15. Коллекция оздорвленных сортов картофеля для безпрерывного выращивания.
Чтобы ежегодно получать растения in vitro, их поддерживают на спец пит среде. Чтобы реже черенковать в пит среду добавляют орган соединения. ТУР – укорачивает междоузлие (на 1 л 0,4 – 0,5 мл/л). Выращивают микроклубни in vitro и хранить в холодильнике до весны. Вирусы с семенами не передаются.
Все вегетативно размножающиеся растения размножают черенками, потому что их надо оздоравливать.
Летом-верхушки побегов. Зимой и весной - ростки с клубня.
16. Технология выращивания и фитосанитария оздоровительного картофеля
Растения из пробирок в 1-ый год выращивают в плёночно – марлиевой теплице, чтобы получить макс урожай сем-х фракций (60-90 гр клубней)
Почвы: торф – песок – дерновая земля 3:1:1
В грунте не должно быть проволочника, рака картофеля, нематод, парши, нужно тщательно убирать клубни. Если используют использованный грунт, то его черенкуют. В грунте не должно быть личинок проволочника, хрущей, гусениц совки, нематод, фузариоза, рака
Защита от насекомых: тля, цикадка, белокрылка. Поэтому во время высадки делают профилактику.
Борьба с сорняками, нельзя выращивать другие культуры.
Борьба с болезнями.
Соматическая гибридизация:
Растения ин витро могут образовать калусную ткань, если ее выращивать без агара, получают суспензионную культуру клеток. Суспензионная культура – выращивание в жидкой среде с постоянным перемешиванием.
Летом-верхушки побегов. Зимой и весной - ростки с клубня.
17. Ифа. Метод двойных антител.
Иммуноферментный анализ (ИФА) – современный способ распознавания огромного кол-ва возбудителей болезней, основанный на способности человеческого организма вырабатывать так называемые антитела в ответ на обнаружение чужеродных веществ – антигенов.
Виды: не/ прямой, сендвич, тв фазы, точечный, радиоактивный, флуоресцентный
Метод ИФА опред конц вирусов
Рассмотрим метод двойных антител твердофазного ИФА сендвич вариант
Метод ИФА основан на иммунной и ферментной реакции.
При проведении этого варианта ИФА высокоспецифичные поли- или моноклональные антитела, адсорбированные на твердой фазе, инкубируют с исследуемым образцом. После процедуры отмывания в лунки вносят меченные фер-ментом антитела (конъюгат) к тому же антигену и далее проводят все остальные этапы реакции. Эффективность образования специфического комплекса на каждой стадии анализа зависит от константы связывания реакции антиген-антитело.
Антитела – белки, которые образ-ся в орг животного (чаще в теле кролика) , вводя вирус растительного происхождения. В настоящее время моноклональным способом ин витро.
Антиген – определяемый вирус.
Конъюгат – антиген с пришитой меткой ( фермент пероксидаза).
Субтрат – перекись водорода и гидрохинон
Оценивают результаты по интенсивности коричневой окраски визуально или на фотометре Унискан.
Схема ИФА, положительный вариант / отрицательный вариант:
18. Антитела, антиген, конъюгат, метка – их роль при ифа.
Антитела - белки, которые образ-ся в орг животного (чаще в теле кролика) , вводя вирус растительного происхождения. В настоящее время моноклональным способом ин витро.
Антиген - возбудители опред-х инфекций
Конъюгат – антиген с пришитой меткой (фермент пероксидаза).
Метка - пероксидаза, но может быть и радиоактивная метка
Чувствительность ИФА зависит от концентрации, активности и специфичности используемых антител.
Ферментные маркеры, используемые в ИФА, должны обладать следующими свойствами:
– высокая активность и стабильность фермента в условиях анализа, при модификации и в конъюгате с антителами или другими белками;
– наличие чувствительных субстратов и простота метода определения продуктов или субстратов ферментативной реакции;
– возможность адаптации субстратных систем к дальнейшему усилению;
– отсутствие фермента и его ингибиторов в исследуемой биологической жидкости.