует). Источником ее может быть либо жизнедеятельность молочнокислой палочки, вегетирующей в желудке лишь в отсутствии HCL, либо злокачественная опухоль желудка, в клетках которой гликолиз протекает по анаэробному типу с образованием молочной кислоты. Определяют молочную кислоту реакцией Уффельманна. В пробирку наливают на 2/3 ее объема 1-2 % раствор фенола и прибавляют 2-3 капли 10 % хлорного железа. Реактив приобретает темно-фиолетовое окрашивание. Наклонив пробирку, по стенке ее медленно опускают 2-3 капли желудочного сока. При наличии молочной кислоты капли сока, опустившиеся на дно пробирки, окрашиваются молочнокислым железом в ярко-желтый цвет.

7. Микроскопическое исследование осадка желудочного сока, его показатели в норме и патологии.

Для микроскопического исследования желудочного содержимого приготавливают нативные препараты. Небольшое количество желудочного сока разливают в чашки Петри, рассматривают содержимое их на черном и белом фоне и отбирают для приготовления микропрепаратов слизистые, кровянистые, тканевые и другие частицы.

При микроскопировании в препаратах могут быть обнаружены слизь, эпителиальные клетки, лейкоциты, эритроциты, крахмальные зерна, бактерии и др.

У здорового человека в препаратах находят преимущественно плоский эпителий и лейкоциты, попадающие в желудок из полости рта.

Обнаружение мышечных волокон, растительной клетчатки, жира, жирных кислот указывает на нарушение эвакуации пищи из желудка. В застойном желудочном содержимом, имеющем кислую реакцию, находят сарцины (тетракокки в виде перевязанных тюков); при отсутствии свободной HCL встречаются палочки молочнокислого брожения. При наличии в желудочном содержимом свободной соляной кислоты в препаратах выявляются лейкоциты - в виде голых ядер нейтрофилов, голые овальной формы ядра цилиндрического эпителия, кровь чаще всего в виде отложений хлорида гематина на слизи. Большое количество эритроцитов, в том числе и неизменных, заставляет заподозрить эрозивный гастрит, язву или опухоль. В отсутствии соляной кислоты в желудочном соке - лейкоциты неизменные, клетки цилиндрического эпителия конической формы, а также обнаруживают молочнокислые бактерии. Сочетание лейкоцитов в слизи, цилиндрического (а не плоского) эпителия в виде комплексов и отложений гематина может свидетельствовать о воспалительном поражении слизистой оболочки желудка.